荧光定量PCR检测慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者痰中肺炎链球菌的研究

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荧光定量PCR检测慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者痰中肺炎链球菌的研究

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毕业论文范文题目：荧光定量PCR检测慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者痰中肺炎链球菌的研究，论文范文关键词：荧光定量PCR检测慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者痰中肺炎链球菌的研究
荧光定量PCR检测慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者痰中肺炎链球菌的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的:1、细菌感染在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)中占有相当大的比例。应用常规的培养方法检测,其阳性率仅为10%-30%,甚至更低;国外多篇文献报道,肺炎链球菌(streptococcuspneumoniae,SP)为AECOPD的常见致病菌之一;而我国各地区对该项报道的研究结果却差异较大。本实验旨在建立荧光定量PCR技术对AECOPD患者痰中SP快速检测的方法,与近年来国内外的相关研究进行比较分析,明确该方法相对于传统培养方法的优越性;2、痰培养方法受多种因素制约,目前临床研究多专注于对标本的收集过程、培养操作过程（此处忽略..）中可能出现的相关问题进行分析,但就痰液本身对细菌生长的影响并无相关报道。本实验通过SP纯菌液自身培养与痰液中混合SP菌液培养相比较,观察痰液本身对SP生长有无影响。方法:1、收集2010年1月——2011年3月入住我院呼吸科的AECOPD患者59例,其中男性45例,女性14例,年龄51-89岁,有吸烟史者44人,近期应用全身性激素6人;诊断标准参照2007年中华医学会呼吸病学会慢性阻塞性肺疾病诊治指南;留取患者入院前三天的痰标本,无痰者雾化辅助排痰,排痰困难者,可辅助吸痰。对59例患者的痰标本进行培养,观察培养结果;选择自溶素lytA作为SP特异性基因设计标准品、（本文此处忽略..）引物及探针,应用RT-PCR技术检测标本中的SP,并根据标本中SP的含量估算SP感染率;2、同等条件下,将SP纯菌液倍比稀释成10~(-1)—10~(-7)7个梯度,并选择10~(-1),10~(-2),10~(-3),10~(-4)4个稀释度各10μl分别进行培养,同时将痰液混合SP纯菌液培养,其痰中SP的浓度与纯SP菌液相同,对比观察痰液对SP生长的影响。结果:59例AECOPD患者第一天的合格痰标本培养结果阳性率为22%,其中白色念珠菌7例,阳性率为11.8%,疑为污染所致;其余为:铜绿假单胞菌2例(3.3%),肺炎克雷伯杆菌1例(1.7%),类白喉棒状杆菌1例(1.7%),奇异变形菌1例(1.7%)荧光假单胞菌1例(1.7%),但是标本中无肺炎（本文此处忽略..）链球菌的生长;留取三天的合格标本总数为104份,其中PCR阳性为70份,阳性率为67.3%,明显高于培养的结果(22%)。根据检测结果,我们又可以粗略估计AECOPD中SP的感染情况,从而推断感染SP的患者为18例;对AECOPD入院前用药情况及其他临床相关因素与SP感染情况进行Fisher’s检验及χ2检验,结果均无显著性差异(P0.05)。一定浓度的SP纯菌液与同样浓度但混有合格痰标本的菌液进行对比培养,菌落的生长相差悬殊,在1.15×105cfu/ml的纯菌液中,菌落数量1000个,而混有痰液后,该浓度的菌落平均数只有个位;1.15×10~3cfu/ml的纯菌液中,仍有SP（此处忽略..）生长,而混痰组在此浓度已无SP生长。结论:1、荧光定量PCR作为一种快速的检测技术,其对肺炎链球菌检测的阳性率明显高于传统的培养方法;2、痰液在培养的检测方式中,对于肺炎链球菌的生长有影响。

以上为本篇毕业论文范文荧光定量PCR检测慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者痰中肺炎链球菌的研究的介绍部分。

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