神经型一氧化氮合酶与血红素氧合酶-2在应激后大鼠肠组织中的相关表达

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神经型一氧化氮合酶与血红素氧合酶-2在应激后大鼠肠组织中的相关表达

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毕业论文范文题目：神经型一氧化氮合酶与血红素氧合酶-2在应激后大鼠肠组织中的相关表达，论文范文关键词：神经型一氧化氮合酶与血红素氧合酶-2在应激后大鼠肠组织中的相关表达
神经型一氧化氮合酶与血红素氧合酶-2在应激后大鼠肠组织中的相关表达毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：肠道存在复杂的肠神经系统(entericnervoussystem，ENS)。ENS接受中枢神经系统的调控，通过各种神经介质调节肠道平滑肌的运动和腺体分泌，维持其正常生理功能。近年来研究表明，某些肠道自身免疫性疾病、功能性疾病(如肠易激综合征，IBS)的发生、发展与肠道神经递质的异常调节有关。一氧化氮(nitricoxide，NO)是胃肠道重要的抑制性神经递质，参与对肠道平滑肌收缩的非胆碱能非肾上腺素能(NANC)神经调节。内源性NO由L-精氨酸在一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase，NOS)作用下产生，NOS包括三种亚型：神经型NOS(neuronalNOS，nNOS)、内皮型NOS(endothelialNOS，eNOS)和诱导型NOS(inducibleNOS，iNOS)。nNOS广泛分布于脑、脊髓和周围自主神经系统，产生的NO是细胞间重要的信号分子和神经递质。近年来有关nNOS在肠道分布的研究不多。内源性一氧化碳(carbonmonoxide，CO)是另一种重要的气体信号分（略..）子。人和哺乳动物内源性CO的产生主要由依赖于还原型辅酶Ⅱ(NADPH)和细胞色素P450的血红素氧合酶(heineoxygenase，HO)催化血红素形成。HO是CO生成过程中唯一的限速酶。目前已发现，HO有三种形式的同工酶，即HO-1、HO-2和HO-3。其中HO-1为诱导型，是一种热休克应激蛋白(HSP32)。HO-2和HO-3均为结构型，其中HO-2广泛分布于全身组织，可由肾上腺皮质激素引起上调，由HO-2产生的CO也是一种抑制性神经递质。研究表明CO与NO共存于人和哺乳动物脑内某些神经元及周围自主神经节中，均为重要的神经递质，在细胞信号传递中起重要作用，在生理上CO可能与NO有着协同、互补的作用。有关HO-2在肠道组织中的表达国内尚未见报道。浙江大学硕士学位论文近年来研究发现应激与某些肠道功能性疾病、自身免疫性疾病的发生、发展有关。应激可引起肠道功能紊乱，诱发或加重IBS的症状。也有学者认为应激是IBS的病因之一。但应激对nNOS和HO一2在肠道表达的具体影响尚不清楚，有关应激后nNOS、HO一（略..）2在肠道组织中的表达尚未见报道。而且本研究旨在通过免疫组化方法，观察nN0s和HO一2在水浸一束缚应激(waterimmersion一restraintstress，wRS)后大鼠肠组织中的表达，探讨应激对nNOS和HO一2在大鼠肠道表达特点、分布规律的影响及两者间的相关性，为IBS动物模型的制作提供新的思路。材料与方法1.实验动物及模型制作选用健康雄性sD大鼠40只，体重200一2209，由浙江省实验动物中心提供，用抽签法随机分成四组:应激组(n二10)、左旋硝基精氨酸甲酷(L一NAME)+应激组(n=10)和锌原叶琳(ZnPP)+应激组(n=10)及正常对照组(n=10)。采用水浸一束缚应激(WRS)方法制作动物模型，应激时间为4h。2.实验方法模型制作完成后，取对照组和各应激组大鼠腺胃部组织进行病理学检查，观察wRs所致胃勃膜损伤情况。取各组大鼠结肠标本常规固定、石蜡包埋，制作4料m连续切片，分别用于HE和免疫组化染色。用抗nNos、HO一2抗体检测nNOs、Ho一2在各组大鼠结肠组织中的分布。免疫组化染色方法采用SABC法。然后对免疫组化（本文此处忽略..）结果进行图象分析、定量测定，数据以均数士标准差(吐S)表示，运用sPss10.0统计软件进行t检验和相关性分析。结果1.病理学观察:(l)大体观显示对照组大鼠的胃勃膜未见损伤性改变，各应激组胃勃膜表面附有大量血痴，腺胃部弥漫性点线状出血、糜烂:结肠勃膜未见糜烂、出血等损伤性变化。(2)HE染色结果显示对照组胃勃膜上皮结构完整，腺体排列整齐，层次清楚，各应激组胃勃膜出血、坏死、脱落，溃疡形成;各组大鼠的结肠猫膜未见损伤性变化。浙江大学硕士学位论文2.nNOS在对照组、应激组、L一NAME十应激组和ZnPP十应激组大鼠结肠均有表达，主要见于薪膜下神经丛和肠肌间神经丛的神经元胞体。应激组结肠勃膜下神经丛和肌间神经丛的nNOS阳性神经元灰度值均较对照组减少(P0.05、P0.01)，平均密度均高于对照组(P0.05、P0.05)，即nNOS表达增强。此外，应激组的勃膜上皮细胞也有nNOS表达。与应激组相比，L一NAME+应激组结肠砧膜下神经丛和肌间神经丛的nNOS阳性神经元灰度值均增加(P0.05、P0.05)，平均密度均低于应激组(P0.05、P（此处忽略..）0.05)，即nNOS表达减弱。L一NAME+应激组豁膜下神经丛和肌间神经丛的nNOS阳性神经元灰度值、平均密度与对照组比较，差别均无显著性意义(P0.05)。ZnPP十应激组结肠勃膜下神经丛和肌间神经丛的nNOS阳性神经元灰度值、平均密度与应激组相比，差别均无显著性意义(P0.05)。3.在对照组、应激组、L一NAME+应激组和ZnPP+应激组大鼠结肠均有HO一2表达。对照组结肠HO一2表达主要见于勃膜肌、肠环行肌细胞及勃膜下层的血管内皮和平滑肌细胞。应激组结肠HO一2免疫阳性勃膜肌的灰度值较对照组减少(P0.05)，环行肌阳性单位明显高于对照组(P0.05)，即应激组豁膜肌和环行肌的HO一2表达均明显增强。此外，H

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