雷帕霉素和他克莫司对大鼠肝移植后急性移植物抗宿主病的不同作用及其机制研究

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雷帕霉素和他克莫司对大鼠肝移植后急性移植物抗宿主病的不同作用及其机制研究

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毕业论文范文题目：雷帕霉素和他克莫司对大鼠肝移植后急性移植物抗宿主病的不同作用及其机制研究，论文范文关键词：雷帕霉素和他克莫司对大鼠肝移植后急性移植物抗宿主病的不同作用及其机制研究
雷帕霉素和他克莫司对大鼠肝移植后急性移植物抗宿主病的不同作用及其机制研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：前言肝移植后急性移植物抗宿主病是一种发病率较低(1%-2%)但死亡率高达85%-90%的疾病,无论是诊断方面还是治疗方面都面临着巨大的挑战。大多数肝移植病人发病后出现全身性败血症、骨髓抑制和多器官功能衰竭。现有的治疗方法尚且存在很多争议,主要包括:增加免疫抑制剂、减少或间断性应用免疫抑制剂、抗淋巴细胞治疗(如抗胸腺细胞球蛋白、抗淋巴细胞球蛋白或单克隆抗淋巴细胞因子OKT3)、抗IL-2受体抗体(如daclizumab、basiliximab)和输入宿主免疫细胞。肝移植后急性移植物抗宿主病的发病机制并不明确。据国内外文献资料,目前对本病研究仍主要停留在临床病例报告和总结上,建立一个稳定的、可重复的动物模型能更深入的研究该疾病发生过程中免疫系统的改变如何导致疾病的发生和发展,并探索一种新的更为有效的治疗方法。经过几年的研究,我们成功的建立了世界上首个供体主导的供受体MHC单体单向相合的（略..）急性移植物抗宿主病的大鼠模型,同时发现该病的发生与调节性T细胞数目和比例的降低相关。本研究旨在于观察FK506和RAPA对大鼠LTx-aGVHD的不同作用,并研究疾病的发生发展和调节性T细胞比例变化的相关性。材料与方法一、实验动物及分组以雄性Lewis大鼠作为供体,(LewisXBN)F1大鼠作为受体,肝脏移植术后30min内自阴茎背静脉输入新鲜制备的4×10~8供体源脾脏细胞。依据大鼠发病后不同的治疗方案分为以下三组:(1)对照组:受体不应用任何药物治疗。(2)FK506组:受体在肝移植术后第8天开始灌胃,1mg/kg/天,连续8天,血药浓度达到10-12ng/ml。FK506用PBS稀释。(3)RAPA组:受体在肝移植术后第8天开始灌胃,1mg/kg/天,连续8天,血药浓度达到2-3ng/ml。二、aGVHD的检测术后每日观察aGVHD相关大体表现如皮炎、脱毛、腹泻、弓背等现象。在动物死亡时或术后16天留取皮肤、大肠、小肠（本文此处忽略..）组织标本,常规固定、染色后光镜下观察aGVHD相关病理表现,统计分析各组受体aGVHD的生存时间。三、外周血单个核细胞中CD4+CD25+调节性T细胞检测外周血血细胞梯度离心分离出单个核细胞后,应用流式细胞术检测CD4+CD25+调节性T细胞比例。四、免疫组化(SABC法)法检测肠道组织中Foxp3的表达测定皮肤标本中Foxp3的表达,分析Foxp3+细胞在皮肤组织单个核细胞中所占的比例与大鼠LTx-aGVHD受体生存率之间的相关性。五、统计学分析统计学处理用SPSS15.0软件完成,实验所得数据以(?)±s表示。生存分析和组间比较以ANOVA检验通过最小显著性测试(LSD)进行,P＜0.05为差异有统计学显著性意义。结果一、aGVHD的大体表现和病理表现在大鼠模型中所有的同种异基因移植受体均发生aGVHD。最早的大体变化发生在移植术后7-10天,大鼠出现轻度皮疹、耳廓静脉充血和腹泻。对照组大（文章此处忽略..）鼠aGVHD症状继续恶化直至死亡。FK506组和RAPA组最终死亡的大鼠发病情况与对照组大鼠相似;但对于长期存活的大鼠,aGVHD症状逐渐消失,皮炎、脱毛、腹泻、恶病质等临床表现好转,体重逐渐稳定。对照组大鼠皮肤的病理学检测发现aGVHD表现,表皮角化不良甚至松解、表皮和真皮层中出现中性粒及单个核细胞浸润,基底膜的退变。FK506组大鼠皮肤有部分中性粒及单个核细胞浸润,RAPA组大鼠皮肤病理学检测无明显中性粒及单个核细胞浸润。二、移植后受体死亡率和生存时间在对照组中,所有的受体均死于肝移植后19-29天。在FK506组中受体死亡率为50%(4/8),显著低于对照组中的死亡率。在RAPA组,只有一例同种异体受体死亡,死亡率显著低于对照组和FK506组。三、Foxp3免疫组化表达在肠道组织中对照组、FK506组、RAPA组的Foxp3的表达分别是0.9±0.4%,1.0±0.5%和3.8±1.5%。Foxp3的表达在RAPA组显著高于对（本文此处忽略..）照组或FK506组。四、移植术后外周血单个核细胞中CD4+CD25+调节性T细胞的比例变化对照组调节性T细胞的比例在肝移植术后第12N和第16天逐渐降低到3.1±0.4%和2.0±0.4%;在FK506组大鼠流式细胞学检测结果与对照组比较无显著性差异,但是RAPA组大鼠调节性T细胞比例明显高于对照组和FK506组的受体。结论1、雷帕霉素比FK506能更有效地降低大鼠肝移植后急性移植物抗宿主病的死亡率。2、其机制可能是通过增加外周血CD4+CD25+调节性T细胞的比例和组织中Foxp3的表达水平。

以上为本篇毕业论文范文雷帕霉素和他克莫司对大鼠肝移植后急性移植物抗宿主病的不同作用及其机制研究的介绍部分。

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