大鼠肝脏缺血再灌注不同时限缺氧引诱因子1的表白变更及意思探讨

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大鼠肝脏缺血再灌注不同时限缺氧引诱因子1的表白变更及意思探讨

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毕业论文范文题目：大鼠肝脏缺血再灌注不同时限缺氧引诱因子1的表白变更及意思探讨，论文范文关键词：大鼠肝脏缺血再灌注不同时限缺氧引诱因子1的表白变更及意思探讨
大鼠肝脏缺血再灌注不同时限缺氧引诱因子1的表白变更及意思探讨毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：跟着古代临床外科的进步,肝脏缺血再灌注伤害(hepaticischemiaandreperfusioninjury,HIRI)在肝脏外科及肝脏移植中的作用越来越受到器重,对其伤害机制的研究也较多。肝脏血流减少及随后的再灌注期的微轮回混乱等均导致细胞内的缺氧环境,必定会引起保持机体氧均衡的重要调节蛋白缺氧引诱因子-1(hypoxiainduciblefactor-1,HIF-1)的表白变更。目前对肝脏缺血再灌注期HIF-1的时程表白特点及意思尚不明白,少有文献报道。故本实验旨在研究肝脏缺血再灌注期HIF-1的时空表白特点及作用意思,以及其表白与HIRI过程中细胞伤害及细胞凋亡的关联,为肝脏缺血再灌注伤害的防治摸索新的方向。实验一HIF-1α在大鼠肝脏不同缺血时限的表白变更及意思一目标树破大鼠肝脏缺血伤害模型,检测HIF-1α跟Caspase-3蛋白在肝脏不同缺血时限的表白变更并探讨其意思。二方法1.健康SD大鼠35只随机分为畸形组(5只)、假手术组(15只)、缺血组(15只),假手术组及缺血组又按不同缺血时限分为30min、45min、60min三个亚组,每组5只大鼠,制备大鼠全肝血流阻断模型。2.血液标本由肝高低腔静脉抽取约2ml,检测血清ALT值。3.大鼠肝脏标本取材后经10%福尔马林固定,电镜标本取材后即放入预先配置的3%戊二醛中固定20min掉队行修块取材。4.HE染色及免疫组织化学均按试剂盒内操作步骤进行,兔抗大鼠HIF-1α跟Caspase-3的工作浓度为1:100,均购于武汉博士德（本文此处忽略..）生物工程有限公司。5.光镜及电镜下进行病理组织学察看,免疫组织化学SABC法检测HIF-1α跟Caspase-3在肝脏不同缺血时限的表白量,采取HPIAS-1000高清楚彩色病理图像分析体系进行定量检测。6.所有计量数据利用SPSS11.5进行统计学处理,采取析因设计方差分析分析主效应与交互效应后,LSD法测验各组间差别,P＜0.05表示有统计学意思。三成果1.畸形组与假手术组的HIF-1α表白比较,其差别均不存在统计学意思(P＞0.05)。各时限缺血组与假手术组比拟,其成果存在明显的统计学差别(P＜0.01)。自缺血30min后HIF-1α蛋白的表白即明显增加,且随缺血时限的延长呈逐步回升趋势。在区域分布上可见,缺血30min时HIF-1α蛋白重要表白在汇管区门静脉、微血管、微胆管四周的细胞内,部分细胞内呈强阳性表白。缺血45min时,表白区域逐步向小叶间中心静脉区蔓延,缺血60min时,中心静脉内皮细胞及其四周肝细胞中都可见到HIF-1α蛋白阳性表白。2.畸形组与假手术组中Caspase-3蛋白阳性表白量较少,比拟较无统计学差别(P＞0.05)。各时限点的缺血组与假手术组比拟,均存在明显的统计学差别(P＜0.01)。跟着缺血时限的延长,各缺血组Caspase-3的表白量在统计学上无差别(P＞0.05)。阳性细胞重要呈当初肝窦状内皮细胞中。3.缺血组血清ALT水均匀高于畸形组及假手术组,跟着缺血时限的增加,ALT逐步回升,组织病理学伤害亦呈加重趋势。四探讨本实验研究成果表明,单纯的手术伤害未影响到肝脏的（文章此处忽略..）血供时,不会引起肝脏组织及细胞的伤害,故血清ALT值处于畸形程度,作为机体缺氧调控因子的HIF-1α蛋白的表白量极低,凋亡履行蛋白Caspase-3的表白量也处于基线程度。一旦肝脏遭受缺血性伤害,即有HIF-1α蛋白应激性的明显表白上调,HIF-1α蛋白的积聚量与肝功能变更及细胞状况学伤害的程度呈必定的相干性,因此急性缺血期HIF-1α的表白强度可能作为反应机体缺氧伤害程度的一个敏感指标。大鼠遭受突发30min的肝缺血,即可使Caspase-3明显性表白上调,活化凋亡程序。因此,如何禁止肝窦内皮细胞中Caspase-3蛋白的表白上调与激活,可能作为减轻肝脏缺血伤害的防治方向之一。实验二HIF-1α在大鼠肝脏缺血45min再灌注不同时限表白变更及意思探讨一目标树破大鼠肝脏缺血再灌注伤害模型,用免疫组织化学SABC法检测HIF-1α跟Caspase-3蛋白在肝脏缺血45min再灌注不同时限的表白变更并探讨其意思,并察看丹参预处理对它们表白的影响。二方法1.健康SD大鼠80只随机分为畸形组(5只)、假手术组(25只)、缺血再灌注组(25只),丹参处理组(25只),假手术组、缺血再灌注组及丹参处理组又按不同再灌注时限(0h、3h、12h、24h、72h)分为五个亚组,每组5只大鼠。2.模型制备、取材方法、HE染色及免疫组织化学染色步骤、察看方法及统计学处理等,同实验一。三成果1.HIF-1α在畸形组与假手术组中阳性表白极弱,两者比较无统计学差别(P＞0.05),在缺血后HIF-1α表白即明显增加,至再灌注12h后（文章此处忽略..）达到峰值,与同期假手术组比较均有明显性差别(P＜0.01),再灌注24h后回落至基线程度。丹参处理组在再灌注0h、3h可上调HIF-1α表白,在再灌注12h时下调HIF-1α的表白,与同期缺血再灌注组比较均有统计学差别(P＜0.05)至再灌注24h亦回落至基线程度。3.Caspase-3在畸形组与假手术组间表白亦无差别,两者比较(P＞0.05),缺血后Caspase-3的表白敏捷增加,至再灌注24h时达到峰值,与同期假手术组比较均存在明显性差别(P＜0.01),再灌注72小时后回落至基线程度。丹参处理组与同期缺血再灌注组比拟,均较低,两者存在统计学差别(P＜0.05)。3.病理状况学察看可见,肝脏经过缺血伤害后,跟着再灌注时限的延长,组织及细胞伤害逐步加剧,至再灌注24h时达到侵害的顶峰,至再灌注72h伤害逐步恢复至畸形,丹参处理组较同时限点再灌注组伤害轻。四论断肝脏缺血伤害跟再灌注伤害是一个密切接洽、极其复杂的病理生理过程,有多种因素独特参加,HIF-1α跟Caspase-3也参加此过程中。本实验通过对大鼠肝脏缺血45min再灌注0～72h内HIF-1α、Caspase-3及同期病理状况学伤害的察看,分析演绎该过程可能经历以下四期:①缺氧应激期(0～3h),此期HIF-1α跟Caspase-3表白敏捷加强,镜下可见细胞及细胞器呈现肿胀,肝窦缝隙变窄,体现此期肝脏组织对缺氧伤害及氧化伤害敏捷产生应激反应。②适度反应期(3～12h),此期HIF-1α的表白持续加强,在12h时达峰值,并波及到肝脏的各个区域,Caspase-3亦持续加强表（文章此处忽略..）白,镜下可见部分区域细胞的肿胀更加明显,部分区域细胞胞核可见皱缩。③持续伤害期(12～24h),此期HIF-1α蛋白表白逐步减弱,至24h时已濒临于基线程度,而Caspase-3持续加强表白,24h时达峰值,镜下可见此期组织细胞伤害逐步加重,于24h左右组织伤害最重。④恢复期(24h～72h),此期Caspase-3蛋白也逐步回落至基线程度,肝脏组织处于伤害的恢复阶段,状况学上亦可见肝组织的增殖及重构。本实验成果显示丹参在肝脏缺血再灌注中,能上调缺氧应激期HIF-1α的表白,克制随后适度反应期的HIF-1α蛋白的表白量,揣测丹参可能通过对HIF-1α表白的均衡调节作用,来发挥其抗缺氧、抗伤害的作用。丹参也能通过克制凋亡因子的激活及表白,进步肝脏对伤害应激状况的适应,增加细胞存活机会,从而保护肝脏,具体机制及环节另需进一步的研究。

以上为本篇毕业论文范文大鼠肝脏缺血再灌注不同时限缺氧引诱因子1的表白变更及意思探讨的介绍部分。

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