重组腺相关病毒神经肽Y基因转染对红藻氨酸致痫大鼠癫痫发作及其

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重组腺相关病毒神经肽Y基因转染对红藻氨酸致痫大鼠癫痫发作及其

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毕业论文范文题目：重组腺相关病毒神经肽Y基因转染对红藻氨酸致痫大鼠癫痫发作及其，论文范文关键词：重组腺相关病毒神经肽Y基因转染对红藻氨酸致痫大鼠癫痫发作及其
重组腺相关病毒神经肽Y基因转染对红藻氨酸致痫大鼠癫痫发作及其毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：癫痫是由于多种原因引起的脑细胞群异常同步化放电所致的突然性、反复性和短暂性的脑功能障碍综合征，可以表现为运动、感觉、意识、精神等多方面的功能障碍。中国目前至少有700多万癫痫患者，其中约有20%的癫痫患者为药物难治性癫痫，成为临床治疗中的难点。长期反复癫痫发作不仅严重影响了癫痫患者的身体健康和正常生活质量，也给患者家庭及社会带来巨大的负担和压力。目前，药物难治性癫痫主要采用外科手术治疗，但是外科手术只能切除患者致痫灶的发作起始区，并未完全改变脑内神经细胞的过度兴奋状态和相关离子通道异常，而且，外科手术本身存在着一定的风险，例如麻醉意外、出血、感染、认知障碍及肢体偏瘫等。随着对癫痫发病机制认识的不断深入以及分子生物学技术的发展，基因治疗为彻底治愈癫痫带来了新的希（本文此处忽略..）望。资料显示，神经肽Y（neuropeptideY,NPY）在中枢神经系统中主要分布在大脑皮层、海马、丘脑、下丘脑及脑干等处，尤以海马内浓度最高，NPY及其受体与癫痫的发生密切相关，受到广泛的关注，其在各种癫痫动物模型中的作用非常复杂，常因模型或给药途径不同出现不一致甚至相互矛盾的实验结果。本研究以NPY为治疗基因，以重组腺相关病毒为载体，将NPY基因转染到脑组织特定靶区（本研究的前期实验已证明rAAV2/1-NPY-EGFP在癫痫病理状态下的脑组织中可以实现有效表达，且脑室注射途径优于海马注射途径，故本实验主要采取脑室注射途径），观察NPY基因过表达对红藻氨酸诱导慢性癫痫大鼠发作的影响，并进一步运用荧光定量PCR技术、免疫组织化学技术来分析NPY调控（此处忽略..）癫痫发作后海马组织中p35表达的变化。目的：观察rAAV2/1-NPY-EGFP基因转染对大鼠癫痫发作、EEG及其海马组织中p35表达的影响，以探讨其在癫痫发病机制中的作用以及NPY基因治疗慢性癫痫的可能机制。方法：72只Wistar健康雄性成年大鼠，随机分为对照组（n=24）和点燃组（n=48）。对照组：海马CA3区注射等量的生理盐水；点燃组注射KA1.5μl（0.4μg/μl）5次造成慢性癫痫大鼠模型后，又随机分为KA组（n=24）和rAAV2/1-NPY-EGFP组（n=24）（本研究的前期实验已证明rAAV2/1-empty-EGFP对实验结果无明显影响）。制模过程中出现死亡或不符合模型标准的均及时剔除，然后随机补充，保证每组动物24只。rAAV2/1-NPY-EGFP组向脑室注射10μl的rAAV2/1-（略..）NPY-EGFP，滴度为5×1011v.g./ml，KA组注射等量的生理盐水。分别于注射后2w和4w观察大鼠的癫痫发作情况及发作潜伏期，EEG癫痫波的频率和波幅，随后取材用荧光定量PCR技术检测大鼠海马组织中p35mRNA表达，免疫组织化学技术检测p35蛋白表达。结果：1rAAV2/1-NPY-EGFP组大鼠随观察时间的延长，发作程度逐渐减轻，与KA组大鼠相比，于4w时，大鼠发作症状明显减轻（P0.05），发作潜伏期延长（P0.05），脑电图癫痫波放电频率减少，波幅降低。2KA组和rAAV2/1-NPY-EGFP组大鼠在注射后2w和4wNPY升高，与对照组相比差异有显著性（P0.05）。在注射后4w，rAAV2/1-NPY-EGFP组NPY的mRNA及蛋白表达均高于KA组（P0.05）。3在注射后2w和4w，KA组海马组织（文章此处忽略..）中P35的mRNA及蛋白表达均显著升高，与对照组相比差异有显著性（P0.05）。rAAV2/1-NPY-EGFP组海马组织中P35的mRNA及蛋白表达逐渐降低，于4w时，与KA组相比，有显著性差异（P0.05）。结论：1rAAV2/1-NPY-EGFP基因转染可以有效抑制癫痫发作，为NPY基因治疗临床难治性癫痫提供了有力试验支持。2rAAV2/1-NPY-EGFP基因转染抑制了癫痫大鼠海马组织中P35的表达，NPY有可能通过下调海马组织中P35的表达水平来发挥抗癫痫和神经保护作用。

以上为本篇毕业论文范文重组腺相关病毒神经肽Y基因转染对红藻氨酸致痫大鼠癫痫发作及其的介绍部分。

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