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结直肠癌中miR-126的转移克制功能研究及其靶基因的鉴定

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毕业论文范文题目:结直肠癌中miR-126的转移克制功能研究及其靶基因的鉴定,论文范文关键词:结直肠癌中miR-126的转移克制功能研究及其靶基因的鉴定
结直肠癌中miR-126的转移克制功能研究及其靶基因的鉴定毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:结直肠癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,在美国等发达国度居癌症发病率第3位、逝世亡率第2位[t]。我国近多少十年来的结直肠癌发病率回升趋势亦十明显显。只管医学科学技巧始终发展,但结直肠癌患者的医治及预后并不获得明显功能。早期结直肠癌患者5年生存率约为90%,然而晚期患者的5年生存率仍仅为10%,无明显改良[1]。结肠癌对人类健康最大的迫害是转移跟复发,结直肠癌的转移是一个复杂的过程,波及到多步骤、多因素,具体的发病机制仍不非常明白。因此,深刻探讨结直肠癌侵袭转移的发病机制,对临床上结直肠癌转移的早期断定、及时诊治、改良预后存在重要意思。microRNA(简称miRNA),是真核生物中一类长度约为19-25个核苷酸,参加基因转录后程度调控的非编码小分子RNA。它通过与靶:mRNA完全或不完全的互补配对,促进靶mRNA降解或克制其蛋(略..)白的翻译,在细胞增殖、分化、凋亡、基因调控及疾病的产生中表演重要的角色。miRNA能克制很多癌基因跟抑癌基因,从而在肿瘤产生过程中起着非常重要的作用[2]。研究已证切实结直肠癌中存在多个miRNA分子的异样表白,分辨与不同临床分期、分化水等同临床病理特点相干[3-6],提示miRNA在结直肠癌发病以及进展转移机制跟预后断定方面可能起重要的作用。这些成果给结直肠癌的产生发展的研究提供了一个新的视点,包含其侵袭转移,并终极将给结肠癌的预后断定跟医治提供新的策略。本研究组在采取miRNA芯片研究结肠癌转移克制基因NGX6的作用机制过程中发明:与NGX6转染前的结肠癌细胞株比较,miR-126在NGX6转染后的低转移细胞细胞株表白上调;进一步采取Real-timePCR证明[7],提示miR-126可能与结肠癌转移有关。研究表(此处忽略..)明,miR-126与肺癌、胃癌、乳腺癌、结肠癌等恶性肿瘤密切相干,并有文献报道miR-126在结肠癌中常常表白下调[8-11]。那么miR-126分子是怎么参加结肠癌的产生发展过程的呢?为深刻探讨miR-126在结直肠癌产生发展机制中,特别是在其侵袭转移的病理过程中发挥的作用,本课题在不同结肠癌细胞系中研究miR-126的生物学功能,并进一步鉴定了其下游靶基因,为结肠癌转移的诊治提供新靶点。1.Real-timePCR检测miR-126在结肠癌细胞中的表白情况对HT-29、SW480、SW620三株结肠癌细胞系跟对比的结肠癌癌旁畸形结肠粘膜组织进行miRNAReal-timePCR实验,检测miR-126的表白情况,成果表明miR-126在三株结肠癌细胞中的绝对表白程度比癌旁畸形上皮组织明显降落(P0.01)。2.miR-126在结肠癌细胞系中的细胞生物学功能研究在结肠癌HT-29细胞(文章此处忽略..)中转染miR-126mimics后,用MTT法检测肿瘤细胞增殖的情况。成果显示在48、72、96、120小时可察看到转染miR-126mimics组细胞成长活力较其它细胞组明显降落。在结肠癌SW480、SW620细胞中过表白miR-126后,分辨用划痕实验及Transwell实验来检测其细胞的迁徙侵袭才能。成果表明miR-126mimics可克制SW480、SW620细胞的迁徙侵袭才能。这些实验表明miR-126在结肠癌细胞中发挥了抑瘤基因的作用。3.miR-126的生物信息学分析及其下游靶基因的猜测与实验验证miRBase软件分析miR-126的基本信息,并采取MicrocosmTargets软件猜测了miR-126的靶基因可能为CXCR4,研究表明CXCR4与恶性肿瘤细胞侵袭转移密切相干。为鉴定miR-126负调控的靶基因,本研究构建了含CXCR4与miR-126结合位点序列及其缺失渐变序列的PM(本文此处忽略..)IR载体,采取荧光素酶报告体系、Western-blotting分析验证miR-126的靶基因,证明了CXCR4是miR-126调控的靶基因。论断1.miR-126在HT-29、SW480、SW620三株结肠癌细胞系中表白下调;miR-126可克制HT-29细胞的成长增殖,克制SW480、SW620细胞的迁徙侵袭才能,表明miR-126在结肠癌细胞中可能起到抑瘤基因的作用。2.在结肠癌中,CXCR4是miR-126的下游靶基因。


以上为本篇毕业论文范文结直肠癌中miR-126的转移克制功能研究及其靶基因的鉴定的介绍部分。
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