体外引诱人脐带血干细胞向肝细胞样细胞分化的研究

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体外引诱人脐带血干细胞向肝细胞样细胞分化的研究

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毕业论文范文题目：体外引诱人脐带血干细胞向肝细胞样细胞分化的研究，论文范文关键词：体外引诱人脐带血干细胞向肝细胞样细胞分化的研究
体外引诱人脐带血干细胞向肝细胞样细胞分化的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：背景与目标干细胞是一类存在自我复制跟增殖分化才能的原始细胞，是构成生命机体各种组织器官的来源细胞。根据其发育阶段，干细胞可分为胚胎干细胞(Embryonicstemcells)跟成体干细胞(Adultstemcells)。胚胎干细胞因为伦理、法律等起因研究跟利用受限，因此人们更加关注成体干细胞的研究。成体干细胞的可塑性是目前研究的热点范畴，特定的组织干／祖细胞存在多向分化潜能，不仅可能分化为同一胚层来源的细胞，而且可能跨胚层“横向分化”(Trans—Differentiation)为不同胚层来源的细胞。1999年美国科学家发明小鼠肌肉组织干细胞可能横向分化成血液细胞，之后研究者又证明从胎儿脑组织中获得的神经干细胞能产生血液细胞，造血干细胞跟间充质干细胞能产生骨骼肌、心肌、肝细胞、神经胶质细胞跟神经元样细胞。研究证明，脐带血中富含造血干／祖细胞，是骨髓跟外周血后的第三种造血干细胞来源。并且脐带血中的造血干细胞的增殖才能与自我更新才能超（此处忽略..）过或类似于骨髓中的造血干细胞。而且跟着研究的深刻，发明脐带血中岂但含有丰富的造血干细胞，还含有多潜能干细胞，也称为间充质干细胞，可向内皮、血管以及神经等组织分化。干细胞在生物医学范畴研究获得的成绩，为肝脏疾病的医治研究提供了新的思路。成体干细胞的定向引诱分化可向肝细胞移植、生物人工肝提供充分的供体，以期用来医治各种急、慢性肝功能衰竭跟肝脏代谢性疾病。目前对体内外引诱骨髓干细胞向肝细胞分化已有较多研究，但体外引诱脐带血干细胞定向分化为肝细胞则少见报道。基于目前的研究现状，本课题旨在探明人脐带血单个核细胞跟间充质干细胞是否在体外引诱分化为肝细胞样细胞，并摸索脐带血干细胞引诱分化为肝细胞样细胞的分化前提。另外通过察看两种成长因子的作用及其相应受体的表白情况，探讨这些因素在脐带血干细胞向肝细胞定向分化中的作用，从而在必定程度上探讨分化的机制。郑州大学2004年硕士体外引诱人脐带血干细胞向肝细胞样细胞分化的研究方法无菌前提下穿刺脐（此处忽略..）静脉，密闭式采血法采集畸形产妇(妊娠36一42周)脐带血，构椽酸盐、磷酸盐跟葡萄糖(CPD)抗凝，用绝对密度为1.077的淋巴细胞分别液分别脐带血单个核细胞，台盼蓝染色跟苏木素染核断定细胞活度及纯度，进而采取贴壁培养法获得间充质干细胞，单个核细胞跟间充质干细胞用含1既胎牛血清的DMEM(高糖)进行纯化跟扩增培养，用流式细胞仪检测其名义标记。对单个核细胞跟间充质干细胞分辨用肝细胞成长因子(HGF)、成纤维细胞成长因子(FGF4)、俩者结合、无成长因子四种处理因素，及含2%胎牛血高傲糖D施M，1X胰岛素转铁蛋白硒(ITS)进行引诱培养，并于引诱前及引诱后的第7、14、21、28天留取细胞涂片或爬片，用RT一PCR法检测肝细胞标记物甲胎蛋白、白蛋白及两种成长因子的受体C一met、FGFRZmRNA程度的表白，用免疫组化法检测甲胎蛋白、白蛋白、抗肝细胞抗体跟CK18的表白，并用PAS法进行糖原染色，分析是否引诱出肝细胞样细胞。统计学数据用均数士标准差(牙士s)表示，采取SPSS10.O统计学软件（此处忽略..），用单因素方差分析跟t测验对材料进行统计分析。成果密度梯度离心法分别的脐带血单个核细胞，活力及纯度均95%。其中CD34+细胞均匀为0.%士0.12%。脐带血间充质干细胞分别24小时后逐步贴壁，l周后呈长梭形、克隆样成长。流式细胞仪检测成果显示，脐带血间充质干细胞强表白cD29、CD44，不表白CD34。单个核细胞跟间充质干细胞均在引诱前检测到C一met、FGFRZ的少量表白，未检测到甲胎蛋白、白蛋白、抗肝细胞抗体、CK18、糖原的表白。引诱后7天检测出甲胎蛋白mRNA及蛋白程度的表白，21天检测出白蛋白mRNA及蛋白程度的表白，及CK18、抗肝细胞抗体蛋白程度的表白，随引诱时光的延郑州大学2004年硕士研究生毕业论体裁外引诱人脐带血干细胞向肝细胞样细胞分化的研究长C一met，FGFRZmRNA表白增高，21天、28天均可检测到糖原染色阳性细胞，无成长因子引诱组在以上时光点均未检测到上述指标。5.统计成果显示，单个核细胞及间充质干细胞HGF+FGF4引诱组甲胎蛋白、白蛋白、CK18、抗肝（文章此处忽略..）细胞抗体、糖原阳性率均高于单独成长因子引诱组(P0.05);上述指标在单独HGF、单独FGF4引诱组间无明显差别(P.05)。论断1.密度梯度离心法适于分别脐带血单个核细胞，且活率跟纯度均较好。2.密度梯度离心法加贴壁培养法适于分别脐带血间充质干细胞，活率及纯度均较局。3.人脐带血单个核细胞、间充质千细胞均可在体外引诱分化为存在肝系细胞表型跟功能的细胞。4.HGF、FGF4均能引诱人脐带血干细胞分化为存在肝系细胞表型跟功能的细胞，且二者在必定程度上有联配合用。5.C一met、FGF凡mRNA在引诱前的人脐带血单个核细胞跟间充质干细胞均有低程度表白，加成长因子引诱培养后表白程度增高。成长因子与其相应受体之间，可能存在正反馈调节机制。

以上为本篇毕业论文范文体外引诱人脐带血干细胞向肝细胞样细胞分化的研究的介绍部分。

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