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核酸探针与核酸酶结合在分析检测中的利用

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毕业论文范文题目:核酸探针与核酸酶结合在分析检测中的利用,论文范文关键词:核酸探针与核酸酶结合在分析检测中的利用
核酸探针与核酸酶结合在分析检测中的利用毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:核酸探针易于合成、牢固性好、设计简单、信号机制机动,已广泛利用于生物学、医学跟化学等范畴。核酸探针与核酸酶结合可能构成多种机动的分子辨认信号转换机制,不仅可能实现高灵敏、高特异性检测,.还用于生物分子彼此作用的实时、动态监测。基于此,本文把核酸探针与核酸酶相结合利用于分析检测中,利用核酸探针机动的信号机制跟核酸酶的特异性,具体发展了以下3个方面的工作:1.基于双链探针跟核酸外切酶Ⅰ(文章此处忽略..),发展了一种放大检测小分子的新方法。核酸外切酶Ⅰ只特异性从3'→5'切割DNA单链。首先构建抗核酸外切酶Ⅰ的核酸适体-cDNA双链探针,当有腺苷存在时,通过竞争反应,腺苷与核酸适体结合,双链荧光探针被打开,核酸外切酶Ⅰ可能水解核酸适体跟互补DNA裸露的3'-OH端,开释出来的腺苷持续结合另一条核酸适体探针,如此轮回,荧光信号始终加强。通过检测酶切反应初速度,实现了小分子腺苷简单、疾速(本文此处忽略..)的检测。该方法利用不序列特异性的核酸外切酶Ⅰ进行放大,序列设计简单,对腺苷的检测存在良好的特异性跟灵敏度,检测下限为0.65μM,比传统核酸适体双链探针方法的检测下限(26μM)降落了两个数量级,有望发展为一种设计简单、通用的小分子放大检测的方法。2.基于带AP位点的分子信标,发展了一种APE1酶活性分析的新方法。APE1可能切割带AP位点的DNA。设计了两条分子信标,一条为臂部双链区带有一个AP(本文此处忽略..)位点的长臂分子信标(P1),另一条为环部单链区带有一个AP位点的惯例分子信标(P2)。把它们作为APE1酶底物,比较了二者的机能。通过检测酶切初速度,用机能更好的P1探针对APE1酶活性进行了分析。该方法结合了APE1的特点跟分子信标机动的信号机制,设计简单,APE1酶的检测下限为0.25U/mL,线性范畴为0.25-50U/mL,是一种简单的APE1酶活性的分析方法。3.基于分子信标跟S1核酸酶发展了一种检测锌离子的新(本文此处忽略..)方法。S1核酸酶是一种单链核酸内切酶,其酶切速度对锌离子有很强的依附性。利用分子信标作为S1核酸酶的底物,通过检测不同锌离子浓度下酶切初速度的变更,实现了对锌离子简便、疾速的检测。该方法利用S1核酸酶的特点跟分子信标机动的信号机制,避免了复杂离子载体的合成,操作简单,对锌离子的检测下限达到120μM。


以上为本篇毕业论文范文核酸探针与核酸酶结合在分析检测中的利用的介绍部分。
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