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氡温泉耐辐射嗜热微生物的分类鉴定及其耐辐射机制的初步研究

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毕业论文范文题目:氡温泉耐辐射嗜热微生物的分类鉴定及其耐辐射机制的初步研究,论文范文关键词:氡温泉耐辐射嗜热微生物的分类鉴定及其耐辐射机制的初步研究
氡温泉耐辐射嗜热微生物的分类鉴定及其耐辐射机制的初步研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:极其微生物因其独特的生理学特点跟宏大的产业潜在价值,已成为微生物新资源开发的热点。耐辐射嗜热菌属双极微生物范畴,因为其独特的耐辐射跟嗜热双重特点,在农业、环境、生物医学、甚至国防等范畴展示出宏大的利用前景。本文利用PCR-DGGE技巧研究了氡温泉微生物的群落构造,并通过传统的培养方法结合分子分类学对耐辐射嗜热微生物进行了分类鉴定,同时对一株耐辐射嗜热菌的特点及其耐辐射机制进行了初步的研究。论文对不同方法富集的氡温泉水样品中基因组DNA的提取方法进行了摸索,发明传统的CTAB法比较合适样品中基因组DNA的提取。对细菌16SrDNAV3区PCR扩增的引物跟反应程序进行优化,成果表明:(1)带有“GC发夹”构造的PCR产物在DGGE分析时能得到较好的分别后果,而不带有“GC发夹”的PCR产物在DGGE胶中因为存在类似的(本文此处忽略..)电泳行动不能被分别;(2)降落PCR与个别PCR比拟,前者的PCR产物在数量跟特异性方面都较后者好。利用DGGE垂直胶断定了细菌DGGE程度电泳的最佳变性梯度为35%-60%。对不同方法富集(共11个样品)的PCR产物进行DGGE程度电泳分析,发明样品在DGGE的中分散度很好,DGGE指纹图谱中有12个明显的重要条带,对其进行回收,并通过序列分析树破文库。再将获得的16SrDNA序列登陆NCBI与已知序列进行比对,得到了全部氡温泉水样中的群落构造信息,其中11株细菌归为5个不同的属,分辨是Anoxybacillus,Geobacillus,Ureibacillus,Brevibacillus跟Aneurinibacillus;另1株细菌与尚未获得培养的细菌的16SrDNA同源性很高,很可能是无奈归类的新菌种。同时对不同剂量辐照处理前后的样品进行了(本文此处忽略..)DGGE指纹图谱分析,成果表明只有代表Brevibacillus跟Aneurinibacillus的条带消散,阐明全部氡温泉群落构造重要由耐辐射嗜热菌属构成。氡温泉水样采取8kGy剂量60Coγ-射线辐射预处理后,在55℃的温度下进行培养并分别得到35株耐辐射嗜热菌。应用细菌全蛋白电泳SDS-PAGE比较分析跟16S-23SrDNA间隔区比较分析等分子生物学方法从中筛选得到8株种属不同的耐辐射嗜热菌,并进一步应用16SrDNA序列分析鉴定其种属关联。对已测序列跟GenBank中已登录的16SrDNA序列进行核苷酸同源性比较,菌株S1,S9跟T9的序列分辨与AnoxybacillusgonensisNCIMB13933T(AY122325),UreibacillusthermosphaericusDSM10633T(AB210995)跟GeobacillustoebiiSK-1T(AF326278)的同源性都(此处忽略..)到达到99%以上。结合状况学、生理生化特点、脂肪酸成分、(G+C)mol%含量以及16SrDNA序列分析,菌株S1,S9跟T9可能分辨是Anoxybacillus,Ureibacillus跟Geobacillus的一个新种。为了进一步研究耐辐射嗜热菌株的性质,考察了菌株T9的特点并对其耐辐射的机制进行了初步的探讨。成果表明,菌株T9对UV跟γ-射线辐射存在较高耐受性,同时对DNA伤害试剂H202跟丝裂霉素C也表示出极高的抗性,这可能与其有独特的DNA修复体系有关。有研究报道,在逆境胁迫下,可能引诱生物体内产生NO,认为NO是逆境胁迫引诱生物体内产生一系列反应的重要信号分子之一。本文的研究成果表明,在菌株T9受到UV辐照的过程中,同时诱发了NO的爆发,暗示NO可能是辐照胁迫引诱菌株耐辐射的信号分子。本文研究发明,NO淬灭剂cPTIO可能(文章此处忽略..)有效地克制辐照胁迫引诱的菌株耐辐射,同时外源NO供体SNP可能有效地进步菌株耐辐射的才能。可知,NO确切参加介导辐照胁迫引诱的菌株耐辐射,可能是此过程中的关键信号分子,这对揭示菌株耐辐射的机制提供了重要的根据。菌株耐辐射机制的另一个方面是菌株在长期进化过程中构成的抗氧化防备体系。本文研究表明,NO淬灭剂cPTIO可能有效地降落菌株抗氧化的才能,而外源NO供体SNP可能很好地保护菌株抗氧化,抵抗外界的氧化压力。可见,NO也可能是菌株抗氧化防备体系中的信号分子。然而,具体的信号调控过程还有待进一步研究。


以上为本篇毕业论文范文氡温泉耐辐射嗜热微生物的分类鉴定及其耐辐射机制的初步研究的介绍部分。
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