成骨引诱的兔BMSCs体内、外成骨特点的实验研究

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成骨引诱的兔BMSCs体内、外成骨特点的实验研究

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毕业论文范文题目：成骨引诱的兔BMSCs体内、外成骨特点的实验研究，论文范文关键词：成骨引诱的兔BMSCs体内、外成骨特点的实验研究
成骨引诱的兔BMSCs体内、外成骨特点的实验研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：因创伤、肿瘤等各种起因造成骨缺损的医治始终是骨科界的困难。以往医治方法包含自体骨移植、同种异体骨移植及生物质料调换等，其均不同程度川存在着来源有限、组织成骨才能差及存在免疫排斥反应等缺点，并且在对较大骨缺损进行骨移植时，新骨构成之前移植骨轻易被机体接收，造成植骨失败，所以骨组织工程的提出跟发展无疑为这一医学困难的解决提供了簇新前景。跟着目前骨组织工程研究的疾速发展，组织工程化骨已成为最具盼望广泛利用于临床的组织工程成果之一，它不仅罢黜了本身骨移植的供区伤害，同时也避免了同种异体移植供体来源有限及其不可避免的免疫排斥反应。尤其是近年来，三维破体生物可降解性材料及细胞培养等技巧的始终发展，为骨组织工程的广泛利用发明了有利前提。近年来骨组织工程研究在种子细胞、支架材料及组织工程化骨体外构建等方面均获得了较大进展。间充质干细胞(Mesenchymalstemcells,MSCs)因其存在的诸多长处并能多向分化而日渐成为存在良好利用前景的种子细胞来源。对来源于骨膜等不同部位的（此处忽略..）成骨细胞体外生物学特点的研究表明，不同部位骨及骨膜组织来源的成骨细胞体外培养多代后仍能保持其表型，但将间充质干细胞(Mesenchymalstemcells,MSCs)向成骨表型引诱后细胞生物学特点以及引诱后的细胞体外构建组织工程活性骨及体内植入过程中的表型保持情况，却未见相干报道。本实验察看了MSCs向成骨引诱后的成骨特点表白及保持情况，以及成骨引诱的MSCs在细胞-支架复合体体外构建及体内植入过程中的成骨表型保持特点。同时，本研究也察看了在细胞-支架复合体构建中，必定范畴内的种植浓度与粘附细胞数及粘附率的关联，以及细胞-胶原凝胶上架法对粘附率的影响。本研究进行了以下三部分实验：1、构建兔骨髓间充质干细胞(BoneMarrowMesenchymalstemcells,BMSCs)与活骨组织共培养模型，以模仿体内“成骨微环境”，将成骨引诱的MSCs置于共培养及个别传代培养前提下进行传代培养，察看经成骨引诱的MSCs在体外及模仿体内的培养前提下细胞的表型保持情况；并将兔骨髓（此处忽略..）间充质干细胞置于药物成骨引诱培养、与活骨组织共培养及个别传代培养下察看BMSCs的成骨分化特点。成果显示：(1)药物成骨引诱培养及共培养的间充质细胞，其ALP活性及骨钙素均明显高于个别培养组(P＜0.05)，其中各个指标成骨引诱培养均最高；经过引诱培养的间充质细胞，其Ⅰ型第三军医大学硕士学位论文胶原、骨钙素免疫组化强阳性，共培养的间充质细胞I型胶原阳性，骨钙素弱阳性;对比组I型胶原免疫组化弱阳性、骨钙素免疫组化阴性。RT一PCR法半定量测定I型胶原mRNA亦提示，成骨引诱培养及共培养的间充质细胞的I型胶原mRNA表白量明显高于个别传代培养对比组，同时成骨引诱培养亦高于共培养。成果表明:药物成骨引诱培养浮现促间充质细胞向成骨方向转化的特点，能使细胞碱性磷酸酶、骨钙素及I型胶原表白短期内达到高程度;共培养前提亦可促进MSCs向成骨细胞分化，但其作用明显弱于药物成骨引诱。(2)药物成骨引诱后的细胞在体外个别传代培养传5代后(总培养时光为40天)，ALP活性、骨钙素程度及I型胶原表白牢固保持在较高程度（此处忽略..），保持其成骨细胞的表型;在共培养前提下，ALP活性、骨钙素程度及I型胶原表白保持在高程度，并且ALP活性、骨钙素程度在大部分时光点均高于个别传代培养.这表明:经成骨引诱的MSCs无论在体外或模仿的体内传代培养前提下，均能保持成骨表型，保持成骨活力。2、采取熔铸颗粒沥取法制备CPP钾LLA支架材料，模仿组织工程化活性骨构建过程，在体外将成骨引诱的MSCs与CPP钾LLA支架复合后，分辨检测了体外与支架复合后3天及其持续进行共培养1周的细胞成骨特点，察看了与CPPf/PLLA支架复合后细胞成骨活性的表白。成果显示:(l)支架材料成存在高孔隙率的纤维网状构造。(2)成骨引诱细胞与CPP刀PLLA支架复合后体外培养三天及与持续活骨组织共培养1周，细胞的ALP活性、细胞内骨钙素含量及I型胶原mRNA表白量与同期体别传代培养的成骨引诱细胞(对比组)均无明显性差别(P0.05)。成果表明:CPP钾LLA支架材料存在较好的生物相容性，与成骨引诱的MSCs复合后对细胞成骨活性无明显影响。3、对以成骨引诱的MSCs（略..）为种子细胞、以CPP仰LLA为支架的细胞一支架复合物体外构建进行了初步研究。不同浓度的成骨引诱MSCs接种于CPP钾LLA支架，用MTT法比较不同浓度下细胞的粘附率;同时，察看血清预涂的CPP钾LLA支架与单纯CPP钾LLA支架、细胞一胶原凝胶上架方法与直接上架方法的细胞上架率比较。成果显示:(l)兔MSCs成骨细胞的M竹光接收值(A4劝与直接计数之间存在较好的线性相干性，可能检测活细胞数;(2)细胞浓度在1x106一6x206/而间时，在cPP仰LLA支架上的粘附细胞数跟着浓度进步而增加，同时粘附率有不同程度的降落;而细胞浓度为8xl。今而跟10xl0勺nil时，粘附细胞己无明显差别。(3)血清预涂的cPP仰LLA支架与单纯cPP仰LLA支架的细胞粘附率在4x10e/ml、8x10石/ml浓度均无明显性差别(P0.05);而细胞一胶原凝胶上架方法与直接上架方法比较存在明显性

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