壳寡糖对巨噬细胞IL-1β、TNF-α基因表达的影响

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壳寡糖对巨噬细胞IL-1β、TNF-α基因表达的影响

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毕业论文范文题目：壳寡糖对巨噬细胞IL-1β、TNF-α基因表达的影响，论文范文关键词：壳寡糖对巨噬细胞IL-1β、TNF-α基因表达的影响
壳寡糖对巨噬细胞IL-1β、TNF-α基因表达的影响毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：几丁质又称甲壳素，是自然界最丰富的生物资源之一，具有多种生理功能。几丁质部分脱乙酰化产物是壳聚糖。为了改善几丁质、壳聚糖不溶于水的缺陷，将其降解为几丁寡糖、壳寡糖后具有较好的水溶性，易于分散吸收。众多学者研究发现几丁质、壳聚糖及几丁寡糖、壳寡糖具有免疫调节作用。将这些多糖、寡糖经腹腔或静脉给予小鼠，可以使其腹腔渗出液及外周血中多型核白细胞增多，巨噬细胞、脾脏T淋巴细胞、NK细胞等活性增强。各种免疫功能细胞激活后，分泌各种免疫活性分子，如白细胞介素、肿瘤坏死因子及干扰素等。通过这些分子介导，免疫功能细胞互相调节，自（本文此处忽略..）身的免疫活性也加强，巨噬细胞释放过氧化氢、一氧化氮等活性物质，T细胞、NK细胞的细胞毒活性增高，整体免疫系统功能增强。几丁质及其衍生物通过调节机体免疫系统功能，能增强机体对多种病原微生物的抵抗作用，对实验性小鼠MethA纤维肉瘤、S180肿瘤、MM44实体瘤及Lewis肺癌等肿瘤细胞有抑制效应。研究表明壳寡糖具有免疫调节作用，有抗感染及抗肿瘤活性。但众多研究以动物整体实验为主，关于壳寡糖对免疫系统某一特定环节直接作用的研究较少。为了探索壳寡糖对免疫系统调节作用的机理，本课题以小鼠巨噬细浙江大学顾士学位论文胞作为研究对象，通（本文此处忽略..）过体外实验将壳寡糖作用于巨噬细胞，运用相对定量逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）技术和酶联免疫吸附实验（ELISA）技术，检测对巨噬细胞细胞因子ILIp、TNFa基因转录和翻译水平的影响。提取小鼠腹腔巨噬细胞并培养使贴壁生长后，巨噬细胞实验组中加入含一定浓度壳寡糖的培养液，巨噬细胞对照组则只加培养液，继续培养24小时。收集实验组和对照组上清培养液留待ELISA实验用，巨噬细胞通过异硫氰酸腑－酚－氯仿一步法提取总RNA。由于“管家基因”p－actin表达稳定，其表达量比细胞因子基因高，所以相对定量队－PCR实验中，p（文章此处忽略..）－actincDNA的KR引物量设为两种细胞因子基因叨NA引物量的一半，确保p－actin和细胞因子产物量比较均匀。另外，对三种基因。DNA进行PCR扩增动力学分析后，扩增循环数确定为30，此时三种。DNA都处于指数扩增期，确保可以用p－actin扩增产物量作为细胞因子PCR产物量的参比标准，从而可以对细胞因子基因转录水平进行比较。为了明确壳寡糖对巨噬细胞作用的最适浓度，首先通过RT－PCR确定作用最适浓度范围为5～50ug加1。在此范围内进一步实验发现20～40ngiM的壳寡糖能增强巨噬细胞IL－16和TNF－口基因转录，效应有剂量依（文章此处忽略..）赖性。选定20ug／ml浓度的壳寡糖继续作用于巨噬细胞，BT－PCR结果表明可以明显提高两种细胞因子基因转录水平，实验组IL－二p和TNF－口基因转录量为对照组的l．9倍左右…＜0．of）：ELISA实验显示，两种细胞因子分泌也显著增多，实验组ILIp和TNF－口量分别为对照组的2．4倍和2倍左右巾＜001），说明壳寡糖能促进巨噬细胞两种细胞因子基因翻译成蛋白质。本实验表明，壳寡糖可以增强小鼠巨噬细胞IL叶p及TNF－a的基因表达，使两种细胞因子基因转录及刁译水平增高。

以上为本篇毕业论文范文壳寡糖对巨噬细胞IL-1β、TNF-α基因表达的影响的介绍部分。

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