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栽培南方红豆杉紫杉醇分析提取与指纹图谱研究

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毕业论文范文题目:栽培南方红豆杉紫杉醇分析提取与指纹图谱研究,论文范文关键词:栽培南方红豆杉紫杉醇分析提取与指纹图谱研究
栽培南方红豆杉紫杉醇分析提取与指纹图谱研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:南方红豆杉(taxuschinensisvaF.mairei),又称美丽红豆杉,为裸子动物门(Gymnospermae)红豆杉科(Taxaceae)红豆杉属(Taxus)动物。为红豆杉属动物中分布最广泛的一种,重要分布于长江流域、南岭山脉山区及河南、陕西、甘肃、台湾等省的山区或溪谷,它是亚热带常绿阔叶林、常绿落叶阔叶混交林的特点种,常与其余阔叶树、竹类以及针叶树混生,分布于海拔800~1600米,资源储量绝对较红豆杉其它各种多。自1971年从红豆杉中分别出紫杉醇后,它已成为研究抗肿瘤天然药物的重点,南方红豆杉更成为我国紫杉醇药物出产的重要树种。南方红豆杉中紫杉醇含量甚微,其含量范畴仅仅在0.003%~0.008%之间,含有大量的动物腊、色素跟树胶等杂质,特别是其中共存很多分子构造跟理化性质与紫杉醇极其相近的紫杉烷系列化合物,而这些成分会重大烦扰紫杉醇的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定。为了能正确测定紫杉醇含量,实验优选了RP-HPLC测定紫杉醇含量的色谱前提,即:用SHIMADZUC_(18)色谱柱(250mm×4.6mmID,5μm);甲醇-水-乙腈(22:32.5:45.5)为流动相,紫外检测(略..)波长为227nm。紫杉醇对比品溶液浓度在0.0004376mg.mL~(-1)~0.004376mg.mL~(-1)范畴内,线性方程为:Y=2.152968×107X+1773(r=0.9999)(n=5);相干联数r=0.9999(n=5)时,与峰面积线性关联良好;通过检测限(紫杉醇进样量为0.001050μg时)跟定量限(紫杉醇进样量为0.003501μg时),断定了紫杉醇对比品溶液最小浓度也合乎RP-HPLC的检测请求。对南方红豆杉人工林材样品制备优化处理如下:将采集的南方红豆杉整株样品干燥,用6倍量(W/V)的乙醇浸提两次,合并提取液,减压稀释至干;再用6倍量(W/V)的二氯甲烷液液萃取三次,合并萃取液,减压稀释至干,残渣加色谱甲醇溶解,制成南方红豆杉样品溶液;用加样回收方法考察了该方法的可行性。同时随机采集了10批南方红豆杉药材样品,进一步验证了树破的RP-HPLC检测紫杉醇含量方法的可行性,成果表明该方法疾速、简便、坚固,重现性好,能作为人工种植南方红豆杉中紫杉醇含量检测方法。在对重庆市忠县的南方红豆杉人工林材各部位紫杉醇含量变更法则研究过程中,以紫杉醇含量为指标,采取正交实验,通过4因素5程度交表(L16(4~5)),对南方红豆杉影响因素年纪、节令(以随机选取各节令的一(文章此处忽略..)个月份作为代表)、不同部位3因素进行了优选实验。成果表明:南方红豆杉中紫杉醇含量重要影响因素是年纪,其次是不同部位,采收节令对紫杉醇的含量影响也是明显的;通过多重比较,断定T9(A_3B_1C_4)后果最好,即在1月份时采取6年生人工种植南方红豆杉叶,为优化选出的紫杉醇最佳采集机会,再结合红豆杉出产实际情况,采集6年生的枝叶作为紫杉醇的实验对象。干燥方法对南方红豆杉中紫杉醇含量的影响研究中,采取天然风干、减压干燥跟微波干燥3种干燥方法,综合各干燥方法中的不同干燥前提,实验成果表明:减压干燥宜选用60℃;微波干燥低火;而天然风干跟其它干燥方法可能造成紫杉醇明显降解,均不宜取。优化并树破红豆杉枝叶中紫杉醇的提取工艺,充分考虑了产业化出产的可行性。以利用RP-HPLC测定的紫杉醇含量为指标,采取正交实验法对提取过程中乙醇浓度、乙醇用量、提取次数、提取时光4因素进行优选实验。成果表明:从红豆杉中提取紫杉醇的最重要影响因素是乙醇浓度及乙醇用量,高浓度、恰当多的用量有利于提取;提取时光跟次数也极为重要;单因素后果分辨以每次提取2h跟共提取2次为最(此处忽略..)佳。终极T9(A_3B_3C_2D_1)跟T8(A_3B_2C_1D_3),即采取8倍量(W/V)95%乙醇提取2次,每次提取2小时,或采取6倍量(W/V)95%乙醇提取1次,提取4小时,均为优化选出的紫杉醇最佳提取工艺前提。在中药的开发过程中,色谱指纹图谱研究工作是国内中药古代化研究的热点之一,为中药材树破相应的指纹图谱是现阶段把持中药内在品质的有效手段。实验中共收集到人工种植南方红豆杉枝叶药材11批、研究过程中考察了色谱前提的优化,包含色谱柱、检测波长跟流动相的优化抉择;同时参照国度食品药品监督管理局对中药材指纹图谱的请求,对色谱前提进行了方法学验证,即仪器精巧度实验、样品反复性跟牢固性实验;在此基本上构建了色谱指纹图谱,包含:共有峰的标定、参照峰的抉择、共有峰绝对保存时光及积分绝对比值确切定、非共有峰占总峰面积的百分比、共有峰的类似度打算,色谱前提的优化成果表明,选用C_(18)柱,检测波长为227nm,以乙腈跟水为流动相进行梯度洗脱,为最佳色谱前提。根据色谱前提的优化成果,对仪器精巧度、样品反复性跟牢固性进行实验,高效液相色谱测定成果中,共有峰绝对保存时光跟绝对峰面积的(略..)RSD都小于3.0%,表明采取高效液相色谱法进行色谱指纹图谱的研究是切实可行。通过色谱指纹图谱的构建,断定了17个共有峰,以9号峰作为参照峰;共有峰绝对保存时光跟绝对峰面积的均匀RSD都小于2.0%,阐明实验成果坚固;共有峰面积百分比在4.1%~8.3%,合乎指纹谱研究规定小于10%的检测请求;采取相干联数法跟夹角余弦法对共有峰的类似度进行了打算,两种打算方法成果全图谱类似度均≥93%,表明所树破指纹图谱的技巧指标牢固。选定的指纹图谱可对人工种植南方红豆杉枝叶药材组分群体特点的一致性作出坚固的断定。


以上为本篇毕业论文范文栽培南方红豆杉紫杉醇分析提取与指纹图谱研究的介绍部分。
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