类金属硫蛋白的发酵出产及提取工艺的研究

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类金属硫蛋白的发酵出产及提取工艺的研究

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毕业论文范文题目：类金属硫蛋白的发酵出产及提取工艺的研究，论文范文关键词：类金属硫蛋白的发酵出产及提取工艺的研究
类金属硫蛋白的发酵出产及提取工艺的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：金属硫蛋白(Metallothionein),简称MT,是在动物、动物、微生物中广泛存在着的一类低分子量、富含半胱氨酸的金属结合蛋白。本文以酵母菌经引诱培养所产生的Cu-MT为研究对象。通过对数种不同酵母菌株进行筛选比较得到一个较优菌株,再进行诱变处理,得到上风出发菌株N`-1。本论文对Cu-MT的摇瓶发酵出产以及超声提取工艺作了初步的研究,并对其清除羟自由基性质等作了探讨。本论文根据热带假丝酵母Cu-1、酿酒酵母Cu-2、Cu-3、Cu-4跟啤酒（此处忽略..）酵母Cu-5菌株天然产金属硫蛋白才能的分析,筛选得到较优菌株Cu-3(类金属硫蛋白产量以巯基活性计达0.012)。以Cu-3菌株为诱变出发菌株,交替进行了两次紫外线(UV)跟两次亚硝基胍(NTG)诱变,并对渐变株进行筛选得到渐变株N`-1,其产金属硫蛋白的才能(以巯基活性表示)达到0.041左右,较出发菌株(产Cu-MT以巯基活性计为0.012)进步了约3.42倍,且存在很好的遗传牢固性。渐变株N`-1菌株出产Cu-MT的摇瓶发酵培养过程的研究中综合考察了活化培养时光、引诱Cu试剂类型、浓度、引（略..）诱培养时光、温度、引诱培养基装液量、接种量以及摇床转速8个培养前提对菌株Cu-MT产量的影响。终极断定了N`-1菌株摇瓶发酵培养的最佳前提为:抉择CuCl2为引诱Cu-MT试剂、浓度为1.0mmol/L、活化培养时光48h、引诱培养温度30℃、引诱培养时光48h、接种量1mL/50mL培养液、引诱培养基装液量为50mL/250mL三角瓶、摇床转速140r/min。按照以上培养前提安排实验,测得类金属硫蛋白产量(以巯基活性计)为0.074。通过单因素实验以及正交实验设计对Cu-MT的超声提取（本文此处忽略..）工艺前提进行了优化,综合考虑了料液比、超声提取强度、超声提取时光、热变性时光等因素对提取后果的影响,最后得到了Cu-MT超声提取的最优前提为:pH8.6Tris-HCl缓冲液与干菌体之间的料液比(g∶mL)为1∶15,200W超声提取30min以及80℃热变性6min。在此提取前提下,提获得到的Cu-MT以巯基活性计为0.085。此外,菌体蛋白经过超声提取,再将提取液恰当稀释后,流经SephadexG-50凝胶过滤柱以及DEAE-纤维素阴离子交换柱进行两步分别纯化,得到Cu（本文此处忽略..）-MT的三个亚型MT-Ⅰ、MT-Ⅱ、MT-Ⅲ,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测得Cu-MT三个亚型的表观分子量分辨为9000Da、9000Da以及8000Da;通过与抗坏血酸抗氧化才能的比较,证明Cu-MT存在较强的清除羟自由基活性。

以上为本篇毕业论文范文类金属硫蛋白的发酵出产及提取工艺的研究的介绍部分。

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