白血病免疫分型细胞芯片捕获细胞的免疫细胞化学研究

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白血病免疫分型细胞芯片捕获细胞的免疫细胞化学研究

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毕业论文范文题目：白血病免疫分型细胞芯片捕获细胞的免疫细胞化学研究，论文范文关键词：白血病免疫分型细胞芯片捕获细胞的免疫细胞化学研究
白血病免疫分型细胞芯片捕获细胞的免疫细胞化学研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目标生物芯片出生于上世纪90年代初,是近年来高新技巧范畴中极具时代特点的重大进展,是物理学、微电子学与分子生物学综合穿插构成的高新技巧。被广泛利用于疾病诊断等多方面。目前,白血病的免疫分型诊断重要依附用已知的单克隆抗体(McAb)去鉴定白血病细胞名义或胞浆抗原-CD抗原(clusterofdifferentiation),根据不同抗原在不同阶段的呈现与消散,决定白细胞所属的系列及分化阶段,做出免疫学诊断。本实验室构建的白血病免疫学分型细胞芯片就是利用抗原、抗体特异性结合的原理,将白细胞名义分化抗原单克隆抗体固定于载体上,构成抗体点阵。不同的单克隆抗体可能主动辨认跟捕获表白相应名义分化抗原的细胞,从而对白血病进行免疫学分型。这种对白血病进行免疫学分型的方法较免疫细胞化学跟流式细胞仪检测法存在高通量、利用简便、样品用量少、检测速度快、灵敏度高、经济实用等长处。然而,白血病（此处忽略..）免疫分型细胞芯片作为一种新型的方法,须要传统公认的免疫细胞化学技巧跟流式细胞术的验证。另外,白血病免疫分型的检测,须要细胞名义抗原跟胞浆抗原的检测,尤其是在双表型检测及特别表型的检测时,胞内抗原的检测更长短常重要的。澳大利亚悉尼大学医学研究所的LarssaBelov等所研制的白血病免疫分型抗体微阵列,仅能检测细胞名义分化抗原,而咱们实验室所研制的芯片以存在透明性的玻璃为载体,在表白相应CD抗原的白细胞与芯片上的抗体结合后,在其上用免疫细胞化学,来检测胞浆内的分化抗原,将成果直观、牢固的表示出来,为临床诊断提供更疾速、简便、完美、正确的白血病免疫分型诊断方法。方法1、断定芯片上捕获细胞的最佳固定方法制备细胞芯片,室温前提下,分辨用下列固定剂固定(1)甲醇:丙酮(1:1v/v)90秒;(2)95%乙醇3分钟;(3)95%乙醇:冰醋酸(AA液95:5v/v)3分钟;(4)AF液(95%乙醇:甲醛:水=68.4:10:21.6v/v)1分钟。除AF液固定（本文此处忽略..）后用蒸馏水洗2遍外,其余固定剂固定后芯片天然风干。免疫细胞化学后显微镜下察看点阵捕获的细胞状况、抗原的表示情况、细胞核复染着色情况及计数固定前后细胞数量。2、断定细胞芯片上的免疫细胞化学所用单克隆抗体的最佳浓度在雷同前提下,细胞芯片上细胞用最佳固定方法固定,进行酶标免疫细胞化学,第一抗体抗CD7、抗CD13、抗CD19、抗MPO浓度分辨为4μg/ml、2μg/ml、1μg/ml、0.5μg/ml、0.25μg/ml,阴性对比滴加等量PBS,室温下孵育1小时;DAB显色,显微镜下察看成果。3、用免疫细胞化学法染色细胞芯片捕获细胞的胞膜及胞浆抗原细胞芯片,用最佳方法固定,按1μg/ml最佳浓度稀释免疫细胞化学第一抗体羊抗人抗CD7、抗CD13、抗CD19、抗MPO,阴性对比用PBS缓冲液代替第一抗体,免疫细胞化学染色后,显微镜下察看成果。4、检测细胞芯片捕获细胞的特异性细胞芯片,用最佳方法固定,按1μg/ml（略..）最佳浓度稀释免疫细胞化学第一抗体抗CD7、抗CD13、抗CD19,阴性对比用PBS缓冲液代替第一抗体,进行免疫细胞化学操作后,显微镜下每种抗体点上取三个高倍镜视线,计数细胞总数跟有棕色颗粒的阳性细胞数,打算阳性率。5、利用细胞芯片进行白血病免疫分型并用免疫细胞化学法验证特异性制备利用于白血病免疫分型的细胞芯片,从白血病患者的外周血中提取白细胞,吖叮橙染色,孵育芯片,PBS荡涤,扫描,检测信号,得到白血病免疫分型成果。再用免疫细胞化学验证。成果1、细胞芯片捕获细胞的固定方法以AF液(95%乙醇:甲醛:水=68.4:10:21.6v/v)1分钟最佳2、细胞芯片上的免疫细胞化学所用单克隆抗体的浓度以1μ/ml室温下孵育1小时最佳。3、细胞芯片上免疫细胞化学第一抗体为抗CD7、抗CD13、抗CD19时,棕色颗粒在细胞膜上;第一抗体为抗MPO时棕色颗粒在胞浆中。4、细胞芯片的特异性捕获阳性率在96.7±0.4%以上,非特异性捕获阳性率在0.（文章此处忽略..）8±0.3%以下,存在明显的特异性。5、白血病细胞芯片的特异性捕获阳性率在97.4±0.2%以上,存在明显的特异性。论断1、白血病免疫分型芯片捕获细胞的固定用AF液(95%乙醇:甲醛:水=68.4:10:21.6v/v)室温下固定1分钟最佳。2、免疫细胞化学第一抗体以1μg/ml室温下孵育1小时为最佳。3、芯片捕获细胞用免疫细胞化学法将胞浆、胞膜抗原染色出来。4、用免疫细胞化学法验证细胞芯片捕获细胞存在高度特异性。5、用白血病免疫分型细胞芯片对30例白血病患者外周血进行免疫学分型,同时进行免疫细胞化学分析,诊断成果正确、坚固。

以上为本篇毕业论文范文白血病免疫分型细胞芯片捕获细胞的免疫细胞化学研究的介绍部分。

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