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注射用血塞通对大鼠脑梗死后不同恢复时间点Nogo-A表达的影响

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毕业论文范文题目:注射用血塞通对大鼠脑梗死后不同恢复时间点Nogo-A表达的影响,论文范文关键词:注射用血塞通对大鼠脑梗死后不同恢复时间点Nogo-A表达的影响
注射用血塞通对大鼠脑梗死后不同恢复时间点Nogo-A表达的影响毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目的中风是中老年人的常见病多发病,严重危害着人类的健康,是中老年人致死致残的主要原因,近年来随着我国老年人口的迅速增长和高血压患者的不断增多,脑血管病呈逐年上升趋势。缺血性脑血管病的发病率约为出血性的3倍,给社会家庭造成了沉重的经济负担,因此加强缺血性脑血管病的治疗与康复尤为紧迫。中医药在脑血管病中应用广泛,中药可以有效地恢复受损的神经功能,特别是注射用血塞通,已在临床上取得了很好的疗效。本课题即是应用血塞通冻干粉注射液(主要成分为三七总皂苷),通过整体动物观察,免疫组织化学技术和实时荧光定量PCR方法,探讨其对大鼠局灶性脑缺血模型不同恢复时间点7天、‘14天、28天大脑皮层的主要抑制因子Nogo-A的表达的影响,从而研究中药血塞通对Nogo-A的作用.,揭示中药三七对大脑重塑重建的作用机理,同时本实验还一起探讨了注射用血塞通剂量大小与疗效之间的的量效关系,为中医中药的进一步广泛应用提供科学依据。方法健康雄性SD大鼠,体重300±20g,随机分为手术组和非手术组,非手术组即正常组,手术组采用改良的L(文章此处忽略..)onga方法建立大脑中动脉阻塞模型,术后保持一定的室温,待大鼠术后清醒2h以后,进行EZLonga评分持续观察并记录直至术后72小时,根据评分和体重随机分为血塞通大剂量组(7.2mg/100g)、血塞通小剂量组(3.6mg/100g)、尼莫地平组(1.44mg/100g)、模型组(生理盐水),于手术当日开始给药。同时手术后随机抽取3只模型动物做TTC染色,评价模型是否成功。待7天、14天、28天时,各组取6-8只动物,迅速取脑,于视交叉处将大脑前后分开,将前端脑放入10%的甲醛中固定48小时后用PBS将脑组织洗净,最后将组织石蜡包埋切片,切片厚度约为4um,做HE染色观察神经细胞形态的变化,用免疫组织化学染色方法观察不同时间点Nogo-A的表达变化;另视交叉后的脑组织迅速取出脑梗死灶的大脑皮层组织,取出梗死的大脑皮层,电子称称重约120mg,迅速放入液氮中,用实时荧光定量PCR方法来观察Nogo-AmRNA在不同时间点的表达变化。结果1MCAO模型的制备和神经功能学评分将神经功能评分1-3分的纳入入组标准,从中选取的3只动物取脑做TTC染色,梗死区被染成苍白色,正常区(略..)域是红色,提示造模成功。术后5小时,各组动物评分均一没有统计学意义,说明各组动物起始条件均一,分组较均匀,术后24h,48h、72h各组动物的神经行为学评分,随着时间的延长而降低,术后24h,48h尼莫地平组和血塞通大剂量组、血塞通小剂量组,均低于同时间点的模型组,但没做出统计学差异,术后72小时,血塞通大剂量组、尼莫地平组跟模型组比较差异显著p0.01,血塞通小剂量组与模型组比较p0.05。2动物整体状态的观察结果2.1一般状态观察术后24小时内,各组动物活动度较差,毛蓬松、竖,反应迟钝,蜷缩聚集,饮食饮水受限;7天时各组均见好转,其中血塞通组和尼莫地平组状态恢复更快,明显好于模型组。术后14天、28天,动物逐渐恢复,各组动物一般状态接近正常,活动度、精神状态、饮食、大小便均正常。2.2动物体重的观察正常组动物呈正增长,各手术组术后7天内,呈负增长。血塞通组和尼莫地平组要比同时间点内的模型组,体重下降轻。术后28天,尼莫地平组体重增长变化量与模型组体重增长变化量差异显著,p0.01,血塞通大剂量组与模型组体重增长量差异有统计学意义p0.05。2.3动物死(此处忽略..)亡率观察正常组死亡率为零,手术组,综而观之,24小时内死亡率为零,48小时各组开始出现死亡高峰,7天,为第二个死亡高峰,14天,28天死亡率保持稳定,基本没有死亡。在三个时间点,各组之间比较可以看出,模型组死亡率最高,尼莫地平组死亡率最低,血塞通大小剂量组死亡率亦低于同时间点的模型组。3血塞通对MCAO大鼠梗死脑组织的病理学检查正常组神经元形态正常,核仁清楚,神经细胞数量多且排列整齐,模型组梗死区面积较大,结构疏松呈网状,神经元肿胀,体积增大,形态为多角形或扇形,神经元的细胞骨架消失,胞浆伊红染色较浅,核周质浓缩,着色较深,血管可见炎症细胞浸润。血塞通组的梗死区面积较模型组小,损伤轻,残存细胞较多,细胞形态较模型组好,随着时间延长,各用药组梗死周边区病理形态优于同时间点模型组。4血塞通对MCAO大鼠不同恢复时间点Nogo-A表达的影响分别对梗死区、梗死周边区、正常区域进行平均光密度分析,结果显示梗死区随着时间的延长,Nogo-A的表达逐渐减弱,在各时间点内,血塞通组和尼莫地平组Nogo-A的表达(本文此处忽略..)高于模型组。梗死周边区,模型组Nogo-A的表达趋势是7天时已经高表达,14天达到高峰,28天比14天略低,但仍保持较高水平,在各时间点,血塞通组比同时间点内的模型组表达低,与模型组差异显著p0.05。梗死对侧的正常区各用药组Nogo-A的表达均比模型组低,但各组之间未作出统计学差异。结论:1血塞通可以改善动物的整体状态,减轻神经功能损伤。2血塞通可以保护梗死区及梗死周边区的神经细胞。3血塞通可以下调梗死周边区不同恢复时间点Nogo-A的表达。4血塞通可以下调脑梗死后不同恢复时间点的Nogo-AmRNA的表达。5血塞通大剂量较小剂量效果好,表现一定的量效关系。6血塞通可能是通过下调Nogo-A的表达这种机制,来实现大脑神经功能重塑重建作用的。


以上为本篇毕业论文范文注射用血塞通对大鼠脑梗死后不同恢复时间点Nogo-A表达的影响的介绍部分。
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