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优化hα-syn核酸疫苗免疫反应效果及安全性的评价

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毕业论文范文题目:优化hα-syn核酸疫苗免疫反应效果及安全性的评价,论文范文关键词:优化hα-syn核酸疫苗免疫反应效果及安全性的评价
优化hα-syn核酸疫苗免疫反应效果及安全性的评价毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目的1.为筛选出更有效的抗帕金森病核酸疫苗,给今后的进一步研究奠定基础。本实验对课题组早期构建的全长核酸疫苗pVAX1-hαS1-140和优化帕金森核酸疫苗pVAX1-IL-4/SYN-B,预防接种小鼠来进一步观察核酸疫苗接种后所引起的免疫反应效果。2.为筛选出更加安全的抗帕金森病核酸疫苗,给今后的研究奠定基础。本实验通过预防接种小鼠,来评价全长核酸疫苗pVAX1-hαS1-140和优化核酸疫苗pVAX1-IL-4/SYN-B的安全性。方法本实验采用无内毒素质粒大抽试剂盒,先对优化核酸疫苗(文章此处忽略..)、空质粒、全长核酸疫苗进行抽提和制备。接下来选用32只C57BL/6J小鼠,并随机分成对照组、空质粒组、优化核酸疫苗组、全长核酸疫苗组,4组动物分别双侧后肢胫骨前肌同一部位、同一深度接种PBS、pVAX1、pVAX1-IL-4/SYN-B、pVAX1-hαS1-140,每次各注射50μl,共接种5次,每次间隔3周。同时在免疫接种前及每次免疫接种后2周鼠尾采血1次,分离血清后于-80℃保存备用。在对小鼠进行免疫接种过程中,注意观察小鼠行为学变化。间接ELISA法测定血清中抗α-syn的抗体滴度及IL-4、(文章此处忽略..)IFN-r的含量﹔免疫组织化学和α-syn肽抗原的中和实验检测抗血清与慢性鱼藤酮帕金森病小鼠脑切片中α-syn阳性包涵体的特异性结合;RT-PCR检测小鼠中脑黑质COX-2的表达。结果1.在免疫接种过程中,小鼠行为学无异常变化。各组小鼠平均体重在接种前和接种后无明显差异改变。在慢性鱼藤酮帕金森病小鼠模型制备过程中,小鼠出现尾巴弓形隆起、僵硬、震颤、少动、蜷缩、肢体运动不对称等类帕金森病样症状。2.与对照组相比,pVAX1-IL-4/SYN-B疫苗于第1次免疫后2周产生α-(本文此处忽略..)syn抗体,随加强免疫次数增多,抗体滴度明显增加(p0.01)。3.血清中免疫因子显示:优化核酸疫苗组IL-4明显高于对照组,IFN-r低于对照组。其他三组无明显差异。4.免疫组化显示:优化核酸疫苗和全长核酸疫苗的小鼠血清可以和慢性鱼藤酮帕金森病小鼠脑切片中α-syn阳性包涵体免疫结合并被α-syn肽中和,而对照组和空质粒组无反应。5.RT-PCR显示:优化核酸疫苗组COX-2的表达量明显少于全长核酸疫苗组(p0.01),和对照组、空质粒组无明显差异(p0.05)结论优化核酸疫苗pVA(此处忽略..)X1-IL-4/SYN-B可在小鼠体内产生高效价的α-syn抗体,主要引起体液免疫反应,且比全长核酸疫苗pVAX1-hαS1-140更安全,未发现优化核酸疫苗接种后会引起毒副作用。因此,本实验结果提示优化核酸疫苗比全长疫苗更符合帕金森病的免疫治疗要求,为下一步免疫帕金森病动物的实验研究提供了依据,为优化核酸疫苗的进一步筛选奠定了基础。


以上为本篇毕业论文范文优化hα-syn核酸疫苗免疫反应效果及安全性的评价的介绍部分。
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