鼻咽癌人源抗独特型单链抗体DNA疫苗的实验研究

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鼻咽癌人源抗独特型单链抗体DNA疫苗的实验研究

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毕业论文范文题目：鼻咽癌人源抗独特型单链抗体DNA疫苗的实验研究，论文范文关键词：鼻咽癌人源抗独特型单链抗体DNA疫苗的实验研究
鼻咽癌人源抗独特型单链抗体DNA疫苗的实验研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目标：构建含鼻咽癌人源抗独特型单链抗体基因G22的真核表白载体，鉴定重组质粒真核表白的生物学活性，并将其制备成基因疫苗进举动物实验，为抗鼻咽癌疫苗的进一步研究奠定了基本。方法：PCR扩增G22scFv基因，重组至真核表白载体pcDNA3.1(+)中，构建重组表白载体pcDNA3.1(+)-G22。将CNE2细胞经热休克预处理后，RT-PCR扩增人全长gp96基因，重组至真核表白载体pcDN（文章此处忽略..）A3.1(+)中，构建重组表白载体pcDNA3.1(+)-gp96。经酶切鉴定跟DNA序列测定后，用脂质体法将重组质粒牢固转染入真核细胞，以WesternBlotting跟流式细胞术检测重组质粒的表白，进一步利用免疫组化跟免疫荧光断定G22ScFv基因表白的细胞定位。随后将重组质粒制备成基因疫苗，经肌肉打针免疫C57BL／6小鼠。一部分小鼠在末次免疫后15天起取血及脾组织，用间接ELISA（文章此处忽略..）、竞争克制ELISA跟流式细胞术检测G22ScFv引诱的特异性免疫应答。另一部分小鼠于末次免疫后1周背部皮下分辨接种5×10~6野生型CMT-93或转基因CMT-93／G22瘤细胞，察看荷瘤小鼠的肿瘤体积大小跟生存期。成果：酶切鉴定跟DNA序列分析证明，重组质粒pcDNA3.1(+)-G22跟pcDNA3.1(+)-gp96构建成功，并经WesternBlotting跟流式细胞术等方法验证G22scFv基因跟（略..）人全长gp96基因能在真核细胞中正确表白。进一步用G22scFv为免疫原，gp96为佐剂，以基因疫苗的情势免疫小鼠，可引诱产生抗鼻咽癌特异性抗体，其能竞争性克制FC2McAb(针对鼻咽癌的单抗)与鼻咽癌细胞HNE2名义抗原的结合；可刺激小鼠的脾脏CD4~+T细胞、CD8~+T细胞升高；并对荷瘤小鼠表示免疫保护效应，延长生存期。论断：成功构建了真核表白载体pcDNA3.1(+)-G22，并验证（本文此处忽略..）G22ScFv基因在真核细胞中表白的生物学活性。通过动物实验证明G22抗独特型单链抗体可引诱机体产生特异性体液跟细胞免疫应答，延长荷瘤动物的生存期，为抗独特型单链抗体的临床利用提供了必定的实验根据。

以上为本篇毕业论文范文鼻咽癌人源抗独特型单链抗体DNA疫苗的实验研究的介绍部分。

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