人乳头瘤病毒11型全基因组转基因小鼠基因元件的设计与构建

搜索高级搜索

原创毕业论文

人乳头瘤病毒11型全基因组转基因小鼠基因元件的设计与构建

作者: 浏览:4次

免费专业论文
政治工作论文
计算机论文
营销专业论文
工程管理论文范文
医药医学论文范文
法律论文范文
生物专业论文
物理教学论文范文
人力资源论文范文
化学教学论文范文
电子专业论文范文
历史专业论文
电气工程论文
社会学专业论文
英语专业论文
行政管理论文范文
语文专业论文
电子商务论文范文
焊工钳工技师论文
社科文学论文
教育论文范文
数学论文范文
物流论文范文
建筑专业论文
食品专业论文
财务管理论文范文
工商管理论文范文
会计专业论文范文
专业论文格式
化工材料专业论文
英语教学专业论文
电子通信论文范文
旅游管理论文范文
环境科学专业论文
经济论文
人力资源论文范文
营销专业论文范文
财务管理论文范文
物流论文范文
财务会计论文范文
数学教育论文范文
数学与应用数学论文
电子商务论文范文
法律专业论文范文
工商管理论文范文
汉语言文学论文
计算机专业论文
环境艺术专业论文
信息计算科学专业
物流专业论文范文
人力资源论文范文
教育管理论文范文
现代教育技术论文
小学教育论文范文
机械模具专业论文
报告,总结,申请书
理工科专业论文
心理学论文范文
学前教育论文范文

毕业论文范文题目：人乳头瘤病毒11型全基因组转基因小鼠基因元件的设计与构建，论文范文关键词：人乳头瘤病毒11型全基因组转基因小鼠基因元件的设计与构建
人乳头瘤病毒11型全基因组转基因小鼠基因元件的设计与构建毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus，HPV)11型是人尖锐湿疣(condylomaacuminatum，CA)的主要病原体之一。目前还没有根治CA的有效手段，并且对其致病机理至今都还不太了解。一种理想的动物病理模型对致病机理的体内研究和治疗手段的临床前评价都有重要意义。本课题的内容就是设计并在质粒上构建HPV11全基因组转基因小鼠模型的外源基因。HPV11在宿主体内表达出病理蛋白的一个重要前提是其基因组必须保持游离状态，加之该基因对上皮细胞的专嗜性，因此HPV11转基因动物的外源基因除了应含有HPV11完整基因组外，还要包含能够在转基因鼠的上皮细胞，将（本文此处忽略..）HPV11切割下来的基因元件。本课题首先根据HPV11的致病特点，结合成熟的Cre／LoxP可控表达技术设计转基因的外源基因及其功能元件。主要思路是将完整开放读码框的HPV11基因组以3′-5′的顺序置于正向连接的两组LoxP序列中间，LoxP序列两端分别连接真核细胞启动子和EGFP序列，当出现由上皮细胞启动子启动的Cre酶表达时，可使LoxP中间的HPV11基因组被切下，实现在小鼠体内游离的自然致病状态，同时LoxP残基将启动子和EGFP序列相连接，出现荧光。实验第一部分为质粒构建。本实验室保存有含HPV11全序列的质粒pBR322／HPV11，并获得了一个适合于构建HPV（略..）11两端功能序列的质粒pQE-Trisystem。质粒构建过程包括三个小部分。第一部分，首先将HPV11全基因组从pBR322／HPV11中切下，同时酶切质粒pQE-Trisystem，并对回收产物去磷酸化。将回收的HPV11和去磷酸化后的pQE-Trisystem连接，连接产物转化DH5a，做菌落PCR实验以筛选出反向连接阳性克隆，得到的产物命名为质粒A。第二部分，首先从质粒pIRE2-EGFP中扩增出LoxP-EGFP-PolyA序列，扩增同时加上酶切位点，接着对扩增产物和质粒A进行酶切，回收酶切产物。然后将两个回收产物相连接，得到的产物命名为质粒B。第三部分，从（本文此处忽略..）pBR322／HPV11中扩增出LoxP-7931-7072序列，加上酶切位点，酶切PCR产物和质粒B并回收。将两个回收产物连接，转化DH5a，做菌落PCR实验以筛选出反向连接阳性克隆，得到质粒构建最终产物，命名为质粒C。实验第二部分对构建的序列的功能进行了初步的体外检测。首先从儿童包皮中分离出人皮肤角质形成细胞(keratinocytes)。在传到第二代时，用脂质体法将质粒C和表达Cre酶的质粒pIC-Cre共转染角质形成细胞，并设对照组，观察荧光蛋白表达情况，最后RT-PCR检测HPV11早期基因E6的转录水平。研究结果：1．用核酸凝胶电泳和测序的方法验证所构建的质粒C与实验设（略..）计的相符。2．转染入角质形成细胞后实验组观察到荧光表达。3．RT-PCR检测HPV11E6在转录水平上的表达为阳性。4．转染的角质形成细胞和对照组的角质形成细胞相比，传代次数增加了3倍。结论：体外初步检验表明，构建的序列保留了野生型HPV11的致病特点，并且Cre／LoxP系统能够在细胞内将HPV11切割为游离状态，同时使荧光蛋白有效表达。因此，在质粒C上的这段序列具备了制作HPV11转基因小鼠病理模型的潜力。

以上为本篇毕业论文范文人乳头瘤病毒11型全基因组转基因小鼠基因元件的设计与构建的介绍部分。

本论文在免费论文栏目，由论文网(www.zjwd.net)整理,更多论文,请点论文范文查找

收费专业论文
汉语言文学论文
物理学论文
自动化专业论文
测控技术专业论文
历史学专业论文
机械模具专业论文
金融专业论文
电子通信专业论文
材料科学专业论文
英语专业论文
会计专业论文
行政管理专业论文
财务管理专业论文
电子商务国贸专业
法律专业论文
教育技术学专业论文
物流专业论文
人力资源专业论文
生物工程专业论文
市场营销专业论文
土木工程专业论文
化学工程专业论文
文化产业管理论文
工商管理专业论文
护理专业论文
数学教育专业论文
数学与应用数学专业
心理学专业论文
信息管理专业论文
工程管理专业论文
工业工程专业论文
制药工程专业论文
电子机电信息论文
现代教育技术专业
新闻专业论文
热能与动力设计论文
教育管理专业论文
日语专业论文
德语专业论文
轻化工程专业论文
社会工作专业论文
乡镇企业管理
给水排水专业
服装设计专业论文
电视制片管理专业
旅游管理专业论文
物业管理专业论文
信息管理专业论文
包装工程专业论文
印刷工程专业论文
动画专业论文
营销专业论文范文
工商管理论文范文
汉语言文学论文范文
法律专业论文范文
教育管理论文范文
小学教育论文范文
学前教育论文范文
财务会计论文范文

电子商务论文范文

上一篇：心宁片对麻醉犬心肌缺血及血流动..

下一篇：腺病毒介导的hsp70对大鼠肝细胞氧..