内质网应激相关因子与糖尿病大鼠脊髓损伤关系的研究

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内质网应激相关因子与糖尿病大鼠脊髓损伤关系的研究

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毕业论文范文题目：内质网应激相关因子与糖尿病大鼠脊髓损伤关系的研究，论文范文关键词：内质网应激相关因子与糖尿病大鼠脊髓损伤关系的研究
内质网应激相关因子与糖尿病大鼠脊髓损伤关系的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：研究背景脊髓损伤(spinalcordinjury,SCI)是一种严重的神经系统损伤,可以造成患者终身残疾甚至死亡,是目前医疗技术难以解决的临床问题。目前我国糖尿病发病率越来越高,糖尿病患者脊髓损伤后神经功能的恢复更加困难,从而带来更高的死亡率。而糖尿病患者的脊髓损伤机制目前尚未明确。脊髓损伤后所致的神经细胞死亡,以往研究认为其主要死亡方式是坏死,而近年来一些研究提示其死亡主要是神经细胞凋亡的结果。内质网(endoplasmicreticulum,ER)是真核细胞内广泛存在的具有网管状膜结构的细胞器,负责大部分分泌及跨膜蛋白的合成、修饰加工、成熟与转运。当内质网腔中错误折叠和未折叠蛋白堆积可引起内质网应激反应,在神经元凋亡通路中扮演着重要角色,同时研究已证实高血糖可导致内质网应激介导的凋亡通路被激活。GRP78(糖调控蛋白),又称Bip(immunoglobulinbindingprotein),是Caspase-12的伴侣蛋白,内质网反应可使GRP78大量表达,并与内质网中错误折叠和未折叠蛋白结合,恢复蛋白正确构象,维持内环境稳定（本文此处忽略..）。GRP78的转录诱导在保护细胞避免各种内质网应激引起的凋亡中具有重要作用。而Caspase-12的前体分子位于内质网膜表面,在发生内质网应激时经过特定位点裂解激活,引发细胞凋亡。因此Caspase-12是特异性的内质网应激凋亡蛋白。为研究糖尿病患者脊髓损伤较正常人群脊髓损伤严重的病理机制,我们通过制作糖尿病大鼠急性脊髓损伤模型与正常脊髓损伤模型做比较,测定损伤24h和7d后损伤节段脊髓灰质前角运动神经元GRP78和Caspase-12的表达变化,探索内质网应激反应在糖尿病大鼠脊髓损伤中可能的分子作用机制,为未来治疗糖尿病患者急性脊髓损伤提供动物实验基础和一定的理论依据。目的测定GRP78和Caspase-12在糖尿病大鼠脊髓急性机械性损伤24h和7d后T10脊髓灰质前角运动神经元中的表达,并与正常脊髓损伤组大鼠做比较,探索内质网应激相关因子在大鼠急性机械性脊髓损伤中的作用和高血糖对其影响。材料和方法60只健康成年SD大鼠,随机分为三组：(1)假手术对照组,(2)脊髓损伤组,(3)糖尿病脊髓损伤组。假手术对照组,仅T10全椎板切除不做脊髓打击；脊髓损伤组大鼠用改良Allen（文章此处忽略..）氏法全椎板切除后打击T10段脊髓；糖尿病大鼠组通过尾静脉注射链尿佐菌素(STZ)制作成糖尿病模型,通过改良Allen氏法全椎板切除后打击T10段脊髓。运用BBB分级法评分、损伤段脊髓形态学观察和免疫组化检测等方法,观察术后24h和7d后大鼠的运动功能恢复情况、损伤段脊髓的病理形态学改变和GRP78、Caspase-12的表达变化。统计学处理采用SPSS10.0统计学软件。计量资料采用mean±sd表示,组间差异采用单因素方差分析,配对资料采用t检验。设P0.05为差异有统计学意义。结果1、假手术对照组大鼠24小时候后运动功能BBB评分21分。脊髓损伤组和糖尿病脊髓损伤组脊髓损伤24h后大鼠均出现严重运动功能障碍,BBB功能评分为0-1分不等,两组统计学无差异(P0.05,n=20),与假手术对照组对比均有显著性差异(P0.01,n=20)。7d后,正常对照组大鼠BBB功能评仍分为21分,而脊髓损伤组大鼠运动功能有所恢复,BBB功能评分为6-8分不等,糖尿病脊髓损伤组运动功能恢复较慢,BBB功能评分为3-5分不等,任意二组间差异均有统计学意义。(P=0.000,n=20)2、脊髓组织切片进行HE染色,假手术对照组T10脊髓术（文章此处忽略..）后24h,7d光镜下可见组织结构致密,白质灰质界限清楚,神经元形态完整。脊髓损伤组T10脊髓术后24h灰质前角可见出血,组织水肿,少量神经元凋亡。7d后脊髓长轴方向形成一个梭形的坏死区,坏死区出现囊性退变,伴有胶质细胞增生,并残存部分神经元。糖尿病脊髓损伤组T10脊髓24h后灰质前角可见片状出血,神经元有凋亡。7d后脊髓前角形成大量空泡,组织疏松,周围有巨噬细胞浸润,残存神经元较脊髓损伤组明显减少。3、免疫组化结果显示脊髓损伤24h后Caspase-12在假手术对照组、脊髓损伤组、糖尿病脊髓损伤组Caspase-12阳性细胞的平均数量分别为：31.4±4.4/mm2,70.0±18.2/mm2,90.0±5.8/mm2,任意两组间统计学有显著性差异(P0.01,n=20)。7d后分别为：30.5±3.9/mm2,33.0±4.2/mm2,30.0±3.8/mm2,任意两组间统计学无显著性差异(P0.05,n=20)。GRP78阳性细胞在脊髓损伤24h后在假手术对照组、脊髓损伤组、糖尿病脊髓损伤组的平均数量分别为：10.1±2.8/mm2,35.0±13.2/mm2,12.0±3.3/mm2。脊髓损伤组表达明显增多,与假手术组和糖尿病脊髓损伤组统计学均有显著性差异(P0.01,n=20),7d后分别为：12.1±3.（文章此处忽略..）4/mm2,14.2±3.2/mm2,13.0±3.8/mm2,任意两组间统计学没有显著性差异(P0.05,n=20)。结论1、大鼠脊髓损伤后Caspase-12和GRP78表达增多,提示脊髓损伤诱导了内质网应激,GRP78的早期上调是细胞启动的自我保护机制,Caspase-12表达上调促进脊髓细胞凋亡。2、糖尿病大鼠脊髓损伤24h后Caspase-12表达比正常脊髓损伤组增多,而GRP78表达较少,可能与糖尿病大鼠的高血糖抑制了GRP78的表达和激活Caspase-12有关。

以上为本篇毕业论文范文内质网应激相关因子与糖尿病大鼠脊髓损伤关系的研究的介绍部分。

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