p27～（kip1）在小鼠卵巢发育中的控制作用

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p27～（kip1）在小鼠卵巢发育中的控制作用

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毕业论文范文题目：p27～（kip1）在小鼠卵巢发育中的控制作用，论文范文关键词：p27～（kip1）在小鼠卵巢发育中的控制作用
p27～（kip1）在小鼠卵巢发育中的控制作用毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：为了揭示哺乳动物卵巢滤泡形成和活化的分子机制，我们利用基因修饰小鼠模型对此进行了深入细致的研究，获得了一些有力的证据，表明周期蛋白依赖性激酶(Cdk)的抑制因子p27~(kip1)(p27)是通过抑制原始滤泡的形成和活化、促进原始滤泡死亡来控制卵巢发育的。为了研究p27的功能，我们利用p27缺失(p27~(-／-))小鼠来研究p27在小鼠卵巢滤泡形成、活化以及闭锁退化中的作用。通过提取小鼠尾巴的染色体组DNA测定小鼠的基因型；通过形态学染色和免疫组织化学染色确定小鼠卵巢中卵母细胞和各个发育阶段滤泡的数量；通过免疫印迹法测定小鼠卵巢中以及磷酯酰肌醇—3激酶途径中相关蛋白质的表达水平和磷酸化水平；用组蛋白H1做为底物测定小鼠卵巢中相关激酶的活性。通过对p27缺失小鼠和野生型（本文此处忽略..）小鼠出生后第1天卵巢进行免疫组织化学染色结果显示，p27缺失小鼠出生后，形成原始滤泡的数量是野生型小鼠的两倍。p27缺失小鼠卵巢中原始滤泡数量的增加，表明p27具有抑制小鼠原始滤泡形成的作用。用组蛋白H1做为底物对p27缺失小鼠卵巢中周期蛋白依赖性激酶的活性进行测定显示，p27缺失小鼠中Cdk2的活性与野生型小鼠相比显著上升。表明p27缺失而抑制作用解除时Cdk2的活性上升，由此促进和加强了原始滤泡的形成。利用p27与Cdk2共同缺失的小鼠模型试验结果表明，小鼠卵巢中不能形成原始滤泡。因此Cdk2的活性存在与否直接影响着卵巢中能否形成原始滤泡。以上结果说明p27是通过抑制Cdk2的活性来阻止小鼠卵巢中原始滤泡形成的。通过对p27缺失小鼠和野生型小鼠出生后第2天、第4天、（此处忽略..）第8天、第13天和第35天的卵巢进行形态学染色和免疫组织化学染色观察以及对小鼠出生后第8天、第18天、第23天和第35天卵巢中原始滤泡和活性滤泡的数量以及两者的百分率进行统计，结果表明p27缺失小鼠卵巢中原始滤泡被过早活化了，说明p27可以有效地阻止小鼠卵巢中原始滤泡向活性滤泡的转化。通过免疫印迹法测定p27缺失小鼠卵巢提取物中磷酯酰肌醇—3激酶途径的关键分子蛋白激酶B、磷酸化的蛋白激酶B、Foxo3a和磷酸化的Foxo3a，p27缺失小鼠与野生型小鼠的表达水平基本一致，表明磷酯酰肌醇—3激酶途径在p27缺失小鼠卵巢原始滤泡活化过程中能正常发挥调控作用，促进原始滤泡的活化。另外，在小鼠发育成熟早期(例如，在12周的小鼠卵巢中)，p27缺失小鼠卵巢中滤泡的数量急剧下降，大量被活化的（此处忽略..）滤泡耗尽之后引起了卵巢功能早衰(POF)，这和人类卵巢功能早衰现象是一致的。表明p27缺失可以导致卵巢滤泡发育缺陷，引起卵巢功能失调和多种病理变化。通过对p27缺失小鼠和野生型小鼠卵巢中原始滤泡和活性滤泡数量的分析表明野生型小鼠在性成熟前(出生后第35天)原始滤泡池中没有被活化的大量原始滤泡消失了，而p27缺失小鼠性成熟前没有被活化的原始滤泡大部分消失的现象被抑制了。说明p27是造成小鼠卵巢中性成熟前原始滤泡闭锁退化的关键分子。用组蛋白H1做为底物测定p27缺失小鼠卵巢中Cdk2／Cdc2—cyclinA／B1激酶的活性，与野生型小鼠相比明显上升，表明由于p27缺失导致的激酶活性升高在一定程度上抑制了原始滤泡的死亡。说明p27是通过抑制相关激酶的活性来导致小鼠卵巢（本文此处忽略..）中性成熟前原始滤泡闭锁退化的。总之，p27是决定哺乳动物卵巢发育的关键分子之一。p27是卵巢原始滤泡形成和活化的抑制因子，是原始滤泡闭锁退化的促进因子，是黄体分化的重要因子。我们提出小鼠卵巢中p27缺失可以导致滤泡发育缺陷，从而引起卵巢功能失调和多种病理变化。这项研究中的发现为人类由于卵巢遗传畸变而导致滤泡发育缺陷的疾病提供了有力的理论依据，使我们能够深入了解人类卵巢功能早衰等导致不孕的疾病。

以上为本篇毕业论文范文p27～（kip1）在小鼠卵巢发育中的控制作用的介绍部分。

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