双歧杆菌对新生鼠坏死性小肠结肠炎回肠形态学及iNOS、EGF基因表达的影响

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双歧杆菌对新生鼠坏死性小肠结肠炎回肠形态学及iNOS、EGF基因表达的影响

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毕业论文范文题目：双歧杆菌对新生鼠坏死性小肠结肠炎回肠形态学及iNOS、EGF基因表达的影响，论文范文关键词：双歧杆菌对新生鼠坏死性小肠结肠炎回肠形态学及iNOS、EGF基因表达的影响
双歧杆菌对新生鼠坏死性小肠结肠炎回肠形态学及iNOS、EGF基因表达的影响毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的:研究双歧杆菌对实验性新生鼠NEC模型回肠形态学的影响,同时,通过荧光定量PCR的方法检测回肠iNOS、EGF基因的表达,探讨补充双歧杆菌对肠道的保护作用是否与抑制iNOS的升高和EGF的下调有关,为应用双歧杆菌防治新生儿NEC提供分子生物学依据。方法:1、实验动物及分组:生后12小时内的新生鼠分3组,A组:实验组,13只,添加双歧杆菌并建立NEC模型;B组:模型组,13只,建立NEC模型;C组:空白对照组,13只,不添加任何益生菌,亦不建立NEC模型。2、双歧杆菌的添加方法:喂奶前临时在配方奶中加入双歧杆菌活菌,使配方奶中双歧杆菌的菌浓度为1*108cfu/ml,2次/日。3、建立NEC模型:对生后12小时内的新生鼠予部分配方奶喂养(4次/日),100%氮气缺氧90秒,（文章此处忽略..）4℃冷刺激10分钟,每天2次连续3天,在最后1次缺氧冷刺激后给予内毒素(LPS)20ul/只灌胃(浓度2.5mg/ml),建立新生鼠NEC模型。4、标本的制取:在建模结束后12小时(空白对照组在同一时间点),颈椎脱臼处死新生鼠,在距盲肠0.5cm处,剪取长约0.5cm的远端回肠置4%甲醛溶液中固定,为制作病理切片用;另再取约2cm回肠,迅速置-80℃冰箱为检测iNOS、EGF基因表达用。5、实验方法和检测指标:各组新生鼠建立NEC模型前后的体重变化;NEC模型建立过程中的死亡率;甲醛溶液固定过的回肠经石蜡包埋、H.E染色制成病理切片后,镜下观察各组新生鼠肠损伤评分及NEC的发生率;将-80℃保存的肠组织提取总RNA,然后逆转录成cDNA,采用荧光定量PCR方法检测iNOS、EGF（文章此处忽略..）基因在各组间表达的差异。6、统计学方法:采用SPSS13.0统计软件,计量资料以均值±标准差(?x±s)表示,组间比较采用方差分析或Kruskal-WallisH检验,LSD-t检验或Nemenyi法检验;发生率间的比较采用χ2检验,P0.05提示差异有统计学意义。。结果:1.B组建模结束后体重低于建模前水平[-(0.23±0.61)g],A组体重稍高于建模前水平[(0.41±0.59)g];C组整个实验期间体重增加满意[(2.45±0.34)g],各组间比较P0.05,差异有统计学意义。2.A、B、C组建模过程中新生鼠死亡率分别为7.69%、15.38%和0,各组死亡率的比较P﹥0.05,差异无统计学意义。3.A、B、C组NEC的发生率为38.46%(5/13)、84.62%(11/13)和0(0/13),各组间比较,P0.05,差异有统计学意义;A、B、C组肠损伤组织病理学评分（略..）(?x±s)分别为(1.50±0.52)、(2.35±0.41)、(0.27±0.37),各组间比较P0.05,差异有统计学意义;。4.荧光定量PCR方法检测iNOS、EGF基因表达的结果显示,对iNOS:以C组为对照,iNOS在A、B两组均显著升高,A组是C组的2.74倍,B组是C组的12.46倍,P0.05;A、B两组比较,A组表达较B组降低(P0.05);对EGF:以C组为对照,EGF在A、B两组均有降低,但A组是C组的0.52倍,P0.05,B组是C组的0.85倍,P0.05;A、B两组比较,两组差异无统计学意义(P0.05)。结论:1.生后早期的新生鼠可通过部分配方奶喂养、100%氮气缺氧、4℃冷刺激和灌服低浓度LPS模拟与人类相类似的实验性NEC动物模型;2.添加双歧杆菌可减轻因配方奶喂养、缺氧、冷刺激和灌服LPS引起的体重减轻。3.添加双歧杆（文章此处忽略..）菌可降低实验性新生鼠NEC的发生率和肠损伤的严重程度。4.新生鼠NEC时其回肠iNOS的基因表达增加;双歧杆菌可能通过抑制iNOS的激活,减轻了肠道粘膜的损害,从而降低了NEC的发生率及其严重程度。

以上为本篇毕业论文范文双歧杆菌对新生鼠坏死性小肠结肠炎回肠形态学及iNOS、EGF基因表达的影响的介绍部分。

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