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隐孢子虫的小鼠动物模型建立及PCR检测和RFLP鉴定

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毕业论文范文题目:隐孢子虫的小鼠动物模型建立及PCR检测和RFLP鉴定,论文范文关键词:隐孢子虫的小鼠动物模型建立及PCR检测和RFLP鉴定
隐孢子虫的小鼠动物模型建立及PCR检测和RFLP鉴定毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:本论文从隐孢子虫小鼠动物模型的建立、NTZ对免疫小鼠的抗隐孢子虫活性、常规及通用引物对隐孢子虫的检测、Nested-PER加RFLP对隐孢子鉴定等几个方面进行了研究。实验一对隐孢子虫种进行了模型建立的探索,对不同虫种(C.parvum和C.andersoni)是否具有感染性、不同品系(BALB/c和昆明KM)和鼠龄(断乳两天、5~6周龄、10-12周龄)、不同免疫抑制剂量(每升饮水中分别加DEX0mg、2.5mg、5mg、7.5mg、10mg、12.5m(本文此处忽略..)g)对小鼠感染隐孢子虫的影响、隐孢子虫的卵囊不同接种量(1.5×10~4个、1.5×10~3个、1.5×10~2个、75个)和不同保存时间(1、2、6、8个月)的卵囊对感染情况的影响进行了详细的研究。实验结果表明:C.parvum虫种能够感染上本实验所采用的BALB/c和昆明(KM)小白鼠两种小鼠,而C.andersoni没有能够感染本次实验小鼠;且从小鼠感染后的排卵囊量和小鼠的生存状态来看,采用5~6周龄的KM鼠能获得最大量的隐孢子虫卵囊,小鼠的死亡数最少;每升饮(略..)水中地塞米松(DEX)量为7.5mg~10mg组比12.5mg以上组小鼠死亡数量少,比5mg/L以下组排卵囊数量多;接种不同卵囊数和卵囊的保存时间这两个参数均对小鼠受感染后的排卵囊情况影响不大。另外对NTZ对免疫小鼠的抗隐孢子虫活性试验进行了研究,采用本实验建立的隐孢子虫小鼠模型,设立50mg/kg/d、100mg/kg/d、200mg/kg/d及空白对照组对NTZ的药效学进行了研究,结果表明:NTZ在免疫抑制小鼠模型中具有抗隐孢子虫的活性,(略..)有效剂量为200mg/kg/d。实验二对隐孢子虫进行了三种不同的常规检测,分别为饱和蔗糖漂浮镜检法、饱和盐水漂浮镜检法和改良抗酸染色法;并设计一对通用引物进行PCR检测和对PCR的扩增产物克隆测序。常规检测的结果表明:饱和蔗糖漂浮法能清楚的分辨出卵囊,但由于卵囊在饱和蔗糖中保存时间不能太久,不适合大批量的样品检测;饱和盐水漂浮法也能较快清楚的检测出卵囊,但由于纯化过程中不能清除各种杂质,对比不明显,检出率没有饱和(文章此处忽略..)蔗糖漂浮法高;改良抗酸染色法能很清晰的检测出隐孢子的卵囊,但可能出现假阳性结果,且检出率也不是很高。但这三种常规的检测方法所需的实验设备简单,操作技术要求难度不大,适合于临床急性病例的检测。本实验所设计的通用引物能一次性的检测出目前国内哺乳动物所感染


以上为本篇毕业论文范文隐孢子虫的小鼠动物模型建立及PCR检测和RFLP鉴定的介绍部分。
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