基因工程融合蛋白疫苗的衍生化及肝癌转移动物模型的建立与鉴定

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基因工程融合蛋白疫苗的衍生化及肝癌转移动物模型的建立与鉴定

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毕业论文范文题目：基因工程融合蛋白疫苗的衍生化及肝癌转移动物模型的建立与鉴定，论文范文关键词：基因工程融合蛋白疫苗的衍生化及肝癌转移动物模型的建立与鉴定
基因工程融合蛋白疫苗的衍生化及肝癌转移动物模型的建立与鉴定毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：肿瘤转移是恶性肿瘤的生物学特征之一,也是肿瘤临床治疗的难点。据报道,60%以上的恶性肿瘤患者于初次诊断时已发现转移[1]。在临床肿瘤患者中,约有80%-90%以上死于侵袭和转移,可以说肿瘤转移是大多数肿瘤患者死亡的主要原因。肝细胞癌由于其组织结构的特点,容易发生早期转移,是肝癌预后不良的原因之一。在肝细胞肝癌患者尸检中发现50%-84.6%有转移[2]。目前肝癌的治疗手段主要有手术治疗、放射治疗、化学治疗、中医药治疗等。随着对肿瘤免疫理论的深入认识和一些新的实验方法的涌现,肿瘤疫苗已成为预防和治疗肿瘤转移、复发的得力手段。黑色素瘤抗原(MelanomaAntigen,MAGE)是最先被发现的人类肿瘤特异性抗原,1991年Boon等首次发现的人类肿瘤免疫排斥抗原-黑色素瘤相关抗原-1(Melanomaassociatedantigen-1,MAGE-1)是MAGE家族的组成成员。其广泛表达于多种不同组织类型的肿瘤,而在除睾丸和胎盘外的正常组织中均不表达;又因MAGE-（略..）1可与人类白细胞抗原(HumanLeukocytesAntigen,HLA)分子形成抗原复合物,此抗原复合物可被细胞毒T淋巴细胞(CytotoxicLymphocyte,CTL)的T细胞受体(Tcellreceptor,TCR)所识别,刺激强烈的CTL反应[3],因此其是肿瘤特异性免疫治疗理想的靶分子。热休克蛋白(HeatShockProtein,HSP)具有分子伴侣作用,参与肿瘤抗原的加工递呈,在诱导肿瘤免疫反应中发挥着重要作用。本实验室研究已经表明,HSP70与MAGE1融合蛋白能提高MAGE1蛋白疫苗的免疫效果。为了给MAGE1与HSP70融合蛋白基因工程纳米疫苗在预防肝癌转移方面提供合适的动物模型,本研究主要用人外周血淋巴细胞(Humanperipheralbloodlymphocyte,huPBL)和肝癌转移细胞系97-高转移(Metastatichepatocellularcarcinomacell97-High,MHCC97-H)建立免疫重建荷人高（略..）转移肝癌重症联合免疫缺陷(Severecombinedimmunodeficiency,SCID)小鼠模型,并对其进行鉴定。全文分为以下三个部分:实验一MHCC97-H细胞中MAGE-1抗原表达的检测目的:检测MHCC97-H细胞中MAGE-1抗原的表达情况,为MAGE-1/HSP70融合蛋白基因工程纳米疫苗预防肝癌实验提供依据。方法:用免疫组化、免疫荧光、WesternBlotting来检测MHCC97-H细胞中MAGE-1的表达情况。结果:检测出MHCC97-H细胞中有MAGE-1抗原的表达,且免疫组化、免疫荧光、WesternBlotting的结果是相一致的。结论:MHCC97-H细胞中有MAGE-1抗原的表达,为后面的用肿瘤特异性抗原MAGE-1与热休克蛋白HSP70融合蛋白疫苗(M1H)预防肝癌的转移实验提供了依据。实验二MAGE1-HSP70融合蛋白的衍生化目的:为了提高大分子蛋白的载药量,对本实验室已经纯化的肿瘤特异性抗原M1H融合蛋白进行衍生化。方法:（略..）运用化学合成方法将肿瘤特异性抗原融合蛋白M1H与棕榈酸交联,使融合蛋白酯化后能更容易进行纳米包裹。结果:成功制备了衍生化M1H融合蛋白。结论:衍生化M1H融合蛋白的成功制备,为下一步用纳米脂质体包裹肿瘤特异性抗原MAGE-1与热休克蛋白HSP70融合蛋白奠定了基础。实验三免疫重建荷人高转移肝癌SCID鼠模型的建立及其鉴定目的:建立具有人免疫学特性的高转移肝癌SCID鼠模型。方法:SCID小鼠腹腔注射人外周血淋巴细胞,皮下接种人高转移肝癌细胞MHCC97-H,免疫重建人高转移肝癌SCID小鼠模型,并鉴定建立的结果。结果:(1)免疫重建荷人高转移肝癌细胞小鼠的成瘤率为100%,较荷瘤组成瘤潜伏期延长,体积缩小(p0.05);荷瘤组和人化荷瘤组的肝脏转移率分别为82.5%(5/6)和67%(4/6),人化荷瘤组从皮下转移到肝脏所需时间较荷瘤组延长(p0.05)。(2)第2、4、6周小鼠血中人IgG含量的测定:同期相比,人化荷瘤组小鼠血中人IgG含量高于人化组(p0.05)。(3)第6周SCID小鼠外周血中人CD3+T淋巴细胞（本文此处忽略..）和人CD20+B淋巴细胞含量的测定:人化荷瘤组小鼠血中人CD3+T淋巴细胞和人CD20+B淋巴细胞含量高于人化组(p0.05)。(4)免疫组化检测人化组和人化荷瘤组小鼠脾脏中存在人CD3+T淋巴细胞和CD20+B淋巴细胞。结论:成功建立免疫重建荷人高转移肝癌SCID鼠模型,为肝癌转移的研究及治疗提供了理想的动物模型。综上所述,本实验为本实验室研究出的“恶性肿瘤基因工程纳米疫苗”NL(M1H)对表达MAGE1抗原的肝癌细胞的转移的预防奠定了基础。本研究为研制使用安全、高效的肿瘤疫苗展示了良好的前景,为本疫苗的进一步研究提供了条件。

以上为本篇毕业论文范文基因工程融合蛋白疫苗的衍生化及肝癌转移动物模型的建立与鉴定的介绍部分。

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