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动物源性食品中各种动物源性肉及肉制品鉴别检验的研究

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毕业论文范文题目:动物源性食品中各种动物源性肉及肉制品鉴别检验的研究,论文范文关键词:动物源性食品中各种动物源性肉及肉制品鉴别检验的研究
动物源性食品中各种动物源性肉及肉制品鉴别检验的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:近年来,动物源性食品掺假、过分添加各种添加剂、使用非食用性原料和成分等各种食品安全问题不断出现。因此,建立快速、准确的检测方法,对食品进行动物源性成分鉴定已经成为一个备受关注的问题。本试验开展了多重PCR技术鉴别检测肉食品中动物源性成分的研究,通过分子生物学手段,研究各类动物源性肉及肉制品的特异性基因,借助聚合酶链式反应的特性,来达到对相应的动物源性肉及肉制品定性和定量检测的目的。用KI法、氯仿-醋酸钠法、酚仿抽提法、试剂盒法和FTA滤膜法5种提取方法分别对新鲜动物组织进行基因组DNA提取,通过1%琼脂糖凝胶电泳检测,所获基因组DNA均呈现亮带,背景清晰,电泳条带整(此处忽略..)齐均匀,完整性好。用同等样品,KI法和氯仿-NaAc法提取效果最好,试剂盒法次之。紫外分光光度计所测OD260nm/OD280nm值在1.70~1.93,浓度为0.1~2.0μg/μL,提取的DNA无RNA和蛋白质或酚的污染。试验过程中通过对TaqDNA聚合酶、dNTPs浓度、Mg2+浓度、引物、循环参数、反应温度、反应时间等参数的优化,确定了PCR的反应体系和反应程序。鸭和猪(引物1)单重PCR反应体系为:预混液25μL,引物终浓度为0.2μmol/L,模板0.5μg,用ddH2O补足体系50μL。鸭成分PCR反应条件为:94℃预变性5min;94℃变性30s,56℃退火40s,72℃延伸60s,35个循环;最后于72℃延伸5min。猪成分PCR反应条件(文章此处忽略..)为:94℃预变性1min;94℃变性60s,54℃退火30s,72℃延伸30s,35个循环;72℃延伸5min。鸭肉DNA扩增后在226bp位置有明亮条带,猪肉DNA扩增后在149bp位置有明显亮带,与预期目的条带大小一致,空白对照无条带产生,无非特异条带。KI法最低检出限为0.005%,氯仿-NaAc法检出限为0.01%,试剂盒法检出限为0.1%.鸭和猪(引物1)双重PCR反应体系为:预混液25μL,鸭引物各2μL,猪1引物各0.5μL(引物浓度为20μmol/L),鸭模板1μg,猪模板0.5μg,用ddH2O补足体系50μL。反应条件为:94℃预变性5min;94℃变性30s,56℃退火40s,72℃延伸60s,35个循环;72℃延伸7min。结果可同时扩增出两个清晰条带,位置与目的条带一致。用牛、山羊、绵(略..)羊、猪、鸡、马、鹿、兔8种动物相应的特异性引物进行多重PCR扩增,从不同物种扩增得到片段大小各不相同的PCR产物。PCR反应体系为:预混液25μL,混合引物6.5μL,模板0.5μg,用ddH_2O补足体系至50μL。反应程序为:94℃预变性4min;94℃变性30s,58℃左右退火30s,72℃延伸30s,35个循环;72℃延伸4min。经过反复试验,当引物的混合比例为通用上游:牛:山羊:绵羊:猪2:鸡:马:鹿:兔=1:2:3:0.5:1:0.6:2:1.5:1.8(1代表20pmol/50μL)时,扩增效果最为理想。此方法能同时扩增出8种动物的特异性条带,检测灵敏度达到0.01%.实际样品的检测结果表明,自行混合的引物完全能够扩增出不同种类肉品相应的特异DNA片段,(略..)可应用于熟肉制品进行真伪鉴别及掺假成分的判断。本试验建立的方法特异性强、灵敏度高、快速和操作简便,为快速检测食品中动物源性成分构建了一个技术平台,能作为一种推荐性方法被质检部门推广应用。


以上为本篇毕业论文范文动物源性食品中各种动物源性肉及肉制品鉴别检验的研究的介绍部分。
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