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豫谷一号BAC文库的构建及鉴定

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毕业论文范文题目:豫谷一号BAC文库的构建及鉴定,论文范文关键词:豫谷一号BAC文库的构建及鉴定
豫谷一号BAC文库的构建及鉴定毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:谷子(SetariaitalicaBeauv.),是世界上最古老的农作物之一,并且作为一种重要的粮食作物,在我国北方的粮食生产中占有重要地位。谷子具有多种优良的农艺性状,目前已经证实的性状如耐旱、耐贫瘠等。随着人们对更高水平生活的追求,各种营养要素的均衡成为对食品的新的要求。谷子含人体所需的多种氨基酸,最为重要的一点是其所含的不饱和脂肪酸的含量很高,而这有正好是人体智力发育不可或缺的重要营养成分。我国谷子育种研究起步(此处忽略..)较晚,它的遗传研究相对落后,许多重要性状的基因有待开发。分子标记辅助育种技术,是现在农业技术发展的趋势,而获得优良农艺性状的基因是这一技术的核心要求。一般来讲现在获得目标基因主要采取图位克隆的策略。图位克隆目的基因一般由基因遗传图谱的构建、物理图谱的构建、高通量精细图谱的构建、染色体登陆或步移、基因的鉴定五个要素组成。而这其中的关键技术染色体步移,需要大量的基因组DNA片段作为基础。而BAC文库正承担了这一重要的(此处忽略..)角色。因此构建谷子的分子生物学技术平台就显得十分重要,而基因组文库正是这一平台的核心。豫谷一号是我国自主育成的优良品种,在组织培养、遗传学研究的三体构建具有优势,美国的谷子基因组测序也采用豫谷1号,所以以其作为原始材料构建BAC文库有着十分重要的现实意义。本研究参考了前人关于TAC文库及BAC文库的构建方法,建立了自己的一套BAC文库的构建体系。包括:从幼嫩的叶片中获得高分子量的DNA、大量最佳部分酶切条件的确定、(略..)片段大小的选择、高效的连接与转化体系等。最终获得了一套转化效率高,重组率低,空载率低的BAC文库构建体系。由于BAC文库的构建相当费时费力,其试验的周期很长,且花费很大,因此每一步的试验都要精益求精。在这一系列的步骤中第一步细胞核的提取及包埋最为关键的,它直接影响到后续工作的成败。利用所构建的体系,以peBloBAC11为载体,构建了豫谷一号的BAC文库,到目前为止获得了36096个克隆,并以单克隆的形式组装保存。从所构建的文(本文此处忽略..)库中随机挑取50个克隆用减裂解法提取质粒,脉冲电泳进行检测空载率为5%,重组克隆率为98%。平均插入片段大小为75kb,覆盖谷子基因组约4-5倍。本BAC文库的构建,是世界上第一个谷子基因组文库,为谷子基因组的深入研究提供了基础,尤其是谷子基因组测序即将完成,谷子功能基因组研究的时代即将到来的现在,本文库的构建是谷子功能基因发掘的物质基础,也将极大促进禾谷类作物比较遗传学的深入发展。


以上为本篇毕业论文范文豫谷一号BAC文库的构建及鉴定的介绍部分。
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