调控大豆抗逆反应的转录因子基因的分离与功能鉴定

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调控大豆抗逆反应的转录因子基因的分离与功能鉴定

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毕业论文范文题目：调控大豆抗逆反应的转录因子基因的分离与功能鉴定，论文范文关键词：调控大豆抗逆反应的转录因子基因的分离与功能鉴定
调控大豆抗逆反应的转录因子基因的分离与功能鉴定毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：非生物胁迫对植物的生理代谢产生各种各样的影响，植物通过改变自身基因的表达而改变其体内的代谢机制，从而对各种非生物环境胁迫进行耐受和适应。植物体内基因表达的变化受到多种的信号转导机制的调控，作为信号转导重要组成部分的转录因子在调控胁迫相关的基因表达的过程中发挥着重要的作用。其中AP2／EREBP类转录因子是近年来研究较多，也最详尽的一个转录因子家族；作为其亚家族，DREB类转录因子也成为植物分子生物学和植物抗旱分（此处忽略..）子机理研究的重要对象。本论文研究中，根据DREB类蛋白的AP2／EREBP保守域的氨基酸序列设计探针，通过菌斑原位杂交技术获得两个新的mRNA的全长序列。利用特异性的引物，经RT-PCR获得了2个cDNA的开放阅读框序列，其核苷酸长度分别为477bp和816bp，命名为GmDREB2和GmDREB3，GmDREB2和GmDREB3分别编码含有159和272个氨基酸的蛋白。经氨基酸序列和蛋白结构分析，GmDREB2和GmDREB3蛋白与在拟南芥中有过（略..）详细报道的EREBP／AP2家族转录因子具有高度的同源性，其蛋白结构类似于已经从拟南芥中分离的DREB转录因子，推测GmDREB2和GmDREB3蛋白属于DREB亚家族，在调控抗逆基因表达的过程中发挥转录因子的作用。GmDREB2和GmDREB3能够在大肠杆菌中以GST融合蛋白的形式表达，DNA片段具有较好的表达活性；纯化融合蛋白GST-GmDREB2和GST-GmDREB3，通过凝胶阻滞技术研究了GmDREB2和GmDRE（文章此处忽略..）B3融合蛋白与野生型或突变型DRE元件特异性的结合。研究结果表明，GmDREB2和GmDREB3蛋白与野生型DRE元件核心序列特异性结合，与突变型DRE元件核心序列特异性相互作用弱，其影响显著大于DRE元件两端碱基。通过酵母单杂交技术研究了GmDREB2和GmDREB3在酵母中的转录激活作用，GmDREB2和GmDREB3激活了DRE元件调控下的HIS3报告基因的高效表达，使得酵母在营养缺陷型培养基SD／-HIS+3AT能够生（略..）长，证明了GmDREB2和GmDREB3基因表达产物与DRE元件的相互作用激活了DRE元件调控的下游基因的表达。本论文首次克隆了GmDREB2和GmDREB3基因，其能够在原核正确表达，在酵母中GmDREB2和GmDREB3能够与DRE顺式作用元件特异性结合，调控DRE下游基因的表达。此结论为提高农作物抗胁迫能力奠定了理论技术基础。

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