重量法

该法是用常规提取总皂苷粗品。通过皂苷粗品的百分含量来比较样品的质量，

高效液相色谱法

采用高效液相色谱法测定柴胡中柴胡皂苷 a、d的含量。

方法 :采用 Alltech C1 8(4.6 mm× 2 5 0 mm ,5μm )色谱柱 ,甲醇 -乙腈 -水 -冰醋酸 (18∶ 40∶ 42∶ 0 .2 )为流动相 ,流速 1.0 0 m l/ min,Alltech EL SD- 5 0 0检测器 ,外标法定量。结果 :柴胡皂苷 a在 5 .0 2 5～ 15 .0 75μg范围呈线性 ,回收率为 96 .2 % ,RSD为 1.43% (n =9) ;柴胡皂苷 d在5 .6 70～ 17.0 10 μg范围呈线性 ,回收率为 95 .0 % ,RSD为 1.76 % (n =9)。结论 :本法简便可行 ,重现性好 ,可作为柴胡药材质量检测的方法。 

2.3紫外-分光光度法测定总皂苷：

分光光度法不仅能测定有色物质，还能测定有共轭结构的无色物质，操作简单、灵敏、适用面广，常用于三萜皂苷的分析测定。由于柴胡皂苷无色，可以加入适当的试剂显色后测定，此方法常用两种显色体系：对二甲氨基苯甲醛-硫酸体系[1] 和香草醛-冰醋酸体系[2]。

有研究将柴胡样品经酸处理后用紫外分光光度法测定柴胡总皂苷[3]，柴胡中主要皂苷 a，d 分子结构中有 13，28 位醚键，对酸不稳定，酸性条件下醚键断裂形成有共轭体系的二烯体柴胡皂苷 b1，b2，在紫外光区产生明显吸收峰，从而可以在 252 nm最大吸收处测定，见Fig.1.1。由于柴胡中皂苷以 a，c，d 为主，而且均有不稳定的醚键结构，所以将这些皂苷在经酸水解后转化为二烯体皂苷进行紫外测定的方法，基本可以反映总皂苷的含量。

2.4

2.5 HPLC法测定柴胡皂苷活性成分和黄酮类活性成分

建立HPLC法同时测定柴胡和春柴胡中2个皂苷类活性成分(柴胡皂苷a和柴胡皂苷d)、4个黄酮类活性成分(芦丁、槲皮素、山柰素和异鼠李素)的含量。方法:采用Agilent Zorbax C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以0.1%磷酸水-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1 mL.min-1,检测波长203 nm(测定皂苷类成分)和360 nm(测定黄酮类成分),柱温35℃。结果:6个活性成分的峰面积与浓度的线性关系良好(r≥0.9994),线性范围宽;精密度试验的RSD为0.67%~1.9%;加样回收率为95.1%~104.3%。10批市售柴胡和春柴胡的黄酮类和皂苷类成分含量具显著差异:春柴胡中4个黄酮类成分平均含量约为柴胡中的7.5~72倍;春柴胡中柴胡皂苷a的平均含量为柴胡的1/10,而柴胡皂苷d的平均含量约为柴胡的3倍;柴胡与春柴胡中6个成分含量的相关系数为0.10~0.62。结论:本方法具良好的精密度、重复性和可靠性,可同时测定柴胡和春柴胡中皂苷类和黄酮类成分的含量并有效表征其差别。

2.5紫外-可见分光光度法、HPLC法测定样品中柴胡总皂苷及皂苷d的含量

作者:黄明泉

来源:《中西医结合心血管病电子杂志》2014年第04期

【摘要】目的:探讨柴胡中有效成分柴胡总皂苷和皂苷d的提取及含量测定方法,并对样品中成分进行含量测定。方法:以柴胡总皂苷与柴胡皂苷d为指标,分别采用紫外-可见分光光度法、HPLC法测定样品中柴胡总皂苷及皂苷d的含量。结果:经过测定,结果显示样品柴胡总皂苷含量均在65%以上,测定波长为536nm;皂苷d含量均在11%以上,最大吸收波长

为204nm。结论:本实验所建立的提取及含量测定方法,操作简便,精密度良好,回收率合格,测定结果准确,可较好地用于柴胡皂苷的质量控制。

【关键词】柴胡;皂苷;提取;含量测定

柴胡是临床常用中药,属和解剂,临床主要用于少阳证,即寒热往来,胸闷口苦等,具清热解表,和解少阳之功,有南北柴胡之分,前者为狭叶柴胡的干燥根,后者是伞形科植物柴胡的干燥根[1]。

有实验研究证明[2],柴胡根中的有效成分为柴胡皂苷,以及含有挥发油、植物甾醇等,

相关的实验证实柴胡皂苷具有解热、镇痛、消炎等作用。因此,提高柴胡制剂中柴胡有效成分的含量对提高临床疗效具有重大的指导意义。近年来,随着科技的进步,多数实验采用各种新方法进行柴胡皂苷的提取及测定,有文献报道柴胡皂苷的主要组成为皂苷a、d、b1、b2等[3],其中,前两者具有明显抗炎作用和降低血清胆固醇及甘油三酯的作用。故本文主要以柴

胡总皂苷与柴胡皂苷d为指标,进行柴胡皂苷的提取研究,并采用紫外-可见分光光度法及HPLC法对其含量进行测定,为提高柴胡制剂的有效成分含量及提高临床疗效打下科研基础。现将研究情况报告如下。

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以上为本篇毕业论文范文柴胡或含柴胡制剂中的主要成分检测方法概述(四)的介绍部分。

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