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黄连及其制剂中生物碱类化合物的HPLC
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毕业论文范文题目:
黄连及其制剂中生物碱类化合物的HPLC
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黄连及其制剂中生物碱类化合物的HPLC
黄连及其制剂中生物碱类化合物的HPLC毕业论文范文介绍开始:
一、黄连的简介…………………………………………………………………2
(一)黄连的基本信息…………………………………………………………2
(二)黄连的形态特征…………………………………………………………2
(三)黄连的分布情况…………………………………………………………2
二、黄连及其制剂中主要成分的药理性质和运用……………………………2
(一)黄连的主要成分…………………………………………………………2
(二)黄连中生物碱类成分的药理作用………………………………………2
三、黄连及其制剂中生物碱类成分的HPLC测定实例………………………2
(一)HPLC 同时测定清胃黄连丸中的4 种有效成分………………………2
(二)HPLC法测定黄连上清片中黄连素的含量………………………………3
(三)HPLC测定黄连中盐酸小檗碱含量………………………………………3
四、总结…………………………………………………………………………3
五、参考文献……………………………………………………………………4
黄连及其制剂中生物碱类化合物的HPLC测定方法概述
一、黄连的简介
(一)、黄连的基本信息
黄连,中药名,别名味连、川连、鸡爪连,属毛茛科、黄连属多年生草本植物,,具有清热燥湿,泻火解毒的功效。用于湿热痞满,呕吐吞酸,泻痢,黄疸,高热神昏,心火亢盛,心烦不寐,血热吐衄,目赤,牙痛,消渴,痈肿疔疮;外治湿疹,湿疮,耳道流脓[1]。
(二)、黄连的形态特征
根状茎黄色,常分枝,密生多数须根。叶有长柄;叶片稍带革质,卵状三角形,宽达10厘米,三全裂,中央全裂片卵状菱形,长3-8厘米,宽2-4厘米,顶端急尖,具长0.8-1.8厘米的细柄,3或5对羽状深裂,在下面分裂最深,深裂片彼此相距2-6毫米,边缘生具细刺尖的锐锯齿,侧全裂片具长1.5-5毫米的柄,斜卵形,比中央全裂片短,不等二深裂,两面的叶脉隆起,除表面沿脉被短柔毛外,其余无毛;叶柄长5-12厘米,无毛。
(三)、黄连的分布情况
分布于四川、贵州、湖南、湖北、陕西南部。生海拔500-2000米间的山地林中或山谷阴处,野生或栽培。模式标本采自四川城口。
二、黄连及其制剂中主要成分的药理性质和运用。
(一)黄连主要成分
黄连根茎含多种异喹啉类生物碱,以小檗碱含量最高,为5~8%,尚含黄连碱、甲基黄连碱、巴马亭、药根碱、表小檗碱及木兰花碱等;酸性成分有阿魏酸,氯原酸等。须根含小檗碱可达5%;黄连叶含小檗碱1.4%~2.9%。
(二)黄连中生物碱类成分的药理作用
1、黄连素在临床中一直作为非处方药用于治疗腹泻,但是现代药理学研究证实黄连素具有显著的抗心力衰竭、抗心律失常、降低胆固醇、抗制血管平滑肌增殖、改善胰岛素抵抗、抗血小板、抗炎等作用。
2、黄连素是一种重要的生物碱,是我国应用很久的中药。可从黄连、黄柏、三颗针等植物中提取。它具有显著的抑菌作用。常用的盐酸黄连素又叫盐酸小檗碱,黄连素能对抗病原微生物,对多种细菌如痢疾杆菌、结核杆菌、肺炎球菌、伤寒杆菌及白喉杆菌等都有抑制作用,其中对痢疾杆菌作用最强,常用来治疗细菌性胃肠炎、痢疾等消化道疾病[2]。
三、黄连及其制剂中主要成分的研究方法概述
(一)HPLC 同时测定清胃黄连丸中的4 种有效成分
1. 仪器与试剂:对照品储备液,供试品溶液,高效液相色谱仪、黄芩苷、小檗 碱 、巴 马汀、 和栀子苷、 5 批清胃黄连丸为市售品种; 甲醇、乙腈为色谱纯, 其他试剂均为分析纯。实验用水为超纯水。混合对照品储备液。色谱柱: 4. 6×150mm, 5Lm, 流速为1. 0mL/ min; 柱温为35℃; 进样量10LL
2. 实验方法:准确移取混合对照品储备液1. 0mL 至10mL 容量瓶中, 加入甲醇定容, 摇匀。采用逐级稀释法配制黄芩苷浓度,小檗碱浓度,巴马汀浓度,栀子苷浓度系列混合对照品溶液。在色谱条件下进样 10LL, 测定峰面积。以各对照品浓度为横坐标( x ) , 以峰面积为纵坐标 ( y ) 作线性回归[3]。
3.对其进行精密度实验,稳定性实验,重现性实验表明仪器的精密度和重复性良好,供试品溶液在 12h 内基本稳定。
4.样品的测定:取不同批号的清胃黄连丸, 研细, 取约 1. 5g, 以外标法计算清胃黄连丸中各成分的含量。
(二)HPLC法测定黄连上清片中黄连素的含量
1 仪器与试剂:高效液相色谱仪、天平、超声波清洗器、甲醇、乙酸、十二烷基硫酸钠(SDS)为分析纯。 色谱柱: 4. 6×150mm, 10um, 流动相: 乙腈-SDS-乙酸(65:35:1) 检测波长: 345nm, 流速为1. 0mL/ min; 柱温为35℃; 进样量: 10LL 。
2.实验方法:称取黄连素标准品1mg,置于10ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,得浓度为0.1mg/ml的标准溶液。用微量进样器分别吸取空白甲醇10ul和标准溶液梯度浓度进样分析,以黄连素标准进样量为横坐标,黄连素标准品峰面积为纵坐标,经统计学计算的回归方程Y=-27813.44+86395.72X,相关系数r=0.9993[4]。
3. 对其进行精密度实验,精密度良好。
4.样品测定:准确吸取10ul样品液进样分析,按照上述色谱条件测定黄连素的峰面积,用外标峰面积计算黄连上清片中黄连素的含量。
(三)HPLC测定黄连中盐酸小檗碱含量
1.仪器和试剂:对照品溶液,供试品溶液,高效液相色谱仪、二极管陈列检测器、超声波清洗器、甲醇、磷酸二氢钠、磷酸为分析纯。实验用水为超纯水。 色谱柱: 4. 6×150mm, 5um, 进样量: 8uL 。
2.实验方法:吸取对照品溶液梯度浓度,注入色谱仪测定,峰面积为纵坐标,对照品含量为横坐标,绘制标准曲线的回归方程Y=-13.1417+149.308X,r=0.9997[5]
3.对其进行精密度检测,重复性检测,稳定性实验,表明精密度,重复性良好,稳定性7小时内峰面积无明显变化。
四、讨论
本文案例中采用HPLC-V WD 检测器, 利用监测器波长切换的功能, 对清胃黄连丸中多类化合物进行同时测定,;采用HPLC测小檗碱含量,是用来耐酸性色谱柱和PH值较低的流动相测定,操作简单,结果准确稳定,重复性好,具有较好的推广价值。生物碱类是黄连的主要活性成分之一,在含有黄连的制剂中含量较高且种类复杂,近年来用高效液相色谱法对黄连中生物碱类的研究越来越多。相信该法会对含黄连制剂中生物碱类化合物分析研究提供技术支持。
五、参考文献
[1]国家药典委员会,中国人民共和国2010版药典一部[M].北京,化学工业出版社,2010.444
[2]吴敏,王阶,黄连有效成分小檗碱抗动脉粥样硬化机制研究进展[J],中国药理学通报,2003,11(4);289-291
[3]李宝红,吴君,邓妙丽等,HPLC同时测定清胃黄连丸中的4中有效成分,光谱实验室[J],2011年9月第28卷第5期
[4]王达妹,李雪宁,陈伟力,陈秋潮等,HPLC法测定黄连上清片中黄连素的含量,《中成药》[M] 1995年02期
[5]汪寒林,HPLC法测定黄连上清片中盐酸小劈碱的含量[J],安徽医药,2009年第9期;671-672
以上为本篇毕业论文范文
黄连及其制剂中生物碱类化合物的HPLC
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