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抗病毒药物的毒性及残留检测方法的研究进展(二)
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抗病毒药物的毒性及残留检测方法的研究进展(二)
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抗病毒药物的毒性及残留检测方法的研究进展(二)
抗病毒药物的毒性及残留检测方法的研究进展(二)毕业论文范文介绍开始:
抗病毒药物的毒性及残留检测方法的研究进展
1.1药理作用
病毒一般只能依存于寄主细胞内才可以进行繁殖,但是可是随着病毒增值,进一步的加深对宿主细胞的破坏。因此导致正常细胞代谢受到影响,致细胞凋亡。所以如此可以看出,抗病毒药物的作用机制不仅作用于病毒本身,同样作用于机体本身[5]。正常的细胞代谢,对于在整个生命过程当中每一个时期都可以。全方面的去来阻碍病毒的增生,其具体体现为直接灭杀病毒并且阻碍病毒吸附在机体细胞内,且阻碍病毒在细胞内产生化学作用,抑制病毒释放或对本身免疫细胞的免疫性能进行提高来加强机体的免疫能力等等。病毒的生命周期一般分为以下的五个时期:依附期、脱壳期、复制期、装配期和释放期。一般抗病毒药物都会根据这五个时期在任意一个时期去作用于病毒,都能够起到一个杀死病毒的一个作用。 药物作用于附着期 : 即通过药物的作用抑制病毒吸附进入细胞。这类药物主要是在此时期通过阻碍病毒向细胞内穿进或者是进入,一般这类药物的的一个具体表现就是:金刚烧类药物主要是利用阻碍病毒离子的通道,从而切断病毒的释放,以至于病毒的小颗粒无法通过细胞,切断了其在细胞中的扩散,因此就可以起到一个预防和医治的疗效[6]。药物作用于脱壳期 :即通过药物的作用抑制病毒向细胞脱壳,金刚烷类药物抗甲型流感病毒的作用系统从扩散,完成具备的预防与医治功能。药物作用于复制期:病毒的复制其实主要是因为当病毒进入到人体细胞,会在人体细胞内开展第一轮的复制增生,一般这类药物主要是起作用于在病毒的增值当中。对增值核酸的复制为一个中心来开展一系列的阻碍作用。如阿昔洛韦、碘苷、利巴韦林。药物作用于集成期和释放期:类似于干扰素,主要功能是加大增强机体免疫系统在防患中的力度,多利用与在较多类型的病毒性疾病在预防及医治。现目前在对于临床效果中使用的抗病毒药物来说,有将近大半的抗病毒药物都是都隶属于核苷类抗病毒药物,其的作用机制主要是形成聚合酶,然后通过模拟一种自然的核苷形态结构,介入酶活性中心位点上,打乱病毒的核酸复制链,使病毒无法进行复制的功效[7],并且在当下核苷类药物也是阻碍病毒的第一首选的药品,这类药品可以首先分别分成选择性核苷类和非选择性核苷以及核苷类似物。药物作用在病毒的集成释放,这类药物的机制是释放干扰素,去促使病毒侵入到宿主细胞的免疫上,通过调高干扰素产量,可以加强机体的免疫。并且这种药物是广泛的应用于更多种类的病毒性病症当中的去治疗,并且大多数是和其他药品进行一个联合辅助的治疗医治手段方式[8]。
2.抗病毒药物在疾病应用中的毒性残留
2.1慢性肝炎
孙丽娜研究时收集400例关于慢性肝炎的临床患者,满足国家医学上对于慢性肝炎的治疗标准一一共有200例临床患者是符合一个实验标准和符合排除标准的,并且将其分为阿德福韦脂组[9]。50例阿德福韦脂联合拉米夫定组50例,拉米夫定组50例,恩替卡韦组50例,在研究当中,患者首先需要确定的是其的身体情况以及合并症、肝脏疾病疗效情况,进行大量的临床的对照实验研究来进行对比阿德福韦酯和替诺福韦酯对肾功能情况一个影响和研究,因此在实验中,主要是经过对两类抗病毒药物治疗慢性乙肝病患者的肾功能情况来进行对两种抗病毒药物的具体研究[10]。其研究主要是分布在肾功能是否出现异常情况或者在临床治疗过程当中是否出现不良反应[11]。通过研究可以得知,在200例病例中有大约50例患者发生了肾功能的异常情况,
2.2艾滋病
韩丹以中国医学中对于艾滋病的一个判断标准为判断依据收集艾滋病患者,其中有大约900例艾滋病患者[13]。其中需要明确的是实验组患者年龄必须均在18周岁以上。所有实验者患者入选标准都需要依据国家免费艾滋病抗病毒治疗药物治疗手册里面的一个判定标准,所有的实验者患者都需要签署免费抗病毒治疗的知情同意书[14]。在900例患者中大约有90%的患者在使用抗病毒药物进行艾滋病医治时都出现过药品使用后的相关毒性反应[15]。不良反应具体表现为有15.14%的患者出现了的不良症状有11.4%的患者、出现了骨髓抑制的不良情况有5.05%的患者、出现了用药后全身乏力、疲倦的不良情况等等。并且在所有患者当中有出现时间较长的不良反应,5.62%的患者具有脂肪重新分布的不良情况,有6.88%的患者出现了外周神经炎的不良情况,并且有5.50%的患者出现了肝脏毒性的不良情况[16]。
3.抗病毒药物残留毒性的检测方法
3.1对抗病毒药品中百分量的测定
对于抗病毒药物进行早期的评测,一般多是利用在对于药物百分含量的一个检测。孙雷和李丹主要是采用了测试药品金刚烷氨的百分含量,同时利用了相关气相色谱检测器,对于有关的化学物质进行检测,并绘出质谱图,从而来保证其的结构形式。[17]目前气相色谱基本不用作对抗病毒药物毒性残留的检测方法。
赵庆华在药品的检测和分析中也时常用到液相色谱法。样品测定精密称取经 105℃干燥至恒重的利巴韦林对照品 5mg置100mL量瓶中,加水溶解并稀释至刻度制成 50μg· mL-1 的对照品溶液。[18] 取抗病毒药物口罩含药湿巾1个, 剪成小的碎片,置小烧杯中,加适量水浸泡并超声处理, 洗液定量转移至100mL量瓶中, 把碎湿巾用少量水洗涤3次,装湿巾的塑料袋用少量水洗涤,合并洗液亦转移至100mL量瓶中, 然后加水至刻度,摇匀,过滤,制成供试品溶液。分别取对照品溶液和供试品溶液各20μL注入液相色谱仪,记录色谱图;按外标法以峰面积计算利巴韦林的含量。3批样品测定结果分别 为 104.4%, 103.9%, 103.5%。
3.2液质联用技术
3.2.1对鸡肉、鸡肝类中抗病毒药物残留的检测
液相色谱法和质谱法的联用技术具备灵敏度高、选择性好、定性、定量准确、抗干扰能力强等众多的特点,所以对于机制复杂的动物性食物中抗病毒药物的残留检测方式一般都是采用液相色谱法和质谱法的联用技术[19]。目前已经利用液普法与质谱质谱法联用技术进行抗病毒药物残留毒性检测的食品有猪肉的、鸡肉等对于人体来说可食用的部位[20]。以及对蜂蜜,鱼虾等动物性食品,一般检测的药品都大部分是金刚烷药品,利巴韦林、吗啉胍以及其他的类似药物药品,这主要是因为抗病毒药物一般都具有氨基,是隶属于有机碱这一个大类的化学物质。一般其在酸性中容易溶于水,在碱性溶液中一般溶于有机溶剂,所以在样品处理前需要对此利用三氯乙酸,三氯乙酸加乙醇,纯甲醇等这类有机酸或者有机溶剂来对其采取一个提取的作用[21]。一般这类药品在进行提取时,提取液中的离子成分主要是以阳离子的存在方式形成,所以在对其提取液进行提取,一般都会使用混合型阳离子交换柱、强阳离子交换柱、亲水亲脂型离子交换柱,这一类的固体萃取柱来对其进行一个充分净化[22]。一般因为利巴伟林是具有较多的氨基和较多的醇羟基,其具有非常强的极性,所以一般寻常的固相萃取交换柱对提取液的净化效果并不理想。所以说利用甲苯酸型固相萃取柱是可以得到一个较为满意的提取净化效果。同样来说,因为这种药物的极性很强,在对其进行液相色谱分离时,需要采取亲水酸,氨水溶液作为一个流动色相,采取等浓度的的方式进行洗脱,从而达到一个分离的效果[23]。一般来说,对于动物性的食物,其机制都比较复杂,需要经过大量的提取,净化后,这种药品在质谱检测时仍是会出现一些比较强烈的基因抵制的效果,所以在确定用量时都需要采取基质匹配标准溶液,对其进行单点和多点的一个定量判断。使用内标法则会使其的定量检测更加的可靠标准。
需要取适量混合标准储备液,用50%甲醇水稀释成 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 5.0, 和 10.0 μg/L的标准混合液,内标金刚烷胺-d15(定量 AT、IM、GCV、FCV、PCV、ACY、AB、OP、OC)和金刚乙胺-d6 (定量 RT、MT)为 5μg/L。另取适量混合标准储备液,用纯水稀释成 2.0, 5.0,10.0,50.0, 和 100.0 μg/L的标准混合液,内标利巴韦林- 13C5(定量 RBV、MO、TCONH2)为 20 μg/L。本试验通过配制溶剂标工作曲线和基质标校正曲线,以目标物与内标的峰面积比为纵坐标,质量浓度为横坐标 绘制标准曲线,以基质标校正曲线与溶剂标工作曲线的斜率来考察基质效应。对空白样品进行标 准添加试验来考察方法的准确度和精密度。方法的检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别以3倍和10倍信噪比(S/N)对应化合物的质量浓度来计算。对实际样品进行检测,鸡肉样品中金刚烷胺、咪喹莫特、更昔洛韦有检出。
3.2.2对鸡蛋中抗病毒药物残留的检测
一般来说,对于提取液的样品来进行净化的方法是需要提高和优化的,一般魏艳红创建14种抗流感病毒,以及对一些部分的代谢产物做液相色谱质[24]。液相色谱与质谱法的联合分析方法在实验中魏艳红采用百分之一的乙酸乙腈水与乙醇水对禽类食物鸡蛋中,药品进行提炼和分离的效果一般,可以发现用1%的乙酸乙腈水进行对提取液的提取效果更加优秀,并且实验中还需要去考量再利用[25]。正已烷除脂对于提取液的回收概率的一个影响程度。实验结果表明,对于实验结果的影响并没有十分的明显[26]。所以在实验中,依旧选用1%的乙酸乙腈水对采用了抗病毒药物药品残留的检测——液相色谱与质谱法联用技术检测提取液进行提纯,发现吸附剂的优化和提高可以加强对鸡蛋样品提纯的效果,对样品进行一个回收试验时,可以发现14种抗病毒药物在鸡蛋中的回收率一般的概率在68.4%~106.5%之间[27]。并且对于不同地区的鸡蛋样品进行抗病毒药品的毒性检测,都在其中检出残留毒性,例如金刚烷胺等药品[28]。
4.小结
可以发现对于抗病毒药品的理化性质,毒性以及其残留毒性的检测方法的研究[29]。近年来都在进一步的加深,这些研究可以促使人们对于平常生活中比较常见的抗病毒药物,其临床医效、不良因素和危险因素都有比较全方位的认知和了解,也可以加强管理局方面对于动物性食品中抗病毒药品的残留毒性进一步的加深监控。可以为人们的身体健康以及食品安全做出一定的技术贡献[30]。
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