肠上皮化生跟胃癌中CDX2基因启动子甲基化状况及其意思的实验研究

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肠上皮化生跟胃癌中CDX2基因启动子甲基化状况及其意思的实验研究

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毕业论文范文题目：肠上皮化生跟胃癌中CDX2基因启动子甲基化状况及其意思的实验研究，论文范文关键词：肠上皮化生跟胃癌中CDX2基因启动子甲基化状况及其意思的实验研究
肠上皮化生跟胃癌中CDX2基因启动子甲基化状况及其意思的实验研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：背景及目标胃癌是指来源于胃粘膜上皮跟腺上皮的恶性肿瘤,在胃的恶性肿瘤中胃癌约占95%。胃癌是人类常见的恶性肿瘤,在所有恶性肿瘤的发病率中占第二位,是重大迫害人类生命健康的恶性疾病之一。同其余肿瘤一样,胃癌的产生是一个多因素、多步骤的复杂过程,是多种改变在细胞内累积,从量变到量变的过程。Correa总结了胃癌风行病病因学的研究成果,提出人肠型胃癌的产生模式:畸形胃粘膜-慢性浅表性胃炎-慢性萎缩性胃炎-肠上皮化生-异型增生-早期癌-进展期癌。胃粘膜肠上皮化生(又称肠化生)是指胃粘膜上皮及腺上皮在病理情况下改变为肠粘膜上皮及腺上皮。胃粘膜肠上皮化生是胃癌产生过程中重要的步骤。胃粘膜肠上皮化生向胃癌进展的过程与多种基因有关。尾型同源异形盒基因CDX2(caudaltypehomeoboxgene2)属于同源盒基因(homeoboxgenes,Hoxgenes)家族中一员,最早是由Mlodzik于果蝇中分别成功,它是肠道特异性转录因子,在胚胎发育中其表白产物广泛存在于胚胎消化道腺上皮中,对后部体节跟消化道的构成、发育跟成熟起重要作用,在出生后,畸形情况下在胃粘膜上皮中不表白,广泛表白于小肠及结肠粘膜,对肠上皮的分化以及状况跟功能的保持也存在决定性的意思。有研究显示CDX2在慢性萎缩性胃炎相干的肠上皮化生中高表白并在部分胃癌中表白,表明其有可能与胃粘膜向肠上皮转化及胃粘膜癌变产生有关。古代分子生物学认为,遗传学跟表观遗传学独特调控生物信息的表白,遗传信息提供了“出产”所必须蛋白质的“底本”,而表观遗传学则唆使细胞怎么、何时跟何地表白这些信息。表观遗传学是指在不（本文此处忽略..）影响基因序列的情况下由DNA的甲基化/去甲基化及组蛋白的乙酰化/去乙酰化不同状况引起基因的表白改变。DNA甲基化指由DNA甲基转移酶(DNAmethyltransferases,DNMTs)介导,在CpG二核苷酸胞嘧啶5位碳原子上参加一甲基基团,使之变成5-甲基胞嘧啶(5-mC)的化学反应,生物学功能重要表示为在序列不变的情况下,把持基因表白,保护染色体的完全性跟调节重组及某些特定基因组区域的转录活性。与渐变等遗传学基因异样不同的是,抑癌基因的高甲基化状况是可逆的,利用甲基转移酶克制剂将处于甲基化状况的基因进行去甲基化激活,可能恢复某些关键性抑癌基因的功能而起到防备跟医治肿瘤的作用,为咱们进一步研究去甲基化试剂抗肿瘤提供了很好的根据,所以抑癌基因的甲基化研究不仅对恶性肿瘤的病因、早期诊断及预后评估有很大价值,而且对肿瘤的基因医治研究有着不可调换的作用。目前,有关CDX2在胃癌、大肠癌、食管癌等肿瘤中的异样甲基化也有报道,并揣测其与肿瘤的医治、预后有关。但目前对胃粘膜肠上皮化生中的CDX2基因CpG岛甲基化状况的研究较少。本研究通过检测CDX2基因在不同亚型肠上皮化生跟胃癌中的表白跟甲基化状况,及其与临床特点的关联,初步探讨了CDX2在肠上皮化生向胃癌改变过程中的作用及机制。内容包含:1.CDX2在肠上皮化生跟胃癌中的蛋白表白;2.CDX2在肠上皮化生跟胃癌中的启动子甲基化状况;3.5-aza-CdR对人胃癌细胞KATO-Ⅲ跟AGS中CDX2mRNA表白跟启动子甲基化状况的影响。材料跟方法(一)材料1.2008年3月至2008年7月期间于南方病院消化内镜核心因上腹部不适、早饱、嗳气等症状（略..）行胃镜检查并病理诊断肠上皮化生患者53例,其中男37例,女16例,年纪35-74岁,均匀57岁。另取18例无主观症状且病理检查打消IM及胃癌的健康检查者胃粘膜。每例均于距幽门口1-2cm处活组织检查。胃癌组织来自于同时代南方病院手术切除组织。所有标本均于离体后20min内获取,一部分制造蜡块,另一部分液氮速冻,而后放置于-80℃保存。所有患者均无己知重大的心脏、肝肾功能不全以及精力病史,胃癌患者手术前未接收化疗或喷射医治。所有患者均知情批准。2.人胃癌细胞株KATO-Ⅲ跟AGS,来自于ATCC。(二)方法1.应用高铁二铵-爱先蓝-过碘酸雪夫反应(HID-AB-PAS)将肠上皮化生分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型,按照Lauren's分型将胃癌分为肠型跟弥漫型;2.应用免疫组织化学方法检测组织中CDX2蛋白表白情况;3.采取甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测组织中CDX2启动子甲基化状况。4.RT-PCR跟MSP分辨检测5-aza-CdR处理前后两种胃癌细胞中CDX2mRNA表白跟启动子甲基化状况。(三)统计学分析实验数据采取SPSS13.0软件包的x~2测验跟方差分析等测验方法进行统计学分析。成果(一)基本情况:畸形胃粘膜18例,肠上皮化生53例,包含Ⅰ型22例,Ⅱ型18例,Ⅲ型13例。胃癌36例,包含肠型胃癌21例,弥漫型胃癌15例。(二)CDX2的表白情况1.CDX2在畸形胃粘膜中不表白。不同亚型肠上皮化生中CDX2表白阳性率(分辨为Ⅰ型95.5%,Ⅱ型83.3%,Ⅲ型61.5%)有明显差别(P=0.036),呈逐步降落趋势。胃癌中CDX2的阳性表白率(52.8%)明显低于肠上皮化生(83.0%)(P=0.002),且与胃癌的组织学类型有关,肠型胃癌中CDX2阳性表白率(71.4%)明显高于弥漫型胃癌(26.7%)(P=0.008)。2.肠上皮化生跟胃癌病例中CDX2表白均重要（文章此处忽略..）集中于H.pylori感染阴性者,肠上皮化生中两者列接洽数C=0.267,P=0.067,胃癌组织中两者列接洽数为C=0.121,P=0.463,H.pylori感染对CDX2表白无影响。3.胃癌中CDX2表白与年纪、性别无关;无淋巴结转移组CDX2阳性表白率(100.0%)明显高于淋巴结转移组(43.3%)(列接洽数C=0.390,P=0.020),但两者关联不密切;CDX2与浸润深度的列接洽数C=0.317,P=0.106,提示肿瘤浸润深度与CDX2表白不相干。(三)CDX2启动子甲基化状况1.畸形胃粘膜全部表示出CDX2启动子甲基化,肠上皮化生中CDX2启动子甲基化率为43.4%,(其中Ⅰ型22.7%,Ⅱ型55.6%,Ⅲ型61.5%),明显低于胃癌中CDX2启动子甲基化率(69.4%)(P=0.016),不同亚型肠上皮化生中CDX2启动子甲基化率也有明显性差别(P=0.036)。CDX2启动子甲基化率在肠型胃癌中(66.7%,14/21)低于弥漫型(73.3%,11/15),但两者无统计学差别(P＞0.05)。2.胃癌中无淋巴结转移组CDX2启动子甲基化率(50.0%)低于淋巴结转移组(73.3%)(列接洽数C=0.185,P=0.343),但差别无统计学意思;CDX2启动子甲基化状况与浸润深度的列接洽数C=0.323,P=0.041,提示肿瘤浸润深度与CDX2启动子甲基化状况有关,且浸润越深,甲基化率越高,两者的关联不密切。3.肠上皮化生中CDX2启动子甲基化病例中CDX2表白阳性率(36.4%)明显低于非甲基化病例(列接洽数C=0.299,P=0.031),胃癌中CDX2启动子甲基化病例中CDX2表白阳性率(47.4%)亦明显低于非甲基化病例(94.1%)(列接洽数C=0.452,P=0.002),CDX2启动子甲基化可导致CDX2表白减少。(四)未经5-aza-CdR去甲基化处理的胃癌细胞AGS内发明CDX2mRNA的表白,启动子为非甲基化;而KATO-Ⅲ细胞内未发明CDX2mRNA的表白,启动子为甲基化。经过5-aza（文章此处忽略..）-CdR药物行去甲基化处理后KATO-Ⅲ细胞内CDX2mRNA得到从新表白,启动子则改变为非甲基化。论断(一)CDX2在肠上皮化生向胃癌的转化过程中呈逐步降落趋势,可能起着克制癌基因作用;(二)CDX2启动子甲基化是导致CDX2表白缺失的重要机制,表观遗传学机制是胃癌产生的重要分子机制。(三)5-aza-CdR能通过使CDX2启动子去甲基化而使胃癌细胞KATO-Ⅲ中CDX2mRNA再次表白,CDX2基因启动子甲基化是使该基因失活的重要起因,去甲基化后该基因得到从新表白。通过药物或其余手段对CDX2基因甲基化状况进行调控达到对胃癌产生的克制造用,从而有望在胃癌临床医治上提供新思路。

以上为本篇毕业论文范文肠上皮化生跟胃癌中CDX2基因启动子甲基化状况及其意思的实验研究的介绍部分。

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