FOXP3彼此作用新分子-C22orf37的克隆表白纯化及其抗体系备

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FOXP3彼此作用新分子-C22orf37的克隆表白纯化及其抗体系备

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毕业论文范文题目：FOXP3彼此作用新分子-C22orf37的克隆表白纯化及其抗体系备，论文范文关键词：FOXP3彼此作用新分子-C22orf37的克隆表白纯化及其抗体系备
FOXP3彼此作用新分子-C22orf37的克隆表白纯化及其抗体系备毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：调节性T细胞(regulatoryTcells,Treg)在免疫应答的负调节及本身免疫耐受中发挥着非常重要的作用,其与机体的免疫体系的自稳状况、本身免疫性疾病、移动物免疫排斥反应及肿瘤的产生有极其密切的接洽。畸形情况下.免疫体系在对病原体产生保护性免疫应答的同时,亦能避免产生针对本身抗原的病感性反应,这一景象的机制受到学者的广泛关注。中枢耐受机制不足以完全清除本身反应性T细胞。外周耐受机制,包含T细胞凋亡、免疫无能、效应T细胞分化跟调节性T细胞(regulatoryTcell,Tr),在防备免疫病理反应中发挥侧重要作用。其中,调节性T细胞的作用尤为重要。调节性T细胞重要功能是克制其余T细胞的活化,可能禁止针对本身抗原的炎症反应。（略..）并可能限度本身免疫病的发展。目前发明转录因子FOXP3对调节性T细胞的分化起到重要的作用,近年的研究显示,forkhead家族转录因子FOXP3(forkhead/winged2helixtranscriptionfactor),特异表白于该细胞,可作为Treg的特异分子标记物,对该细胞的发育跟功能起侧重要调控作用。FOXP3(theforkheadorwingedhelixtranscription)是叉头样转录因子家族的成员。2001年,Bnmkow等对Scurfy小鼠(小鼠FOXP3基因编码的蛋白质也称为Scurfy)研究时首次报道FOXP3。同年,Wildin跟Bennett提出人类FOXP3基因与Scurfy小鼠FOXP3基因存在同源性。FOXP（文章此处忽略..）3的缺乏将导致致命的本身免疫性淋巴细胞增生性疾病的产生,且异位FOXP3的表白能使效应T细胞产生表型转化,变为Treg细胞。因此,Foxp3在免疫体系的负调节中发挥非常重要的作用。Foxp3的两个亚型(Foxp3FL跟Foxp3△2)在人CD4+CD25+Treg中均表白,并且它们都存在赋予CD4+CD25-T细胞转化为CD4+CD25+Treg的活性,然而目前对于Foxp3的作用机制尚未阐明。鉴于绝大多数分子在细胞内履行功能都是通过蛋白与蛋白之间的彼此作用来实现,因此彼此作用分子的研究为其机制的阐明提供了线索。目前已知的Foxp3彼此作用分子有NFAT、NF-κB、AML1/Runx1、AP-1、RORγt跟TIP60,对这些分子的研究已经引起了广泛的关注,然而仅仅缭（本文此处忽略..）绕对这些分子的研究并不能充分辩明Foxp3的转录调控机制,所以对未知的Foxp3彼此作用分子的进一步探讨是Foxp3转录调控研究的热点。咱们前期通过酵母双杂交技巧以FOXP3为钓饵,筛选了人外周血白细胞cDNA文库中与之彼此作用的分子,其中C22orf37是咱们获得的能与其产生物理彼此作用的分子之一,经Genbank检索及生物信息学软件分析,该基因为功能未知的新基因。对新基因功能研究而言,抗体的制备是其功能研究的重要必备因素。因此本课题首先利用PCR方法从人外周血白细胞cDNA文库中获得人C22orf37基因,构建人C22orf37融合表白载体,随后引诱表白His-C22orf37融合表白蛋白并对表白产物进行SDS-PAGE电泳分析跟WesternBlot鉴定（略..）,成果显示,此分子在原核载体中有表白,而后利用镍螯合层析法纯化重组融合蛋白,并对纯化产物进行纯度分析,纯度达80%,最后用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠。通过ELISA检测了血清中抗C22orf37抗体的效价。获得了抗体效假高达1∶10000。综上所述,本实验成功构建了人C22orf37的融合蛋白原核表白载体并实现了人C22orf37融合蛋白的表白与纯化;制备了该蛋白的多克隆抗体;检测了C22orf37蛋白在不同来源的细胞株中的表白情况。为下一步体系研究该蛋白的生物学功能奠定了基本。

以上为本篇毕业论文范文FOXP3彼此作用新分子-C22orf37的克隆表白纯化及其抗体系备的介绍部分。

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