个别变形杆菌TWN-3株基因文库构建及免疫印迹筛选

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个别变形杆菌TWN-3株基因文库构建及免疫印迹筛选

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毕业论文范文题目：个别变形杆菌TWN-3株基因文库构建及免疫印迹筛选，论文范文关键词：个别变形杆菌TWN-3株基因文库构建及免疫印迹筛选
个别变形杆菌TWN-3株基因文库构建及免疫印迹筛选毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：长期以来，对水产疫病的把持重要依附利用各种抗生素跟化学药物，但大量利用药物产生的药物残留问题与对食品品德与保险日益严格的请求这对抵触越发凸起。近年来，我国水产品因为药物残留超标而多次出口碰壁就是惨痛的教训。不仅造成了宏大的经济丧失，而且重大打击了养殖户的出产踊跃性，影响水产养殖业进一步发展。1991年，Hansen等首先报道了外源基因可能在鲤鱼肌肉组织中表白。1996年，Anderson等第一次报告了带有感染性造血组织坏逝世症病毒(Infe（本文此处忽略..）ctioushaematopoieticnecrosisvirus，IHNV)糖蛋白基因的质粒可能在虹鳟中表白，并且可能保护IHNV病毒对受免疫鱼的感染。随后的一些实验也证明，在多种鱼体内，外源基因不仅可能高效，长久地表白，而且可能引起宿主鱼类对外源蛋白的免疫应答。这些为构建鱼类DNA疫苗提供了实际基本。同时对鱼病防治指出了一个新的道路。通过有打算的对养殖鱼类的重要疾病进行疫苗接种可能大大减少抗生素等化学药物在养殖鱼类上的利（本文此处忽略..）用量。进步水产品品德跟食用保险性，促进我国水产品出口创汇。个别变形杆菌(Proteus.vulgaris)广泛存在于天然界，是一种前提致病菌。由该菌引发的人类疾病国内有较多报道，此类菌对虾、蟹、赤点石斑鱼、鳄鱼等水生生物均存在感染性甚至致逝世，其中不少品种是水产经济动物。本实验室成功从大口鲇病鱼体内分别出个别变形杆菌TWN-3株，经研究发明其pH跟盐的耐受度强，在合适成长温度范畴内成长非常敏捷，因此非常轻易造成暴发性疾病，对水产（略..）养殖出产是一种潜在的威胁。同时研究还发明，该菌株对很多抗生素都不敏感，因此一旦发病，目前的惯例鱼病防治手段难以获得明显的后果。尝试用DNA疫苗的方法对其进行防备不失为一个有利的尝试。成功构建DNA疫苗的必须获得相应抗原的重要保护性抗原基因。本研究用带有个别变形杆菌TWN-3株总DNA片段的重组pUC18质粒转化大肠杆菌BL21感触态细胞，构建个别变形杆菌TWN-3株DNA文库，获得了3.6×10~3个带有插入片段的重组子。根据Clarke-Ca（略..）rbon公式，该文库对个别变形杆菌TWN-3株所有基因的覆盖率在99％以上。而后用雄性新西兰大白兔制备个别变形杆菌TWN-3株的多克隆抗血清，采取免疫印迹筛选技巧对组成文库的所有重组子进行初筛并对初筛呈阳性反应的重组子进行3次复筛，以打消假阳性的烦扰，终极获得了8个牢固呈抗原阳性反应的重组子，为获得个别变形杆菌重要保护性抗原基因及DNA疫苗的研究奠定基本跟提供根据。

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