兔声带成纤维细胞的体外培养、示踪与声带瘢痕的研究

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兔声带成纤维细胞的体外培养、示踪与声带瘢痕的研究

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毕业论文范文题目：兔声带成纤维细胞的体外培养、示踪与声带瘢痕的研究，论文范文关键词：兔声带成纤维细胞的体外培养、示踪与声带瘢痕的研究
兔声带成纤维细胞的体外培养、示踪与声带瘢痕的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：畸形声带组织因外伤或疾病伤害后所构成的纤维组织调换产物构成了声带瘢痕。因为瘢痕组织使声带变得坚挺,影响了声带固有层的粘弹性(viscoelasticstrength),改变了声带的生物力学特点,从而减弱声带振动黏膜波的产生而影响发声。目前,尚未找到一种幻想的防备跟医治声带瘢痕的方法。近年来,组织工程学技巧在组织器官重建方面获得了令人凝视标进展,其重要原理是以少量种子细胞经体外扩增后与生物质料、细胞因子结合,修复较大的组织或器官缺损,重建组织器官的生理功能,终极达到完美的状况甚至功能修复的目标。将组织工程学的技巧方法利用于喉科,有望在将来实现声（此处忽略..）带,甚至喉的再生。人类的声带组织是一个高度分化的分层构造,从组织学构造上可分上皮层、固有层跟肌肉层(甲杓肌)。声带固有层又分为固有浅层(Reinke's层),固有中层跟固有深层。这种分层在描述声带构造功能方面存在重要意思。固有层是声带最重要的特点性构造,重要包含细胞及细胞外基质成分。组成固有层的细胞为数较少,重要细胞有：成纤维细胞,肌成纤维细胞跟巨噬细胞。成纤维细胞是保持固有层构造与功能的重要细胞,重要分布在固有层深层,其调控细胞间质的沉着、降解及从新分布；细胞外基质成分包含纤维蛋白跟缝隙蛋白。本研究第一部分咱们首先制造了兔声带瘢痕模型,并对声带（略..）瘢痕进行初步研究。在支撑喉镜下,用喉钳夹取双侧声带前中部组织(未达肌层),未手术者作为畸形对比,1个月后处死动物,播种声带组织,采取Masson三色染色察看声带胶原,采取经过透明质酸酶处理的Alcianblue染色察看透明质酸。利用Image-ProPlus6.0软件进行对切片染色进行半定量分析,实验成果表明瘢痕声带的胶原成明显显增多,透明质酸含量无明显改变。本研究中,咱们对声带固有层的组织工程学再生进行了初步摸索。组织工程学的三个因素是种子细胞,支架材料,跟细胞因子。本研究第二部分首进步行了种子细胞-兔声带成纤维细胞(vocalfoldfibrob（文章此处忽略..）lasts,VFFs)的体外培养。取兔声带组织,消化法获取成纤维细胞,用含有胎牛血清的高糖DMEM培养基体外培养,摸索出最佳培养前提。在倒置相差显微镜下察看细胞的状况及成长状况,并经过传代使细胞纯化。利用免疫组化方法,检测成纤维细胞的特异性蛋白Vimentin,成果Vimentin阳性率90%以上,证明所培养的细胞为成纤维细胞,且阳性率较高。本研究第三部分察看培养的细胞在异体生物体内相容性及成长情况。咱们对培养的细胞进行Ad-EGFP标记。取新西兰兔6只,随机选取2只兔作为无干涉组,4只新西兰兔做双侧声带急性伤害模型,左侧声带伤害部位打针104个／ml浓度的（此处忽略..）Ad-EGFP标记的细胞混悬液,向右侧声带伤害部位注入生理盐水1ml作为对比。声带打针细胞后,兔成长情况良好,均未产生感染、喉水肿,免疫排斥等反应。15天后播种声带组织,荧光显微镜下察看未发明成活的VFFs。阐明单纯VFFs打针到异体组织很难存活,为其在动物体内成长提供成长支架可能会利于成长。总之,本研究对声带组织工程学进行了初步摸索,制备了种子细胞,摸索了种子细胞体内相容性,制备了声带瘢痕动物模型,在后续的研究中,咱们将构建细胞-支架材料复合物,移植入声带瘢痕模型,察看声带再生修复情况。

以上为本篇毕业论文范文兔声带成纤维细胞的体外培养、示踪与声带瘢痕的研究的介绍部分。

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