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重组猪蛔虫抗菌肽Cecropin P1在毕赤酵母中的表白及抑菌活性的研

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毕业论文范文题目:重组猪蛔虫抗菌肽Cecropin P1在毕赤酵母中的表白及抑菌活性的研,论文范文关键词:重组猪蛔虫抗菌肽Cecropin P1在毕赤酵母中的表白及抑菌活性的研
重组猪蛔虫抗菌肽Cecropin P1在毕赤酵母中的表白及抑菌活性的研毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:抗菌剂在我国畜牧业出产中仍然作为重要的饲料增加成分而被广泛利用。这是因为在我国现有粗放化畜牧业出产前提下,因为饲料本身、水源跟环境等方面的因素,很难避免外界病原微生物通过各种道路侵入动物体内。所认为使动物健康的成长,在目前我国养殖业豢养前提下,在饲料中增加抗菌制剂来防备动物疾病的产生是必要的。然而在饲料中增加什么样的抗菌制剂,增加剂量多少,这不仅关联到动物的健康问题,更重要的是关联到畜禽产品的品质跟生物保险性问题,也关联到天然界生态均衡的环境问题。所以动物饲料抗菌增加剂与其它促成长增加剂一样受到广大畜牧工作者跟畜禽产品广大花费者的关注。有鉴于此,研制“无毒,无残留,无耐药性”的新一代抗(文章此处忽略..)菌制剂是当前的发展趋势跟请求。抗菌肽(AntimicrobialPeptide)是生物体免疫防守体系产生的一类对抗外源性病原体致病作用的防备性多肽活性物质,是生物体先天免疫的重要组成成分。因为其独特的抗菌机制,不会诱发细菌的耐药性,成为存在宏大发展潜力的新型抗菌药物。目前抗菌肽的制备重要有生物质料提取、化学合成跟基因工程表白三种方法。因为天然材料中动物内源性抗菌肽的含量极其有限,不可能从动物脏器(如小肠)获得大量抗菌肽增加到饲料中;而化学合成法价格昂贵,不可能大范围出产;基因工程方法令是目前大量表白抗菌肽使其成为新一代肽类抗菌药物更为事实的道路,显示出其广阔的前景。近些年,我国畜牧科技工作者非(此处忽略..)常器重动物抗菌肽的研究跟开发,在抗菌肽的药效跟抗菌肽的范围化出产方面进行了多方面的研究,如对昆虫(家蝇、蚕、蚯蚓等)跟某些哺乳动物的抗菌肽进行了开发研究。实验表明蚕抗菌肽AD能克制多种畜禽病病原,如猪水肿病毒、猪沙门氏菌、鸡大肠杆菌、鸭大肠杆菌跟流产杆菌等。在断奶仔猪饲料中增加β-defensin-2可明显减轻断奶仔猪的腹泻。人们还发明猪小肠抗菌肽(混淆物)对多种致病菌有不同程度的克制造用,杀菌率达到60%-98%。目前在国内作为增加剂出产利用的抗菌肽重要是蚕抗菌肽AD-酵母制剂、家蝇抗菌肽制剂,并在畜牧养殖业出产中获得了必定的抑菌后果。然而利用异种动物抗菌肽作为畜禽抗菌饲料增加剂存在必定的弊病,因为高等动(略..)物的抗菌肽存在物种“种”的专一性。因此本文以哺乳动物抗菌肽为研究对象,从猪肠道蛔虫中扩增天然的抗菌肽CecropinP1基因,利用毕赤酵母表体系实现其在体外的分泌表白。本实验根据已发表的基因编码序列设计引物,采取RT-PCR方法从猪肠道蛔虫中扩增出CecropinP1基因,并将其插入到酵母分泌型表白载体pPIC9K中α-因子信号肽下游的SnaBⅠ跟NotⅠ位点之间,构建成CecropinP1基因的酵母分泌型表白载体pPIC9K/CecropinP1。载体经SalⅠ酶切线性化,通过电转移方法将线性化的pPIC9K/CecropinP1质粒转化到组氨酸缺点型的酵母宿主菌GS115中。而后利用以葡萄糖为碳源的培养(略..)基(MD)跟以甲醇为碳源的培养基(MM)筛选出组氨酸His+型跟甲醇利用正型(Mut+)酵母重组体,再经G418加压筛选得到高拷贝CecropinP1重组酵母。经PCR检测证明CecropinP1基因已整合到毕赤酵母的染色体中。重组酵母经摇瓶发酵培养跟甲醇引诱,通过Tricine-SDS-PAGE检测,重组酵母可能分泌表白重组CecropinP1,同时表白的CecropinP1对大肠杆菌跟金黄色葡萄球菌均有必定的抑菌后果。综上所述,通过本研究,终极获得重组酵母工程菌,为CecropinP1基因工程新制剂的出产跟利用奠定了基本。


以上为本篇毕业论文范文重组猪蛔虫抗菌肽Cecropin P1在毕赤酵母中的表白及抑菌活性的研的介绍部分。
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