胸膜肺炎放线杆菌内生质粒和温敏复制型质粒的研究

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胸膜肺炎放线杆菌内生质粒和温敏复制型质粒的研究

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毕业论文范文题目：胸膜肺炎放线杆菌内生质粒和温敏复制型质粒的研究，论文范文关键词：胸膜肺炎放线杆菌内生质粒和温敏复制型质粒的研究
胸膜肺炎放线杆菌内生质粒和温敏复制型质粒的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacilluspleuropneumoniae,APP)是巴氏杆菌科中重要的病原菌,它引起猪的一种高度接触性传染呼吸道疾病—猪传染性胸膜肺炎(porcinecontagiouspleuropneumonia,PCP)。该病分布广泛,难以根除,给世界养猪业造成了巨大的经济损失。因此,预防和控制该疾病尤其重要。然而APP血清型众多(目前已经发现有15种血清型),并且不同血清型之间的交叉保护力较低,对该病的预防（略..）控制和治疗带来了极大的困难。而且许多国家用大量不同的抗生素来预防和治疗猪传染性胸膜肺炎,致使许多病原菌(包括APP)产生了极强的抗药性,这对该病的预防和治疗更是雪上加霜。现阶段,为了解决APP的预防和治疗问题,需要对APP的毒力因子、毒力相关因子以及膜蛋白和鞭毛等进行分子生物学研究。但研究这些基因和相关因子的前提是要具备相应的遗传操作工具,如穿梭载体,高效的突变体构建平台等,为技术支持。本文主要对APP的遗传操作工具的研究,（略..）包括以下两个方面内容:1.胸膜肺炎放线杆菌内生质粒pHB0503分析质粒pHB0503分离于2005年的胸膜肺炎放线杆菌地方分离菌株HB0503。大小为15.079kb,含有16个ORF,其中7个是抗性基因(sul2,catA3,aacC2,strA,strB',blaROB-1和aph(3)-I)。对这些抗性基因簇序列的生物信息分析,来研究该抗生素簇的进化和结构组成。实验数据分析表明该质粒可能在来源不同的质粒间,发生了同源重组而形成的。另外,RT-PCR实验证明:两处抗性基因簇的共转录（略..）,分别从sul2和bla_(ROB-1)启动子开始地。对该质粒的复制蛋白的分析,有可能在此基础上构建在APP中能稳定复制地穿梭载体和遗传操作系统,为进一步从分子生物学水平研究胸膜肺炎放线杆菌提供技术支持。而且对内生质粒抗性基因的研究,对临床抗生素的使用也有指导意义。2.胸膜肺炎放线杆菌温敏复制型质粒的构建PCR定向突变系统是新型的高效遗传操作体系,已经广泛应用于微生物学研究。构建该系统至少需要重组酶系统、抗性基因PCR模版、诱导型（略..）启动子、温敏复制型质粒等四大要件。本实验室已经拥有前三大要件,缺乏APP的温敏复制型质粒。为了构建一个APP的温敏复制型质粒,本研究以APP-E.coli穿梭质粒pJN105和pR318为出发质粒,采用低保真度PCR基因扩增和修复系统缺陷型E.coli感受态细胞基因克隆两种途径筛选温敏复制元件,为构建温敏复制载体奠定基础。

以上为本篇毕业论文范文胸膜肺炎放线杆菌内生质粒和温敏复制型质粒的研究的介绍部分。

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