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异种关节软骨与MSCs体外独特培养的实验研究

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毕业论文范文题目:异种关节软骨与MSCs体外独特培养的实验研究,论文范文关键词:异种关节软骨与MSCs体外独特培养的实验研究
异种关节软骨与MSCs体外独特培养的实验研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:背景:小儿骨科临床工作中,因为某些先本性起因造成的组织器官不同程度的缺损跟畸形,医治这类疾病最大的艰苦就是缺乏合适的移动物,特别是新生儿可能用于自体移植的组织更长短常有限,所以个别认为自体移植在新生儿期并不实用。假如用假肢代替自体移动物又轻易导致感染,况且儿童处在成长发育的关键时刻,假肢并不能伴随身材主动成长,所以其利用也受到了很大限度。细胞生物学跟生物质料技巧的进步促进了利用组织工程技巧修复关节软骨缺损技巧的发展,软骨细胞跟干细胞都被证明可能用来重建受损的关节软骨。近来有人提出在围生期进行手术的假想,医生假如诊断出胎儿有先本性的组织缺损可能于围生期进行经母体的胎儿手术,取出胎儿组织细胞在体外进行培养,细胞伴随胎儿的成长也在始终成(略..)长分化,那么在胎儿出生后的新生儿期就可能利用体外培养的组织为患儿进行自体移植手术。然而此类医治方法最大的艰苦仍然是缺乏细胞来源问题。细胞可能单独或结合生物质料利用于修复软骨缺损。已经成功的利用扩增培养的自体软骨细胞,扩增软骨细胞构成的类似软骨组织跟生物质料技巧通过体内移植的方法修复受损的关节软骨。然而研究成果表明这种方法并不是很幻想,一是因为供体组织跟供体部位病变的限度,二是无奈获得所须要的大量的软骨细胞。三是在体外培养时软骨细胞会向成纤维细胞分化。另一方面,来自于骨髓的间充质干细胞已被证明可能在不同的引诱方法下向软骨细胞,成骨细胞跟脂肪细胞方向分化。因此,间充质干细胞将会成为组织工程学中非常有用的细胞来源。在体外实验中,高浓度间(文章此处忽略..)充质干细胞在已知成分培养基中可能被引诱向软骨细胞方向分化。然而,跟着间充质干细胞传代次数的增加其向软骨分化的潜能明显的降落。假如细胞生存环境中不足够的因素帮助保持足够的分化潜能,间充质干细胞在经过多次传代当前很难向软骨细胞方向分化。传代培养的间充质干细胞须要一些强有力的引诱信号促进其向软骨细胞方向分化.将间充质干细胞跟成熟的软骨细胞共培养不仅解决了引诱信号问题也解决了细胞来源问题。本实验中,咱们将间充质干细胞跟成熟软骨细胞在体外混淆培养并分析相干的效应。目标:通过将异种关节软骨与MSCs体外独特培养后分析两种细胞的效应,初步懂得在共培养时两种细胞之间的作用机制,为解决组织工程学修复软骨缺损时细胞数量不足跟细胞去分化景象提供一种坚固(文章此处忽略..)的细胞培养方法,促进组织工程学修复软骨缺损的进一步研究。设计、时光及地点:分组对比察看,于2008-10/2009-10在南京医科大学儿科学实验室实现。材料:选用2-3月龄健康白兔,人股骨骨髓。方法:分辨在体外分别培养人MSCs跟兔软骨细胞,分别培养成功后取第2代软骨细胞跟第3代间充质干细胞进行分组实验:共分五组,分辨为人MSCs单独培养,人MSCs跟兔软骨细胞两种细胞分辨按1:1,1:2,2:1的比例分为3个组,第5组为兔软骨细胞单独培养,分辨在培养1、2、3、4周后抽取mRNA用RT-PCR的方法分析两种细胞的一些特异性指标来断定在共培养时是哪种细胞在起作用,机制是什么。重要察看指标:人MSCs体外扩增引诱分化后与兔的关节软骨细胞按必定的比例共培养后,通过RT—PCR的方法分析察看(本文此处忽略..)共培养中的细胞比例、Ⅱ型胶原基因的表白、共培养实验组中的总Ⅱ型胶原、SOX9表白。成果:MSCs跟关节软骨细胞分辨以1:2、1:1、2:1的比例共培养后细胞增殖比例不明显的变更;在共培养中MSCs跟兔软骨细胞的比例为2:1的样本其Ⅱ型胶原与Ⅰ型胶原表白的比例较其它实验组增高;高比例的MSCs促进Ⅱ型胶原的表白;总Ⅱ型胶原跟SOX9在MSCs跟关节软骨细胞分辨为1:2、1:1、2:1的实验组中顺次增高。在共培养中MSCs跟关节软骨细胞为2:1的比例实验组中明显促进软骨细胞基质的表白。论断:共培养当中MSCs以直接的或间接的旁分沁的方法影响软骨细胞构成跟正向调节软骨细胞的表白。


以上为本篇毕业论文范文异种关节软骨与MSCs体外独特培养的实验研究的介绍部分。
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