咖啡因促进顺铂引诱骨肉瘤细胞凋亡的实验研究

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咖啡因促进顺铂引诱骨肉瘤细胞凋亡的实验研究

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毕业论文范文题目：咖啡因促进顺铂引诱骨肉瘤细胞凋亡的实验研究，论文范文关键词：咖啡因促进顺铂引诱骨肉瘤细胞凋亡的实验研究
咖啡因促进顺铂引诱骨肉瘤细胞凋亡的实验研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：一、研究背景骨肉瘤好发于10～30岁的青少年，恶性程度很高，单纯截肢生存率从未超过20％。自70年代开端利用化疗以来，骨肉瘤患者的预后有了明显的进步，治愈率达到50～80％。然而固然新帮助化疗在把持骨肉瘤的原发病灶、进步保肢成功率已获得了旨定的后果，但仍有40％左右的骨肉瘤病例在踊跃医治过程中复发或转移；同时跟着化疗药物剂量的始终增加，化疗药物的毒副作用包含(呕吐、肾毒性、耳毒性、心脏毒性、外周神经病变等)也始终加大导致患者不能耐受化疗；另外一些骨肉瘤在化疗过程中产生耐药性也使医治后果进一步降落。为了进步患者的生存率；为了进步保肢手术的成功率，同时术中尽可能的保存重要组织以进步患者术后的生存品质，有必要寻找一些新的化疗药物，或能增加化疗药物敏感性的生物调节剂从而进步患者的生存率跟部分治愈率。咖啡（文章此处忽略..）因系由茶叶或咖啡中提得的一种生物硷，作为一种生物调节剂目前已在恶性肿瘤的化疗中得到利用并已得到断定后果。然而咖啡因作为化疗药物的增效剂在骨肉瘤化疗中的利用目前仅有零碎报道，有关的实验报道甚少。2002浙江大学硕士学位论文二、材料与方法（一）重要溶液配制方法：1．细胞培养液：RPMI640培养基粉剂1包，参加800ml三蒸水中，搅拌混匀，再加水至1000ml混匀，参加NaHCO。2刀克，用稀盐酸调PH值为7．6，参加青霉素10万单位，链霉素100mg，0二Zpm滤纸抽虑除菌，分装，参加10％小牛血清：4℃保存备用；2．均衡盐溶液；按以下配方（叭），配制时逐个将以下成分溶解于800ml三蒸水中，必须待一种溶剂完全溶于水后再加下一种溶剂，所有溶剂溶解后，补加水至1000mlM匀；分装，高温高压蒸汽消毒后置于4oC冰箱备用；PSS：＊aC！8刀0，（略..）＊C10．2口川aZ＊PO4·HZOI．56，＊NZPO4o二0；D－H44kS：NSC！8刀0，KCI．40，NSZHPO4·HZO0．06，KHZPO40刀6，NSHCO3035；3．消化液（0．25％胰蛋白酶液）：称取0二sg胰蛋白酶，参加100miD－Hanks液中，＜川电磁力搅拌器混匀，使其完全溶解，0二Zpme膜过滤除菌，4℃保存备用；（二）实验步骤本实验以人骨肉瘤细胞（OS一732购白北京积水潭病院）为受试对象，细胞惯例培养T含体积分数10％新生小牛血请的RPMll640培养基中，COZ孵箱内传代培养至必定数量后，以少量胰蛋白酶跟EDTA消化液将贴壁成长的细胞消化并进行离心将细胞株制成细胞悬液。并将细胞悬液调剂为IXI06／ml浓度备用。川咖啡因及顺铂为什川药物（咖啡因、顺铂分辨购自引gma公司及山东齐鲁制药厂），从三个方面察看咖啡因是否（本文此处忽略..）能存在促进顺铂引诱骨肉瘤细胞凋亡的作用：）通过荧光显微镜察看咖啡因、顺铂作用后骨肉瘤细胞是否会产生凋亡及骨肉瘤细胞的状况学变更；（2）通过对药物作用后骨肉瘤细胞跨膜电位的变更，察看咖啡因是否能存在促进顺铂引诱骨肉瘤细胞凋亡的作用以及线粒体跨膜电位的变更在其中的作用；（3）流式细胞仪测22002浙江大学硕士学位论文定咖啡因、顺铂作用后骨肉瘤细胞凋亡峰的变更，并根据这一变更进一步回明咖啡因是否能存在促进顺铂引诱骨肉瘤细胞凋亡的作用（细胞凋亡的生化基本是DNA在核小体间特异性的断裂，其DNA含量低于畸形细胞的二倍体）。三、成果门）荧光显微镜下对比组骨肉瘤细胞核染色均匀，细胞核呈圆形，透亮度好；而在药物作用后骨肉瘤细胞表示为体积缩小、胞膜皱缩、细胞缝隙增宽、细胞分别，贴壁程度降落，沉没（文章此处忽略..）于培养液中，荧光显微镜下凋亡细胞核染色不规矩，染色体稀释、核碎裂构成核小体。咖啡因组、顺铂组、混淆组镜下均可发明凋亡小体的存在。但在顺铂组、混淆组并未察看到凋亡小体增多的景象，分析可能是在经过顺铂及两种药物独特作用后，大量骨肉瘤细胞直接进入晚期凋亡，即继发性坏逝世。（2）通过线粒体跨膜细胞电位的变更检测凋亡细胞：在咖啡因、顺铂联配合用24、48小时后骨肉瘤细胞Rh123低染率较两药单用时增加，而Rh123是由线粒体摄取的pLJ离于亲脂染科，细胞内

以上为本篇毕业论文范文咖啡因促进顺铂引诱骨肉瘤细胞凋亡的实验研究的介绍部分。

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