4-1BBL基因转染对小鼠体内卵巢癌细胞成长的影响及其免疫调节研究

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4-1BBL基因转染对小鼠体内卵巢癌细胞成长的影响及其免疫调节研究

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毕业论文范文题目：4-1BBL基因转染对小鼠体内卵巢癌细胞成长的影响及其免疫调节研究，论文范文关键词：4-1BBL基因转染对小鼠体内卵巢癌细胞成长的影响及其免疫调节研究
4-1BBL基因转染对小鼠体内卵巢癌细胞成长的影响及其免疫调节研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目标:初步探讨转染4-1BBL基因的小鼠卵巢癌细胞株OVHM细胞在小鼠体内的致瘤性及其对免疫功能的影响。方法:以脂质体为载体将重组质粒pcDNA3.1跟pcDNA3.1/4-1BBL分辨转染小鼠卵巢癌细胞株OVHM。设定药物浓度梯度,断定HygroB对OVHM细胞株的最适药物浓度(800μg/ml),以此药物浓度保持培养经基因转染的细胞10天后,改为半量药物持续保持培养(400μg/ml),转染成功的细胞逐步构成单细胞克隆,筛选出抗性单克隆多个,分辨培养。采取RT-PCR及流式技巧方法检测抗性单克隆细胞中目标基因4-1BBL的表白,筛选树破牢固高表白4-1BBL的阳性细胞株OVHM/4-1BBL。转染空质粒组为OVHM/pcDNA（本文此处忽略..）3.1(存在HygroB抗性,然而4-1BBL表白较野生型细胞株不增加)。采取计数法绘制体外培养细胞成长曲线,察看转染前后细胞体外成长有无变更,以懂得基因对细胞本身成长有无影响。本实验将18只6～8周龄的雌性B6C3F1小鼠随机分为3组,每组6只小鼠,分辨接种OVHM细胞,OVHM/pcDNA3.1细胞,OVHM/4-1BBL细胞于小鼠腹部皮下(1×10~6/200μl),察看细胞在各组小鼠体内的致瘤性,监测各组肿瘤的成长速度及肿瘤体积。于细胞接种后第21天处死各组小鼠,取其瘤体做病理切片HE染色。无菌操作取其脾脏,制备CTL细胞悬液为效应细胞,以野生型OVHM细胞株为靶细胞,以LDH法测定4-1BBL对CTL细胞杀伤活性的影响。成果:成功转（略..）染OVHM细胞株,树破了高表白4-1BBL基因的OVHM/4-1BBL细胞株。与野生型小鼠卵巢癌细胞株OVHM比拟,本实验所树破的OVHM/4-1BBL细胞株可牢固高表白目标基因4-1BBL(IA百分比为77.82±3.45),而OVHM/pcDNA3.1细胞株中4-1BBL基因的表白与野生型OVHM细胞株无明显性差别(其IA百分比分辨为22.56±2.07跟21.63±1.61)。转染前后肿瘤细胞的体外成长曲线类似,各细胞体外成长速度无明显性变更(F=0,P＞0.05)。通过小鼠体内成瘤实验发明OVHM/4-1BBL细胞株在B6C3F1雌性小鼠体内的致瘤性较野生型OVHM细胞株跟OVHM/pcDNA3.1细胞明显性降落,且其成瘤时光较晚,肿瘤成长速度明显减慢(P＜0.05),且OVHM（本文此处忽略..）/4-1BBL组小鼠均未发明呈现肿瘤转移的景象,而其余两组小鼠均可有肿瘤转移的景象呈现,且两组小鼠的肿瘤转移无明显差别。经过肿瘤标本的病理切片HE染色可证明,转移瘤体与原发瘤的同源性。本实验通过LDH方法测定CTL细胞杀伤活性,成果发明4—1BBL组小鼠的CTL细胞杀伤活性较其余两组小鼠有明显性加强(P＜0.05),余两组小鼠的CTL细胞杀伤活性则无明显性变更(P＞0.05)。论断:转染4-1BBL基因对OVHM细胞的体外成长不明显影响,但可引诱机体产生明显的抗肿瘤免疫,使肿瘤细胞在小鼠体内的成瘤性明显降落,肿瘤成长速度明显减慢,4-1BBL可能加强CTL细胞的杀伤活性可能与其有关,有关具体机制还有待进一步研究。另（文章此处忽略..）外本研究成果提示4-1BBL基因可能参加克制肿瘤细胞转移的机制,具体机制有待进一步研究。通过本实验的研究,咱们看到了4-1BBL基因在抗卵巢肿瘤方面的作用,提示了4-1BBL基因有望成为卵巢癌基因医治的候选基因,本实验中成功构建的OVHM/4-1BBL细胞株为进一步研究4-1BBL基因在卵巢癌生物医治中的作用奠定了基本。

以上为本篇毕业论文范文4-1BBL基因转染对小鼠体内卵巢癌细胞成长的影响及其免疫调节研究的介绍部分。

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