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非小细胞肺癌细胞中Nrf2信号通路克制造用的研究

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毕业论文范文题目:非小细胞肺癌细胞中Nrf2信号通路克制造用的研究,论文范文关键词:非小细胞肺癌细胞中Nrf2信号通路克制造用的研究
非小细胞肺癌细胞中Nrf2信号通路克制造用的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:Nrf2-ARE信号通路在肿瘤化学防备跟肿瘤耐药性两方面起侧重要作用,Nrf2在细胞核中的累积可能导致肿瘤细胞获得耐药性,而且现已成为增敏肿瘤细胞的有效药靶。本研究重要分为3个部分。第一部分:通过构建Keap1高表白的牢固细胞株,探讨Keap1对Nrf2信号通路的影响。咱们将野生型mKeapl-pEGFP转染非小细胞肺癌细胞A549跟H460,通过Westernblot、免疫细胞化学、PCR筛选得到Keap1牢固表白的细胞株A549-mKeap1-pEGFP(H1)跟H460-m(文章此处忽略..)Keap1-pEGFP(N5),同时转染pEGFP树破对比组细胞株。与对比组比拟,Keap1高表白的细胞株中Nrf2与其调控蛋白质的表白均有降落。MTS法分析数据显示,与对比组细胞株比拟,H1对抗癌药物奥沙利铂更敏感,在H460-N5细胞株中,抗癌药物奥沙利铂、阿霉素跟依靠泊苷的增敏作用明显加强。可见,Keap1过表白后,降落了Nrf2及其调控基因的表白,增敏非小细胞肺癌细胞对抗肿瘤药物的作用。第二部分:利用细胞核亚细胞器构造的一些特异性蛋白质:Coilin、(略..)SMN、SC35、核孔复合体(nuclearporecomplex,NPC)、RNA聚合酶Ⅱ(PolⅡ)及Y12等标记亚细胞器,研究Nrf2小分子克制剂贝沙罗汀(Bexarotene)对Nrf2转录活性影响的机制,同时对Nrf2在细胞中的定位进行了探讨。激光共聚焦显微镜显示,A549细胞中Nrf2与coilin、SMN之间存在共定位,Bexarotene作用6h后,Coilin的表白增加,且Nrf2与coilin的共定位增加,与转录克制剂5-6-dichloro-l-B-D-(文章此处忽略..)ribofuranosylbenzimidazole(DRB)对细胞作用1h时的成果类似;SMN的表白也增加,且Nrf2与SMN的共定位增加,这一成果与鹅膏蕈碱(a-amanitin)对细胞作用1h时的成果类似,然而这一景象须要进一步验证。由此可见Bexarotene可能通过coilin跟SMN等亚细胞器对Nrf2进行调控。第三部分:为了进一步研究Nrf2跟coilin、SMN之间的彼此作用关联,将coilin转染A549细胞,发明其与Nrf2存在共定位景象;(文章此处忽略..)通过免疫共积淀发明Nrf2与SMN存在彼此作用。在其余一些细胞中都可能发明Nrf2与coilin、SMN的共定位。因此证明Nrf2与coilin、SMN之间存在共定位景象,并且存在广泛性。在结肠癌Caco2细胞中,可见共定位景象,Bexarotene作用后,共定位增加,然而本实验尚需进一步研究。


以上为本篇毕业论文范文非小细胞肺癌细胞中Nrf2信号通路克制造用的研究的介绍部分。
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