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HMME-PDT引诱犬乳腺肿瘤细胞凋亡状况学及Caspase-3、Caspase-8活

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毕业论文范文题目:HMME-PDT引诱犬乳腺肿瘤细胞凋亡状况学及Caspase-3、Caspase-8活,论文范文关键词:HMME-PDT引诱犬乳腺肿瘤细胞凋亡状况学及Caspase-3、Caspase-8活
HMME-PDT引诱犬乳腺肿瘤细胞凋亡状况学及Caspase-3、Caspase-8活毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:犬乳腺肿瘤是兽医临床常见的一种肿瘤性疾病。犬作为人类的伴侣动物分享着人类生活的很多方面。在发病机理、肿瘤组织学特点、医治方法及预后都与人类的乳腺肿瘤极其类似,因此用犬来作为研究乳腺肿瘤的模型对当前研究新的医治打算尤具意思。传统的医治癌症的手段是手术、化疗跟放疗,然而传统的医治手段常难以获得幻想疗效,医学界仍在始终摸索医治恶性肿瘤的新方法。光能源学疗法(photodynamictherapy,PDT)是一种能引诱肿瘤细胞坏逝世跟凋亡的细胞毒性医治方法,是激光技巧、光导技巧、光信息处理技巧、生物光化学技巧跟古代医学技巧有机结合的产物,是一种非常有发展前景的能引诱细胞凋亡跟坏逝世的肿瘤医治方法。光能源学的作用因素包含对光敏感的物质—光敏剂、光、基质以及氧分子。光敏剂可能被病变靶组织抉择性的接收,在合适波长的光的激发下,通过能量的转换产生活性(本文此处忽略..)氧物质,进而造成对靶组织的伤害。血卟琳单甲醚(hematoporphyrinmonomethylether,HMME)是一种新型的卟琳类光敏剂,并已在基本实验跟临床实验中证明了它的高效性。但目前国内HMME-PDT对乳腺癌细胞作用的研究较少。目标:本课题采取这种新型光敏剂——血卟琳单甲醚,用波长为632.8nm的He-Ne激光照射体外培养的犬乳腺肿瘤细胞,研究不同光敏剂剂量及不同激光照射剂量的光能源学作用对犬乳腺肿瘤细胞成长的影响,断定HMME-PDT对犬乳腺肿瘤细胞的凋亡率,察看及检测细胞凋亡的情况,以及检测凋亡过程中的重要参加者(钙离子,Caspase-3,Caspase-8及端粒酶)的变更,探讨HMME-PDT导致乳腺肿瘤细胞凋亡的机制。方法:实验选用天然产生乳腺肿瘤病例的转移病灶分别培养的细胞系CHMm,经传代成长性状牢固后,作为研究对象。首(本文此处忽略..)先用MTT法测定细胞的克制率,断定克制细胞成长的光敏感剂跟激光照射的最佳剂量。将细胞按光照后3h、6h、12h、24h、48h分组,同时设置空白对比组,采取最佳剂量组配合用细胞,通过吉姆萨染色在倒置显微镜下察看、AO/EB染色在荧光显微镜下察看、及透射电镜下察看细胞凋亡的状况学变更;用DNALADDER法定性检测细胞凋亡的情况;采取AnnexinV-FITC/PI法,通过流式细胞仪检测细胞的凋亡率;采取Fura-2AM(钙离子荧光探针)法检测HMME-PDT对细胞内游离钙离子的含量变更的影响;采取分光光度法检测HMME-PDT对细胞内Caspase-3及Caspase-8的变更的影响;采取TRAP-银染法检测HMME-PDT对细胞的端粒酶活性的影响。成果:1.MTT法检测发明HMME-PDT对犬乳腺肿瘤细胞株CHMm成长的有明显克制造用,且克制率存在剂量依附(本文此处忽略..)性,成果数据分析断定,光敏感剂剂量20μg/mL跟光照剂量2.8J/cm2是最佳剂量组合。2.吉姆萨染色,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双荧光染色,以及透射电镜下察看发明,HMME-PDT引诱犬乳腺肿瘤细胞CHMm凋亡,细胞呈典范的凋亡状况,并且跟着HMME-PDT后时光的延长凋亡程度逐步重大。3.HMME-PDT后细胞的DNA电泳呈典范“梯状”条带,并且跟着HMME-PDT后时光的延长条带色彩逐步加深。表示跟着HMME-PDT后时光的延长,细胞凋亡程度逐步加深。4.AnnexinV-FITC/PI双染色,流式细胞仪检测实验组细胞的凋亡率逐步升高与对比组差别极明显性,并且跟着HMME-PDT后时光的延长凋亡率逐步增加。5.实验组细胞内游离的钙离子含量逐步增加,与对比组差别极明显,伴随凋亡程度的加深,细胞内游离钙离子含量逐步增加。6.伴随凋亡程度的加深,实(此处忽略..)验组细胞内Caspase-3跟Caspase-8活性逐步增多,其中Caspase-8活性从3h组起与对比组差别明显,Caspase-3的活性从6h组与对比组差别明显。7.实验组用来表示细胞内端粒酶活性的凝胶电泳上显示相隔6bp的梯状条带,并且经过ImageVCD凝胶成像体系扫描分析条带均匀灰度值逐步降落,与对比组差别极明显。表明伴随凋亡程度的重大端粒酶活性逐步降落。HMME-PDT能引诱犬乳腺肿瘤细胞株CHMm凋亡,并且存在时光依附性。HMME-PDT引诱细胞凋亡的机制与钙稳态失衡机制、Caspase级联机制(其中Caspase-8在凋亡早期起“凋亡启动者”的作用,Caspase-3在凋亡中后期起着“凋亡履行者”的作用)以及与克制端粒酶活性机制有关。


以上为本篇毕业论文范文HMME-PDT引诱犬乳腺肿瘤细胞凋亡状况学及Caspase-3、Caspase-8活的介绍部分。
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