H5N1亚型高致病性禽流感病毒血凝素糖链谱在研究

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H5N1亚型高致病性禽流感病毒血凝素糖链谱在研究

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毕业论文范文题目：H5N1亚型高致病性禽流感病毒血凝素糖链谱在研究，论文范文关键词：H5N1亚型高致病性禽流感病毒血凝素糖链谱在研究
H5N1亚型高致病性禽流感病毒血凝素糖链谱在研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：研究背景：血凝素是流感病毒囊膜表而重要的蛋白之一,在病毒侵染宿主的过程中,通过与宿主受体的识别、结合以及病毒囊膜与细胞膜的融合发挥重要的生物学功能。它既是糖结合蛋白又是糖蛋白,其寡糖链对病毒的宿主特异性、宿主范围以及病毒的毒力都有重要的影响。本研究主要分析与不同受体(SAa2-3Gal和SAa2-6Gal)结合的H5N1亚型禽流感病毒血凝素上寡糖链的结构及其差异。方法：通过对环氧化磁粒的修饰得到羟基化的磁性微粒,再与两种结构的寡糖(SAa2-3Gal和SAa2-6Gal)偶联,最终得到两种糖链磁性微粒复合物(SAa2-3Gal糖链磁性微粒复合物和SAa2-6Gal糖链磁性微粒复合物)。利用两种糖链磁性微粒复合物对乙醚粗提过的H5N1禽流感病毒病毒液中的血凝素分离纯化,SDS-PA（文章此处忽略..）GE对得到的蛋白质进行鉴定,通过凝集素芯片对血凝素上的糖链谱进行解析；然后用PNGaseF释放血凝素上的寡糖链、用sepharoseCL-4B亲水树脂对其进行分离纯化,最后应用MALDI-TOF/TOF-MS对血凝素上寡糖链的精细结构进行解析。结果：对糖链磁性微粒复合物分离纯化的血凝素进行SDS-PAGE鉴定,其分子量与文献报道的一致。通过凝集素芯片分析血凝素上糖链的结构,结果显示SAa2-3Gal磁性微粒复合物分离纯化的H5N1亚型禽流感病毒血凝素与PHA-E、RCA120、DSA、ACA和SNA五种凝集素呈阳性信号,而SAa2-6Gal磁性微粒复合物分离纯化的H5N1亚型禽流感病毒血凝素与PHA-E、LTL、RCA120、ConA、DSA、ACA、PWM、GNA（略..）和SNA九种凝集素呈阳性信号。这表明在H5N1(DK/GD/17/08)亚型禽流感病毒血凝素上参与识别、结合SAa2-3Gal结构受体的糖链结构有BisectingGlcNAcandbiantennaryN-glycans,Fucose，β-gal,GlcNAc,Galβ1-3GalNAcα-Ser/Thr(Tn),Galβ1-3GalNAc,biantennaryN-glycansandtetraantennwrycomplex-type和Sia2-6Galβ1-4Glc(NAc),而参与识别、结合SAa2-6Gal结构受体的糖链结构有BisectingGlcNAcandbiantennaryN-glycans,Fucosea-l,3GlcNAc(corefucose),Sia-Lexa（略..）ndLex,β-gal,branchedandterminalmannose,terminalGlcNAc,GlcNAc,Galβ1-3GalNAca-Ser/Thr(Tn),Terminala-1,3mannose和Sia2-6Galβ1-4Glc(NAc)。另外,对两种糖链磁性微粒复合物分离纯化的血凝素进行PNGsaeF酶解,得到的寡糖链利用MALDI-TOF/TOF-MS技术对其结构进行解析,利用BrukerflexAanlysisi3.3质谱分析软件对得到的质谱图进行分析,结果显示两种糖链磁性微粒复合物分离纯化的血凝素上共同存在11个相同的高丰度糖链峰,且SAα2-3Gal糖链磁性微粒复合物得到的寡糖链其峰强度远高刁SAα2-6Gal糖链磁性微粒复合物得到的寡糖链,此（略..）外,除这11个相同的糖链峰以外,SAα2-3Gal糖链磁性微粒复合物分离纯化的血凝素上还存在有5个特有的低丰度糖链,在SAα2-6Gal糖链磁性微粒复合物分离纯化的血凝素上存在2个特有的低丰度糖链。结论：应用凝集素芯片与质谱技术联用的方法,对H5N1亚型禽流感病毒血凝素上寡糖链的结构进行解析,结果显示在H5N1亚型高致病性禽流感病毒血凝素的表面,存在有两套糖链系统,这两套糖链系统在识别不同结构的受体时发挥不同的作用。本研究为流感的预防与治疗提供了一种新的理论依据。

以上为本篇毕业论文范文H5N1亚型高致病性禽流感病毒血凝素糖链谱在研究的介绍部分。

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