MICA-NKG2D通路介导对口腔鳞癌免疫杀伤效应的实验研究

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MICA-NKG2D通路介导对口腔鳞癌免疫杀伤效应的实验研究

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毕业论文范文题目：MICA-NKG2D通路介导对口腔鳞癌免疫杀伤效应的实验研究，论文范文关键词：MICA-NKG2D通路介导对口腔鳞癌免疫杀伤效应的实验研究
MICA-NKG2D通路介导对口腔鳞癌免疫杀伤效应的实验研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：口腔鳞状细胞癌是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤,重大迫害人类健康。已有研究表明,口腔鳞癌患者免疫功能低下,且与病变的发展跟预后密切相干,因此通过免疫医治来进步患者生存率已成为目前的一个研究热点。目标：探讨MICA-NKG2D信号通路关键分子在口腔鳞癌产生发展过程中的表白及其临床意思。树破MICA牢固过表白的口腔鳞癌细胞系,通过体内外实验研究MICA过表白对NK及CTL细胞NKG2D的表白及细胞毒作用的影响,以期为利用MICA-NKG2D信号通路作为口腔鳞癌的免疫医治靶标提供实验根据。方法：1.实时定量PCR跟免疫组织化学技巧检测口腔鳞癌组织标本mMICAmRNA及蛋白的表白,ELISA与流式细胞术检测口腔鳞癌患者血清中sMICA及外周血PBMC中NKG2D的表白,采取SPSS16.0软件统计,分析其与口腔鳞癌患者临床（此处忽略..）病理参数的关联。2.PCR技巧扩增pCMV-SPORT6-MICA中编码MICA基因全长的cDNA序列,重组至有绿色荧光蛋白标记的真核表白载体pEGFP-N1,构建终极表白载体pEGFP-N1-MICA,脂质体法转染Tca8113-Tb细胞,G418筛选,荧光显微镜下察看绿色荧光蛋白的表白,有限稀释法树破牢固过表白MICA基因的Tca8113-Tb细胞系,RT-PCR、realtimePCR跟免疫细胞化学技巧验证MICA在该细胞中的表白情况。3.通过绘制细胞成长曲线、检测细胞周期、平板集落构成及裸鼠皮下成瘤等方法对牢固转染并过表白MICA的Tca8113-Tb细胞系进行生物学特点鉴定。乳酸脱氢酶开释法及流式细胞术分析Tca8113-Tb过表白MICA对NK与CTL细胞杀伤活性及NKG2D表白的影响。成果：1.免疫组织化学成果提示MICA分子定位于细（文章此处忽略..）胞胞浆与胞膜,表白强度癌旁组织高于口腔鳞癌(P0.05),但癌旁组织与畸形口腔粘膜以及畸形口腔粘膜与鳞癌之间,差别无统计学意思(P0.05),口腔鳞癌不同临床病理参数组间的比较,差别亦无统计学意思(P0.05)。RT-PCR及realtimePCR成果提示口腔鳞癌MICAmRNA表白的绝对含量明显高于癌旁组织(P0.05),且与临床分期、颈部淋巴结是否转移相干(P0.05)。口腔鳞癌组织MICAmRNA与蛋白的表白无相干性(P0.05)。2.78例口腔鳞癌患者血清sMICA检测阳性率98.7%(77/78),其含量的95%可托区间为74.30～93.95pg/mL,中位数为82.17pg/mL;19例健康成年人血清sMICA检测阳性率94.7%(18/19),其含量的95%可托区间为29.48～50.30pg/mL,中位数为37.54pg/mL,口腔鳞癌患者血清sMICA含量明显高于健康成年人(P0.01),且不同肿瘤大小、临床分期及颈部淋巴结是否转移的组间比较,差别存在统（文章此处忽略..）计学意思(P0.05),而不同性别、年纪及肿瘤分化程度的组间比较,差别无统计学意思(P0.05)。3.56例口腔鳞癌患者PBMC名义NKG2D表白的阳性率为(12.49±5.26)%,明显低于畸形健康成人(22.93±8.14)%(P0.05)。口腔鳞癌患者PBMC名义NKG2D表白的阳性率在不同肿瘤大小跟临床分期组间比较,差别存在统计学意思(P0.05),而不同性别、年纪、肿瘤部位、病理分化程度及颈部淋巴结是否转移的组间比较,差别无统计学意思(P0.05)。4.通过PCR技巧获取了MICA基因全长并成功克隆入载体,测序鉴定该序列与GenBank中的序列雷同。转染后细胞可见绿色荧光蛋白表白,RT-PCR、realtimePCR及免疫细胞化学检测到目标基因MICA在转染细胞中过表白。5.口腔鳞癌细胞转染并过表白MICA基因后成长曲线、细胞周期、平板集落构成及裸鼠皮下成瘤等重要生物学特点未产生改变,但能（此处忽略..）明显加强NK与CTL细胞杀伤活性并上调其名义NKG2D的表白,与未转染及转染空白载体的细胞比较,差别有统计学意思(P0.05)。论断：MICA-NKG2D信号通路中的关键分子与口腔鳞癌的产生发展密切相干。口腔鳞癌细胞过表白MICA后能上调NK及CTL细胞NKG2D的表白并加强其杀伤活性,MICA-NKG2D通路有望作为口腔鳞癌免疫基因医治的潜在靶标。

以上为本篇毕业论文范文MICA-NKG2D通路介导对口腔鳞癌免疫杀伤效应的实验研究的介绍部分。

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