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肢带型肌营养不良的分子病理研究

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毕业论文范文题目：肢带型肌营养不良的分子病理研究，论文范文关键词：肢带型肌营养不良的分子病理研究
肢带型肌营养不良的分子病理研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的：肢带型肌营养不良(limbgirdlemusculardystrophy,LGMD)是一组具有遗传和临床异质性的疾病,可为常染色体显性(1型)、隐性(2型)遗传,散发病例亦不少见,发病率约为1/10万,由Walton和Nattrass于1954年首先提出,用以区别DMD、面肩肱型等已知的肌营养不良。根据受累基因的不同LGMD1分为LGMD1A～LGMD1G七种类型,LGMD2又分为LGMD2A～LGMD2L十二种类型(表格1,NeuromuscularHomePageofWU.url)。临床上病变主要累及上、下肢带肌,或以肢带肌首先受累,逐渐出现全身肌肉的无力和萎缩。LGMD无特征性病理改变,各亚型之间单纯以肌活体组织检查病理结果难以鉴别。突变基因和缺失蛋白分析是确诊LGMD各亚型的必要手段。LGMD2A由常染色体15q15.1-q21.1上的CAPN-3基因突变导致其表达产物——骨骼肌特异性钙激活蛋白酶-3(即calpain-3)活性异常所致,LGMD2B是由位于2p13的DYSF基因发生突变引起相应的基因产物dys（文章此处忽略..）ferlin表达异常导致。本研究选取37例临床病理诊断为肢带型肌营养不良的病人,利用免疫学方法检测病人肌肉中caveoiln-3、calpain-3、dysferlin、sarcoglycan的表达,进一步探讨我国LGMD2A的临床和病理特点,借以对各型肌营养不良进行鉴别。材料和方法：选取山东大学齐鲁医院神经肌肉病研究室接诊的37例临床和病理诊断为肢带型肌营养不良病人的肌肉标本,其中肢带型肌营养不良2B(LGMD2B)7例。另选病理报告为正常的肌肉标本5例作为对照。经液氮预冷的异戊烷中速冻的冰冻肌肉标本制成5μm冰冻切片,用抗dystrophinC-terminal、dystrophinRod、dystrophinN-terminal、caveolin-3、、α-、β-、γ-、δ-sarcoglycan和dysferlin蛋白的9种单克隆抗体做免疫组织化学染色(IHC),对7例LGMD2B型和排除LGMD2B型之后的30例分型未明的LGMD患者的冰冻肌肉标本,分别提取肌组织总蛋白行cal（略..）pain-3和dysferlin蛋白印迹分析(westernblot,WB)。结果：IHC与WB分析结果：对其中7例肢带型肌营养不良2B(LGMD2B)患者的冰冻组织,进行IHC发现患者dystrophin、caveolin-3和α-、β-、γ-、δ-sarcoglycan免疫组织化学染色均正常,提取肌肉组织总蛋白并测定提取液蛋白浓度后,进一步作WB分析,定量检测calpain-3发现有2例calpain-3条带表达呈不同程度的降低,可能为继发的calpain-3减少。在排除LGMD2B型(7例)之后的30例分型未明的LGMD患者的冰冻组织中,经IHC发现患者dystrophin、caveolin-3和α-、β-、γ-、δ-sarcoglycan免疫组织化学染色均正常,6例dysferlin染色减低。对30例分型未明的LGMD患者肌肉标本,提取肌肉组织总蛋白并测定提取液蛋白浓度后行WB分析,定量检测calpain-3和dysferlin。有5例calpain-3蛋白条带缺失或遗留痕迹,从而被确（略..）诊为钙蛋白酶肌病,即LGMD2A。以上5例病人IHC显示dystrophin、caveolin-3和α-、β-、γ-、δ-sarcoglycan免疫组织化学染色均正常,2例dysferlin染色减低。其余病人的calpain-3条带表达呈不同程度的降低,有10例calpain-3条带表达在正常对照值的45%以上,8例病人calpain-3表达在正常对照值的20%-45%,5例病人10%,calpain-3条带明显减弱但轮廓仍清晰,以上可能与继发的calpain-3减少有关。2例calpain-3表达正常。6例dysferlin染色减低的患者肌肉标本WB结果在正常对照值的30%以上,认为不属于原发性dysferlinopathy,可能为继发性减少。结论：1.本组5例LGMD2A,占全部LGMD的13.5%(5/37),低于文献报道LGMD2A患者占总LGMD的约26%的平均水平。2.本研究在对calpian-3的免疫学检测中运用了WB方法,以补充calpian-3不能用于IHC的辅助诊断。结果发现5例病人calpian-3完全缺失。有2例病人在IH（本文此处忽略..）C观察为dysferlin表达减弱,而在WB分析发现正常。鉴于WB结果的可靠性,我们认为对于LGMD各型的诊断,首先行IHC进行排除性筛检,进一步行WB分析,以获得可靠的诊断结果。3.LGMD肌肉病理表现为不同程度的肌营养不良性改变,没有特异性,往往需要进一步的分子生物学检查。用免疫组织化学标示肌纤维膜上的dystrophin、caveolin-3、dysferlin和α-、β-、γ-、δ-sarcoglycan,对有染色缺陷的可疑病例和不能用于IHC的calpain-3蛋白用WB方法证实骨骼肌组织相关蛋白的缺乏,是诊断与鉴别诊断LGMD各型的有效方法。

以上为本篇毕业论文范文肢带型肌营养不良的分子病理研究的介绍部分。

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