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“更年春”对β-淀粉样蛋白致PC12细胞和大鼠海马细胞损伤的保护作用

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毕业论文范文题目:“更年春”对β-淀粉样蛋白致PC12细胞和大鼠海马细胞损伤的保护作用,论文范文关键词:“更年春”对β-淀粉样蛋白致PC12细胞和大鼠海马细胞损伤的保护作用
“更年春”对β-淀粉样蛋白致PC12细胞和大鼠海马细胞损伤的保护作用毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:围绝经期综合征是指妇女在绝经前后由于卵巢功能衰退所引起的一系列躯体和精神心理的症状,中医认为围绝经期综合征相当于“绝经前后诸症”,以肾精气亏损为本。部分患者除了会出现血管舒缩症状、神经精神症状外,绝经中远期还会出现骨质疏松、学习记忆能力减退甚至阿尔茨海默病(Alzheimer'sdisease,AD)。AD是一种以进行性痴呆为主要特征的神经系统退行性疾病,其特征性病理改变是脑内出现老年斑和神经原纤维缠结,并伴有突触和神经元缺失。β-淀粉样蛋白(β-amyloidprotein,Aβ)是构成AD特征性病理改变老年斑核心的主要物质。补肾中药“更年春”(GNC)方,以滋肾柔肝清心泻火为治则制成,临床验证治疗更年期综合征疗效良好,尤其可以改善大脑功能,增强记忆能力。既往实验发现GNC可能通过提高雌激素受体含量对神经内分泌免疫网络起良性调控作用,GNC可以提高大鼠切除卵巢后Morris水迷宫成绩;GNC可能通过提高海马中ERβmRNA和蛋白的表达、调节海马胆碱能指标而改善学习和记忆能力低(本文此处忽略..)下;GNC不引起子宫内膜增生,提示中药对改善学习和记忆能力低下有潜在的应用前景。为进一步证实GNC方的作用,我们采用Aβ25-35作用于PC12细胞和大鼠海马神经细胞,建立AD的细胞模型,并探索GNC含药血清对受损神经细胞的保护作用及可能的作用机制。第—部分“更年春”对Aβ25-35致PC12细胞损伤的保护作用目的:研究中药“更年春”对Aβ25-35致PC12细胞损伤的保护作用及可能的作用机制。方法:三月龄SD雌性大鼠去势后随机分为两组:一组去势雌性大鼠灌服相当于成人10倍剂量的中药更年春方颗粒溶液,取血制备大鼠含药血清(MRS);另一组去势雌性大鼠灌服相应剂量的生理盐水,取血制备去势大鼠血清(NRS)。不同浓度MRS和NRS以5%、10%、20%培养PC12细胞24h和48h,CCK-8方法检测细胞活力,摸索含药血清作用细胞的合适浓度和时间。分别以5μM、10μM、20μM、50μMAβ25-35处理PC12细胞24h和48h,CCK-8测定细胞活力,选择合适浓度以建立阿尔茨海默病细胞模型。设立实验分组为正常组、含药血清组、NGF组、普通去势大鼠血清组、模型组,加入Aβ25-35后培(本文此处忽略..)养24h用于后续检测。CCK-8法检测各组的细胞活力;AnnexinⅤ-FITC/PI双染色流式细胞术检测PC12细胞的早期细胞凋亡率;westernblotting方法检测各组细胞Bcl-2,Bax和activecaspase-3的蛋白表达水平。结果:1)PC12细胞培养24h和48h,同一浓度的MRS组比NRS组有更高的细胞活力,差异有统计学意义(p0.01),且随着血清浓度升高,培养时间延长,细胞活力有所升高,并在20%的MRS组细胞活力最高。2)Aβ25-35使PC12细胞活力降低,终浓度为5μmol/L(M)、10μM、20μM、50μM的Aβ25-35作用于PC12细胞,培养24h和48h后,随着Aβ25-35作用浓度的增加,细胞活力逐渐下降,并与浓度呈负相关性,相邻浓度组的差异有统计学意义(p0.01)。3)与模型组比较,MRS组的细胞活力显著升高(与NGF组相当),差异有统计学意义(p0.01)。4)与模型组比较,MRS组早期凋亡率显著降低(与NGF组相当),差异具有统计学意义(p0.01)。5)与模型组比较,Bax与bel-2表达比例在MRS组中明显降低(与NGF组相当,p0.01);与bax和bcl-2的表达相对应(本文此处忽略..)的,activecaspase-3在MRS组中表达显著降低(与NGF组相当,p0.01)。结论:MRS可以提高PC12细胞活力,浓度越高,细胞活力越高;Aβ25-35对PC12细胞具有毒性作用,有明显的剂量依赖性,也有一定时间依赖性;MRS对Aβ25-35致PC12细胞损伤有保护作用,可提高细胞活力,降低早期凋亡率;且可能通过调控bax、bcl-2和activecaspase-3蛋白表达实现。第二部分“更年春”对Aβ25-35致大鼠海马神经细胞损伤的保护作用目的:研究中药“更年春”对Aβ25-35致大鼠海马神经细胞损伤的保护作用及可能的作用机制。方法:取孕16-18天的SD大鼠,培养胎鼠的海马神经细胞。细胞分五组处理同PC12细胞,分别处理后检测LDH释放量以检测细胞活性;提取细胞全蛋白,westernblotting方法检测各组细胞Bcl-2,Bax和activecaspase-3的蛋白表达水平。结果:1)与正常组比较,模型组的LDH释放量显著升高(P0.01):而与模型组比较,MRS组的LDH释放量显著下降(与NGF组相当,P0.01)。2)与正常组比较,Bax与(本文此处忽略..)bcl-2的表达比例,在模型组明显升高(P0.01);与模型组比较,该比例在MRS组中明显降低(P0.01);与bax和bcl-2的表达相对应的,activecaspase-3在MRS组中明显较低(P0.01)。且MRS提高bax/bcl-2比例和降低activecaspase-3表达的作用与NGF相似。结论:MRS可以提高受损海马神经细胞的活性,对Aβ25-35致细胞损伤有保护作用;且可能通过调控bax、bcl-2和activecaspase-3蛋白表达实现。


以上为本篇毕业论文范文“更年春”对β-淀粉样蛋白致PC12细胞和大鼠海马细胞损伤的保护作用的介绍部分。
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