4.1蛋白在胃癌组织中的表白跟缺失细胞系的筛选

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4.1蛋白在胃癌组织中的表白跟缺失细胞系的筛选

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毕业论文范文题目：4.1蛋白在胃癌组织中的表白跟缺失细胞系的筛选，论文范文关键词：4.1蛋白在胃癌组织中的表白跟缺失细胞系的筛选
4.1蛋白在胃癌组织中的表白跟缺失细胞系的筛选毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：研究背景4.1蛋白(由红细胞膜蛋白经SDS-PAGE后其所处的地位而命名的)是红细胞中以血影蛋白(spectrin)为基本的细胞膜骨架的一个基本成分，它与血影蛋白跟肌动蛋白连接，在保持细胞畸形状况跟生物物理特点方面，并在细胞的有丝决裂的调控过程中起到重要作用。蛋白4.1基因的缺失会导致红细胞畸形跟溶血。蛋白4.1家族包含4.1R(红细胞中表白)、4.1N(神经元特异表白)、4.1G(广泛表白)跟4.1B(重要在脑中表白)，它们都存在一些雷同的构造域：SABD构造域(spectrin-actin-bindingdomain)；FERM构造域(4.1-ezrin-radixin-moesin构造域)或称膜结合构造域(membranebindingdomain，MBD)跟CTD构造域(C-terminaldomain)。胃癌是重大威胁人类健康的消化道恶性肿瘤。在我国，根据卫生部统计材料，90年代初恶性肿瘤逝世亡率排名第一位即为胃癌。深刻研究胃癌的发病机制以及早期诊断、预后评估的方法存在非常重要的临床跟社会价值。研究发明，在脑膜瘤、室管膜瘤、非小细胞肺癌跟乳腺癌等多种肿瘤中，4.1蛋白的表白缺失，并且越来越多的临床跟实验证据证明编码4.1蛋白的基因家族成员在多种肿瘤中表示出抑癌基因的作用。迄今为止，对于4.1蛋白家族成员与胃癌发病的相干性的研究尚未见报道。考虑到4.1蛋白家族成员间的分子构造存在很高的同源性，其成员间在功能上可能也存在类似性，本研究对4.1蛋白家族不同成员在胃癌组织中表白情况及其与胃癌发病机理的相干性进行了深刻的研究。免（文章此处忽略..）疫组织化学技巧是一种在组织或细胞原位研究基因产物的常用技巧，在状况学范畴已得到了广泛利用，跟着免疫组化技巧的发展，出现出一批新的免疫组化方法如SP，ABC，SABC跟Envision~+法等，有研究发明，Envision~+法较其余多少种的敏感性高，而且可能减少组织染色中的过显及非特异性染色。Envision~+法是在多聚物上连接二抗跟酶，在人体组织中不含有这种多聚物，从而避免了人体组织中生物素的烦扰，得到较为幻想的染色后果，所以，本实验采取了Envision~+法来检测4.1蛋白家族成员在胃癌组织中的表白情况。实验目标1．利用Envision~+免疫组织化学的方法检测104例胃癌及68例癌旁畸形组织中4.1蛋白家族成员(4.1B、4.1R、4.1G跟4.1N)的表白情况，分析其表白情况与临床病理之间的相干关联并探讨4.1蛋白家族成员的表白与胃癌产生、发展的关联，以期为胃癌诊断、医治跟断定预后提供根据。2．筛选4.1蛋白表白缺失的细胞系，为研究4.1蛋白的抑癌功能提供材料。实验方法1胃癌组织的免疫组织化学1．1实验标本的获取、分类、切片收集2005年1月-2006年6月间郑州大学第二从属病院病理科胃癌手术标本蜡块共104例，其中男77例、女27例，中位年纪61.7(35-88)岁。每例均有具体的临床材料跟手术记录。所有病例术前均未进行任何放疗、化疗跟免疫医治。伴有淋巴结转移者共51例。参照1981年WHO推荐的分化分级标准：高分化腺癌30例，中分化腺癌28例，低分化腺癌46例。同时取104例病例中的68例合乎对比标准的癌远切端胃粘膜组织作为对比组。标本均经4％缓冲甲醛溶液固定，梯（此处忽略..）度酒精脱水、透明、浸蜡、石蜡包埋。实验前将蜡块切片至3-4μm／片。1．2惯例HE(苏木素—伊红)染色采取惯例HE染色(苏木素—伊红染色)方法，在领有原病院病理材料的前提下，进一步明白实验标本的病理学特点。1．3实验标本的Envision~+免疫组织化学染色同时检测实验组跟对比组标本中4.1B、4.1R、4.1G、4.1N的表白情况，具体步骤在65℃烤片3小时，逐级脱蜡、水化后按照Dako公司的Envision~+免疫组化试剂盒阐明书进行。注：不同一抗对应的抗原修复方法不同，4.1NHP用的是高pH值抗原修复液，热修复20min；4.1BU2用的是低pH值抗原修复液，热修复20min；4.1RE13用的是高pH值抗原修复液，热修复20min；4.1GU3用的是蛋白酶修复，室温5min。4.1N、4.1B、4.1G跟4.1R均选用癌组织内的血管作为阳性对比；用PBS代替一抗作阴性对比。1．4免疫组织化学成果的测定免疫组化染色阳性成果为胞膜或胞浆内呈现棕褐色颗粒或棕褐色染色。每张切片均分辨由两位病理科医生进行盲读。成果断定按半定量评分标准进行，具体如下：在高倍镜下，无着色记为0分，浅褐色记为1分，褐色为2分，深褐色为3分。同一张组织切片，因为分化程度差别，染色也存在差别，此种情况以主导染色计分；阳性细胞百分率≤10％记为0分，10％-50％记为1分，50％-75％记为2分，75％以上记为3分。两者相加为综合染色强度评分。0-1分为“-”，2分为弱阳性“+”，3-4分为阳性“++”，5-6分为强阳性“+++”。1．5实验成果的分析采取SAS9.13分析软件包行统计学处理。利用卡方测验分析4.1B、4.1R、4.（略..）1G跟4.1N表白与临床病理的关联。24.1蛋白表白缺失细胞系的筛选培养肿瘤细胞系EC109、EC9706、ECl，用免疫细胞化学跟Westernblot鉴定4.1蛋白在细胞系中的表白情况。成果1．惯例HE染色成果均证明了临床诊断所断定的病理及分化类型。2．胃癌及相应癌旁对比组织4.1B、4.1R、4.1G跟4.1N的表白情况：4.1B、4.1R、4.1G跟4.1N在胃癌组织中的表白程度明显低于癌旁对比组(均P＜0.01)。3．4.1B、4.1R、4.1G跟4.1N的表白与组织分化的关联：4.1B、4.1G跟4.1N的表白程度跟着癌组织分化的降落而减弱(P_B＜0.05，P_G、P_N＜0.01)，4.1R的表白程度有跟着癌组织分化程度降落而减弱的趋势，然而差别无统计学意思(P_R＞0.05)。4．4.1B、4.1R、4.1G跟4.1N的表白与淋巴结转移的关联：4.1B跟4.1N的表白程度在伴有淋巴结转移的病例跟未伴有淋巴结转移的病例中的差别有统计学意思(P_B＜0.05，P_N＜0.01)。4.1R跟4.1N的表白程度在伴有淋巴结转移的病例跟未伴有淋巴结转移的病例中的差别无统计学意思(均P＞0.05)。5．4.1B、4.1R、4.1G跟4.1N的表白与浸润深度的关联：因为浸润深度仅限于粘膜层的病例过少，4.1B、4.1R、4.1G跟4.1N的表白程度在不同浸润深度的病例中的差别无统计学意思(均P＞0.05)。6．EC9706、EC109、EC1肿瘤细胞系均表白4.1蛋白。论断1．4.1B、4.1R、4.1G跟4.1N在胃癌组织中的表白程度明显低于癌旁对比组，提示4.1B、4.1R、4.1G跟4.1N与胃癌的产生、发展密切相干。2．4.1B、4.1G跟4.1N的表白程度跟胃癌组织分化程度明显相干，4.1R的表白程度跟癌组织的分化程度无明显相干（文章此处忽略..），提示4.1B、4.1G跟4.1N的表白异样可能与肿瘤的恶性程度有关。3．4.1B跟4.1N与胃癌淋巴结转移相干，4.1G跟4.1R与胃癌淋巴结转移无明显相干，提示4.1B跟4.1N的表白异样可能参加胃癌淋巴结的转移过程。4．4.1R的表白程度在胃癌组织跟癌旁组织中差别明显，然而与癌组织的分化程度、是否伴有淋巴结转移无明显相干性，提示4.1R蛋白的表白异样可能是胃癌产生、发展的早期事件。5．EC9706、EC109、EC1肿瘤细胞系均表白4.1蛋白，不适配合为通过导入4.1蛋白而研究4.1蛋白抑癌作用的材料。

以上为本篇毕业论文范文4.1蛋白在胃癌组织中的表白跟缺失细胞系的筛选的介绍部分。

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