microRNA194在腹透流出液培养的腹膜间皮细胞中的表白及与EMT的关

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microRNA194在腹透流出液培养的腹膜间皮细胞中的表白及与EMT的关

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毕业论文范文题目：microRNA194在腹透流出液培养的腹膜间皮细胞中的表白及与EMT的关，论文范文关键词：microRNA194在腹透流出液培养的腹膜间皮细胞中的表白及与EMT的关
microRNA194在腹透流出液培养的腹膜间皮细胞中的表白及与EMT的关毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：背景:持续不卧床腹膜透析(Continuousambulatoryperitonealdialysis,CAPD)是终末期肾脏疾病(End-stagerenaldisease,ESRD)的医治方法之一。腹膜纤维化(Peritonealfibrosis,PF)是各种起因引起腹膜病理改变的终极成果。在长期接收CAPD的过程中,腹膜长期裸露在生物不相容性的腹透液中,导致了腹膜间皮细胞剥脱,终极产生腹膜纤维化跟超滤衰竭(Ultrafiltrationfailure,UFF)。腹膜间皮细胞(Peritonealmesothelialcells,PMCs)被认为是引起纤维化的重要细胞,研究发明上皮细胞向间充质细胞的转分化(Epithelial-to-mesenchymaltransition,EMT)可能是肌成纤维细胞的重要来源之一,最近研究进一（略..）步证明EMT是腹膜纤维化的起始环节,但具体的机制仍还不太明白。microRNA(miRNA)是存在于动动物基因组中的功能性非编码RNA,可通过引诱靶mRNA的切割降解跟克制基因翻译,调控相干基因的表白。最新研究发明miRNA参加TGF-β引诱的细胞EMT构成。但miRNA在腹膜间皮细胞上的表白以及在腹膜EMT跟纤维化中的作用国内外尚未见报道。目标:探讨腹透流出液中培养的人腹膜间皮细胞转分化的改变以及miRNA194的表白,并分析其与EMT的相干性。方法:(1)取中南大学从属湘雅二病院及湘雅三病院腹膜透析核心的CAPD患者,按腹透时光分为两组:①新开管组②腹透一年以上组,取其夜间留腹腹透液分别培养人的腹膜间皮细胞,培养十四天后经倒置相差显微镜跟免疫组化染色(Immunohistochemistry,HIS)鉴定,原代细胞用于实验;(2)采（本文此处忽略..）取实时荧光定量PCR中的Taqman荧光探针法检测miRNA194在上述两组腹膜间皮细胞中的表白;(3)分辨用Westem-blot、realtimePCR法察看α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白跟mRNA的表白;(4)分析miRNA194表白以及与α-SMA跟E-cadherin表白的相干性。成果:(1)经鉴定,腹透流出液中培养的细胞95%以上为人腹膜间皮细胞(HPMCs)。(2)相差倒置显微镜察看新开管的患者腹透流出液培养的HPMCs状况上一小部分呈圆形,卵形的上皮样细胞,融合后呈铺路石状,与大网膜培养的腹膜间皮细胞类似;而大部分为上皮样细胞跟梭形的纤维样细胞的混淆存在;腹透一年以上的患者腹透流出液培养的HPMCs多为梭形的纤维样细胞。(3)RealtimePCRTaqman荧光探针法显示miRNAl94在腹膜间皮细胞中有表白,并（此处忽略..）且腹透一年以上的患者腹透流出液培养的HPMCs的表白程度明显高于新开管组患者的(P＜0.05)。(4)RealtimePCR显示腹透一年以上的患者腹透流出液培养的HPMCsE-cadherinmRNA表白程度明显低于新开管组患者的(P＜0.05);腹透一年以上的患者腹透流出液培养的HPMCsα-SMAmRNA表白程度明显高于新开管组患者的(P＜0.05)。Westem-blot显示腹透一年以上的患者腹透流出液培养的HPMCsE-cadherin蛋白表白程度比新开管患者的表白程度下调(P＜0.05);腹透一年以上的患者腹透流出液培养的HPMCsα-SMA蛋白表白程度比新开管患者的表白程度上调(P＜0.05)。(5)新开管跟腹透一年以上患者的腹透流出液培养的HPMCsmiRNA194表白与E-cadherinmRNA表白呈负相干,相干联数r=-0.952;miRNA194表白与α-SMAmRNA（略..）表白呈正相干,相干联数r=0.760,均有统计学意思(P＜0.05)。论断:(1)miRNA194在腹透流出液中培养的HPMCs上有表白,并且miRNA194的表白跟着腹透时光的延长明显增加。(2)腹透一年以上患者的腹透流出液中培养的HPMCs上的EMT相干分子标记物E-cadherin跟α-SMA表白较新开管患者的明显异样,提示跟着腹透时光的延长,腹透流出液中培养的HPMCs中EMT程度加重;(3)miRNA194与HPMCs的EMT相干基因异样表白相干,提示miRNA194与PD患者HPMCsEMT的产生有关。

以上为本篇毕业论文范文microRNA194在腹透流出液培养的腹膜间皮细胞中的表白及与EMT的关的介绍部分。

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