普氏破克次体120kDa名义蛋白基因的克隆与表白及重组蛋白抗原性的

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普氏破克次体120kDa名义蛋白基因的克隆与表白及重组蛋白抗原性的

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毕业论文范文题目：普氏破克次体120kDa名义蛋白基因的克隆与表白及重组蛋白抗原性的，论文范文关键词：普氏破克次体120kDa名义蛋白基因的克隆与表白及重组蛋白抗原性的
普氏破克次体120kDa名义蛋白基因的克隆与表白及重组蛋白抗原性的毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：普氏破克次体(Rickettsiaprowazekii,R.p)是专性细胞内寄生的革兰氏阴性菌，风行性斑疹伤寒的病原体。普氏破克次体种特异性的120kDa名义蛋白是发挥重要免疫作用的名义抗原，是发展风行性斑疹伤寒的诊断制剂跟亚单位疫苗的合适靶蛋白。本研究旨在克隆与表白普氏破克次体的120kDa名义蛋白抗原特异性较好的N端部分跟免疫反应性较好的C端部分的基因片段，并对表白的重组蛋白的抗原性进行研究。采取PCR方法，从普氏破克次体基因组中扩增到120kDa名义蛋白抗原N端基因片段跟C端基因片段，将两个基因片段分辨与原核表白载体pQE30连接，构建重组质粒（略..）pQE30／N跟pQE30／C。将重组质粒转化大肠杆菌，并用IPTG引诱转化的大肠杆菌表白目标蛋白。SDS-PAGE鉴定pQE30／N转化菌表白的N端重组蛋白的分子量为26kDa，pQE30／C转化菌表白的C端重组蛋白的分子量为67kDa。免疫印迹分析证明N端重组蛋白跟C端重组蛋白均能与普氏破克次体免疫血清特异反应，N端重组蛋白仅与破氏破克次体免疫血清产生穿插反应，C端重组蛋白则与破克次体属的多种破克次体免疫血清产生穿插反应。用ELISA分析重组蛋白与各种相干免疫血清的穿插反应，发明N端重组蛋白跟C端重组蛋白与破克次体属内的破克次体免疫血清有较强的（略..）穿插反应，然而与贝氏柯克斯体、恙虫病东方体以及其它相干病原体免疫血清无穿插反应，提示N端重组蛋白跟C端重组蛋白存在破克次体属特异性。用N端重组蛋白免疫血清跟C端重组蛋白免疫血清与各种相干病原菌抗原作间接免疫荧光分析，成果显示它们与破氏破克次体产生明显的穿插反应，而与其它破克次体的血清学穿插反应不明显。该成果提示该重组蛋白免疫血清可能用作检测普氏破克次体跟破氏破克次体的特异性抗体。为了证明重组蛋白的免疫原性，用纯化的N端重组蛋白跟C端重组蛋白免疫小鼠跟家兔。采取间接免疫荧光跟酶联免疫吸附实验检测免疫小鼠跟家兔的血清特异性抗体程（略..）度，成果发明N端跟C端重组蛋白均能有效地引诱小鼠跟家兔产生较高程度的特异性IgG，C端重组蛋白刺激小鼠跟家兔产生的体液免疫水军事医学科学院硕仁学位论文摘要平比N端重组蛋白的刺激程度高。两个重组蛋白分辨对同源蛋白免疫小鼠跟普氏破克次体全细胞抗原免疫小鼠的脾淋巴细胞进行体外刺激，均能引诱较高程度的淋巴细胞增殖。足垫肿胀实验提示C端重组蛋白可能引诱小鼠产生明显的特异性迟发型变态反应。采取RT-PCR方法，分析普氏破克次体全细胞抗原免疫小鼠的脾脏T淋巴细胞被不同抗原刺激后是否表白细胞因子正N一Y、IL一2、IL一4跟IL一10。成果发明用N（本文此处忽略..）端重组蛋白刺激的小鼠脾淋巴细胞表白了IFN一丫跟IL一2两种细胞因子，用C端重组蛋白刺激的小鼠脾淋巴细胞表白了正N一Y、IL一2跟IL一4三种细胞因子。提示两个重组蛋白可能有效地促进TH。细胞向TH，细胞方向分化，有助于清除细胞内的破克次体感染。普氏破克次体120kDa名义抗原的N端重组蛋白跟C段重组蛋白存在良好的抗原性，可能有效地引诱机体产生特异性的体液免疫跟细胞免疫应答。对于它们是否用作破克次体感染的血清学诊断抗原跟抗破克次体感染的亚单位疫苗值得进一步研究。

以上为本篇毕业论文范文普氏破克次体120kDa名义蛋白基因的克隆与表白及重组蛋白抗原性的的介绍部分。

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