PCR跟核酸探针检测猪源沙门氏菌四环素耐药基因tetC的研究

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PCR跟核酸探针检测猪源沙门氏菌四环素耐药基因tetC的研究

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毕业论文范文题目：PCR跟核酸探针检测猪源沙门氏菌四环素耐药基因tetC的研究，论文范文关键词：PCR跟核酸探针检测猪源沙门氏菌四环素耐药基因tetC的研究
PCR跟核酸探针检测猪源沙门氏菌四环素耐药基因tetC的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：本研究利用平板稀释法对范围化猪场分别的16株猪源致病性沙门氏菌进行药敏实验，测定了它们对四环素类抗菌素(四环素、土霉素、金霉素)的最低抑菌浓度(MIC)，参照美国临床实验室标准委员会(NCCLS)(1997)的标准，断定菌株的耐药性。成果表明，16株致病性沙门氏菌对四环素类抗菌素产生了广泛耐受性，耐药率达100％，其中MIC值＞128(μg／mL)的高耐药菌株13株，高耐药率81.25％，MIC为32(μg／mL)的低耐药菌株3株，低耐药率18.75％。且沙门（此处忽略..）氏菌对四环素类抗菌素存在穿插耐药性，即一旦沙门氏菌对四环素类中的一种抗生素产生耐药性，则将对同类其它品种抗生素也产生耐药性。根据文献报道及GenBank中注册的tetC基因序列设计引物，在国内首次用PCR技巧对16株猪源致病性沙门氏菌的四环素耐药基因tetC进行了扩增，成果在以染色体为模板的扩增体系中，未见有特异性产物；在以质粒为模板的扩增体系中，12株菌株获得特异性扩增产物，扩增产物大小约（本文此处忽略..）400bp，与药敏实验的阳性合乎率达75％，存在较高的检出率，表明猪沙门氏菌四环素耐药基因tetC只存在于质粒上。对tetC与血清型、MIC值、地理来源之间的关联分析表明tetC的有无与血清型、MIC值、地理来源无明显相干性。对来源不同、MIC值分辨为32μg／mL(DYPS1)跟128μg／mL(SLPS1-3)的2株菌株的PCR扩增产物进行序列测定，并与pBR322(GenBankAccessionNo：J01749)的四环素耐药基因（此处忽略..）tetC进行序列比较，成果表明，菌株DYPS1、SLPS1-3跟pBR322三者之间tetC的核苷酸同源率为97.7％～98.7％。在国内首次采取光生物素对高耐药菌株(SLPS1-3)的PCR扩增产物进行标记，制备核酸探针，用菌落原位杂交对猪源致病性沙门氏菌的tetC基因进行了检测，并对杂交前提进行优化。成果表明，13株受试菌株呈阳性，3株受试菌株呈阴性，与PCR检测成果阳性合乎率达93.75％，存在较好的反复性，制备的tetC（略..）探针存在较高的特异性跟灵敏度。本研究通过实验前提的筛选跟优化，树破的猪源致病性沙门氏菌四环素耐药基因tetC的PCR跟核酸探针检测技巧，可用于范围化猪场沙门氏菌四环素耐药性的分子风行病学监测。

以上为本篇毕业论文范文PCR跟核酸探针检测猪源沙门氏菌四环素耐药基因tetC的研究的介绍部分。

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