腺病毒载体介导的发夹状RNA克制三氧化二砷耐药的K562/AS2细胞MRP

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腺病毒载体介导的发夹状RNA克制三氧化二砷耐药的K562/AS2细胞MRP

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毕业论文范文题目：腺病毒载体介导的发夹状RNA克制三氧化二砷耐药的K562/AS2细胞MRP，论文范文关键词：腺病毒载体介导的发夹状RNA克制三氧化二砷耐药的K562/AS2细胞MRP
腺病毒载体介导的发夹状RNA克制三氧化二砷耐药的K562/AS2细胞MRP毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：[目标]构建MRP1特异性发夹状RNA重组腺病毒载体并研究其对耐三氧化二砷(ATO)的白血病K562/AS2细胞MRP1基因表白的克制造用。[方法]构建MRP1特异性发夹状RNA重组腺病毒,并感染K562/AS2细胞;用荧光实时定量PCR分析MRP1mRNA的表白程度;流式细胞仪检测MRP1蛋白表白;MTT的方法检测三氧化二砷及依靠泊苷的细胞毒作用。[成果]（本文此处忽略..）第一部分:将重组质粒pGenesil.1-MRP1-shRNA进行PCR扩增,插入入门载体pDONR,并进行同源重组,筛选阳性克隆进行正向跟反向测序。将测序正确的阳性pDONR-MRP1-shRNA穿梭质粒跟腺病毒骨架质粒pAd/BLOCK-iTTM-DEST按阐明书进行同源重组,并进行筛选。将抉择得到的菌株扩增培养,琼脂糖电泳DNA（本文此处忽略..）回收试剂盒提纯质粒,得到可能表白shRNA-MRP1的重组腺病毒质粒pAd-shRNA-MRP1。最掉队行鉴定跟滴度测定,感染293A细胞4-7天后可能察看到培养瓶里有明显的绿色荧光蛋白表白,阐明有感染才能的重组腺病毒包装成功。第二部分:用重组腺病毒pAd-MRP1-shRNA感染K562/AS2细胞,感染前后K562/AS2中MRP1mRNA跟蛋白表白程度分辨（本文此处忽略..）为(34.70±0.28vs4.19±0.03,P0.05)跟(26.40±0.16vs10.85±0.37,P0.05)。K562/AS2细胞对三氧化二砷及依靠泊苷耐药倍数分辨为(11.4078±0.3183vs1.6126±0.3015,P0.05),跟(5.9141±0.0149vs1.7664±0.1038,P0.05),逆转倍数分辨为(7.2409±1.3668)跟(3.3555±0.1886).[论断]成功构建了pAd-EGFP-U6-shRNA-MRP1重组腺病毒载体,该载体感染K562/SA2细胞后可能克制细胞MRP1基因表白以及逆转其对ATO跟依靠泊苷（略..）的耐药。

以上为本篇毕业论文范文腺病毒载体介导的发夹状RNA克制三氧化二砷耐药的K562/AS2细胞MRP的介绍部分。

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