高级脂肪酸类似物J的化学合成与耐药逆转机制的研究

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高级脂肪酸类似物J的化学合成与耐药逆转机制的研究

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毕业论文范文题目：高级脂肪酸类似物J的化学合成与耐药逆转机制的研究，论文范文关键词：高级脂肪酸类似物J的化学合成与耐药逆转机制的研究
高级脂肪酸类似物J的化学合成与耐药逆转机制的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的:1.合成高级脂肪酸类似物J。2.观察J对耐药细胞的逆转效应并探讨其可能的耐药逆转作用机制。方法:1.以芥酸为原料,合成高级脂肪酸类似物J,并采用TLC法对其进行鉴定,以紫外分光光度法测其物理常数,检测其对红细胞的溶血作用。2.采用阿霉素(ADM)大剂量冲击和浓度梯度递增联合法诱导BEL-7404和TCA8113耐药细胞株,以MTT比色法测定其耐药指数,并在光学显微镜下观察亲本细胞与耐药细胞的形态学变化。3.以MTT比色法测定化合物J对耐药细胞的逆转效应,实验共分三组,包括:肿瘤药物阳性对照组(亲本细胞或耐药细胞+ADM)、肿瘤药物与化合物联合用药组(耐药细胞+ADM+J)、肿瘤药物与阳性逆转剂联合用药组(耐药细胞+ADM+VER),计算逆转倍数。4.实验分为三组:亲本细胞对照组、耐药细胞对照组、耐药细胞+化（略..）合物J组,通过流式细胞仪检测化合物J对耐药细胞内罗丹明123的蓄积情况,以及测定化合物J对细胞谷胱甘肽-S转移酶活性的影响,探索其可能的耐药逆转作用机制。5.采用气相色谱法检测细胞内J的药物浓度。结果:1.合成高级脂肪酸类似物J,采用TLC法对其进行鉴定,两种展开体系中均呈单一斑点,Rf值分别为0.51、0.41,采用紫外分光光度法测得该化合物的pKa值为5.56,并且在100mmol/L时对红细胞不产生溶血作用。2.成功诱导出BEL-7404/ADM和TCA8113/ADM两种耐药细胞株,IC50值分别为(194.7±4.82)μg/ml、(87.94±0.78)μg/ml,耐药倍数分别为82.61和28.83倍。倒置显微镜下观察发现亲本细胞与耐药细胞均呈上皮样单层排列贴壁生长,耐药细胞较亲本细胞大小不一,部分细胞变形,并可见体积增大的异形细胞,镜下观察细胞长至90%底面积的时间（本文此处忽略..）延长。3.化合物J对BEL-7404/ADM和TCA8113/ADM的两种细胞均有明显的逆转作用,J的相对逆转效率分别达到85.30%、61.49%。4.采用流式细胞仪测定细胞内Rho123的蓄积情况,实验结果显示BEL-7404和TCA8113细胞内Rho123荧光很强,强度分别为(2260.94±125.25)和(2911.16±54.29),而BEL-7404/ADM和TCA8113/ADM细胞内Rho123荧光明显减弱,强度仅分别为(868.90±71.32)和(481.31±11.16),加入化合物J后,BEL-7404/ADM和TCA8113/ADM细胞荧光强度分别为(659.63±99.83)和(233.71±78.57)。5.BEL-7404和TCA8113细胞的谷胱甘肽-S转移酶活性分别为(90.8±20.04)U/mgprot和(94.1±18.68)U/mgprot,而BEL-7404/ADM和TCA8113/ADM细胞的谷胱甘肽-S转移酶活性分别为(246.3±27.16)U/mgprot和(222.1±22.85)U/mgprot,较亲本细胞有明显的提高,加入化合物J后,BEL-7404/ADM细胞（文章此处忽略..）的酶活性明显降低为(132.5±3.85)U/mgprot,同样,TCA8113/ADM细胞的酶活性亦明显降低为(142.6±6.20)U/mgprot。6.应用气相色谱法检测细胞内药物J的浓度,结果显示细胞内待测药物的量为8.99μg,培养液中待测药物的量为108.25μg,计算进入到细胞中的待测药物百分比为8.30%;结论:1.本实验可成功的合成化合物J,并确定其在逆转浓度时不会对红细胞产生溶血作用。2.化合物J在体外可明显提高肝癌耐药细胞BEL-7404/ADM和舌癌耐药细胞TCA8113/ADM对化疗药物的敏感性,具有明显的逆转作用。3.通过检测细胞内Rho123蓄积情况的变化,及对细胞谷胱甘肽-S转移酶活性影响的实验结果显示,化合物J在体外逆转耐药的机制与P-gp的药泵作用无关,可能是降低了细胞谷胱甘肽-S转移酶的活力,降低了其对化疗药物的解毒作用。4.建立（略..）了采用气相色谱法测定化合物J在细胞内药物浓度的检测条件。

以上为本篇毕业论文范文高级脂肪酸类似物J的化学合成与耐药逆转机制的研究的介绍部分。

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